无患子皂苷干预心肌肥厚机制的实验研究

王 靓， 施 慧， 龙子江， 黄金玲， 卞 海

(安徽中医学院药理学教研室，安徽合肥230038)

无患子皂苷是从落叶乔木无患子Sapindus mukorossi Gareth.的果实中提取的，它含有丰富的糖苷类物质，主要为三萜皂苷类、倍半萜糖苷类［1］。传统医学认为无患子的根、果可入药，具有清热，祛痰，消积，杀虫的功效。前期实验研究发现［2］无患子皂苷能够显著降低高血压模型动物的血压，并有效地干预高血压诱导的心肌肥厚。而心肌肥厚是高血压重要的合并症，是诱发心血管系统疾病的重要危险因素，现在前期研究基础上，进一步探讨无患子皂苷干预心肌肥厚的作用机制，为其临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要药品及仪器 无患子皂苷由安徽省医学研究所化学室提供;缬沙坦胶囊由北京诺华制药有限公司生产，国药准字H20040217;754紫外-可见分光光度计由上海精密科学仪器有限公司生产;GC-911型γ-放射免疫计数器由中国科学技术大学科技实业总公司生产;ALD、NO、NOS试剂盒由南京建成生物工程研究所提供;AngⅡ放免试剂盒由北京华英生物技术研究所提供。

1.2 试验动物 SD大鼠由安徽医科大学实验动物中心提供，合格证号:SCXK(皖)2005-0001。

1.3 方法 选取体质量180～220 g的雄性SD大鼠，随机分为假手术组、模型对照组、阳性对照组 (21.6 mg/kg)、无患子皂苷小剂量组 (54mg/kg)、中剂量组(162 mg/kg)、大剂量组 (486 mg/kg)，每组13只 (保证检测指标时每组剩余超过10只)。各组大鼠以3.5%水合氯醛10 mL/kg腹腔注射麻醉，打开腹腔，分离两肾动脉之间的腹主动脉，除假手术组外，各组沿腹主动脉平行放置一直径为0.7 mm的医用针头［3-4］，用手术线结扎后，抽出注射针头，闭合腹腔并注射青霉素钠4万单位/只，连续3 d抗感染，正常喂养4周，4周后假手术组、模型组以10 mL/kg蒸馏水灌胃，其余4组给予相应剂量药物，灌胃容积为10 mL/kg体质量，1次/d，连续给药4周。末次给药后30 min，各组大鼠用20%乌拉坦麻醉，腹主动脉取血离心后取血浆测AngⅡ、ALD、NO、NOS水平。

1.4 统计方法 数据采用SPSS 12.0统计软件包，采用单因素方差分析，组间比较采用t检验，以P＜0.05、P＜0.01分别表示统计学意义显著和非常显著。

2 结果

2.1 对心肌肥厚模型大鼠肾素-血管紧张素-醛固酮系统的影响 结果见表1。

表1 对心肌肥厚模型大鼠血浆AngⅡ和ALD水平的影响(±s，n=10)

表1 对心肌肥厚模型大鼠血浆AngⅡ和ALD水平的影响(±s，n=10)

注:与模型组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。

组 别 剂量/(mg·kg －1)AngⅡ/(ng·L －1)ALD/(ng·L －1)假手术组 － 84.51±8.46＊＊ 98.48±15.33＊＊模型对照组 － 151.28±13.54 176.57±19.75阳性对照组 21.6 98.52 ±9.46＊＊ 114.66 ±16.34＊＊无患子皂苷小剂量组 54 134.45±15.24* 151.43±22.39*无患子皂苷中剂量组 162 124.84 ±8.54＊＊ 135.52 ±24.64＊＊无患子皂苷大剂量租 486 113.54 ±12.34＊＊ 127.51 ±20.13＊＊

由表1可见，行腹主动脉缩窄术后，模型大鼠血浆AngⅡ和ALD水平显著升高，与假手术组比有显著性差异(P＜0.01)，说明模型大鼠由于压力超负荷刺激了RAAS，而给予无患子皂苷后，药物组模型大鼠AngⅡ和ALD水平显著降低，与模型组比有显著性差异 (P＜0.01，P＜0.05)，说明无患子皂苷能够有效地抑制模型大鼠RAAS。

2.2 对心肌肥厚模型大鼠NO生成系统的影响 结果见表2。

表2 对心肌肥厚模型大鼠NO和NOS水平的影响(x ±s，n=10)

由表2可见，行腹主动脉缩窄术后，模型大鼠血浆NO和NOS水平显著减少，与假手术组比有显著性差异 (P＜0.01)，说明模型大鼠由于压力超负荷抑制了NO生成系统，而给予无患子皂苷后，药物组模型大鼠NO和NOS水平显著降低，与模型组比有显著性差异 (P＜0.05)，说明无患子皂苷能够有效地激活模型大鼠NO生成系统。

3 讨论

心肌肥厚是常见的心血管疾病临床症状，主要表现为心肌细胞肥大和间质成分的改变 (或称为心脏重构)，心脏的顺应性和循环泵功能降低［5］。关于心肌肥厚的发生机制，很多年来一直是心血管疾病研究领域的热点，但是至今还没有一个明确的结论。大量研究认为多种生长因子、细胞因子、活性肽及激素等均可作为细胞外信号，通过与心脏内相应受体的结合及后续的细胞内信号转导途径，引起心脏内的多种细胞发生短效或长效反应，前者如心肌细胞的收缩、成纤维细胞分泌胶原等，后者包括心肌细胞的肥大，成纤维细胞的增殖等。而机械性压力负荷升高可以刺激多种分泌因子，这些分泌因子在心肌肥厚发生中的作用多年来一直是研究的热点，包括:RAAS、NO合成系统、儿茶酚胺类、胰岛素样生长因子 (IGF)等［6］。

AngⅡ具有强烈的正性变力作用和血管收缩作用，能介导心肌细胞增殖和凋亡、导致炎性反应及氧化损伤，参与心肌肥厚、心肌纤维化、成纤维细胞生长和胶原合成作用，在血管增生重构、高血压心肌肥厚等疾病的发生发展过程中起着及其重要的作用［7］。NO是血管内皮细胞合成和释放的血管舒张因子，它是以L-精氨酸为底物，在NOS的催化下形成的。NO除引起冠状血管舒张，调节冠脉供血等一系列效用外，可通过自分泌和 (或)旁分泌的途径抑制细胞增生和胶原合成改善心肌纤维化，是一种重要的抗心肌纤维化因子8］。研究证实RAAS和NO合成系统之间并非孤立而是紧密相关的，血管紧张素转化酶 (ACE)和缓激肽相互影响。ACE不仅决定着Ang的最终产生，同时通过失活缓激肽来调节NO的产生，因为活化的缓激肽可以刺激NOS的活性。Ang与 NO的作用正好相反，显然它们之间的作用平衡将决定心肌细胞的收缩功能和能量消耗，这也是心肌肥厚发生的决定因素［9-10］。

中医药干预心肌肥厚的研究起步较晚，目前对心肌肥厚的病因病机研究多参照高血压，认为本病涉及到心、肝、胆、肾诸脏腑，多为本虚标实之证，因心肾气阳两虚而导致外邪侵袭，致使气滞、血瘀、痰浊、寒凝、热结闭塞心络［11-14］。无患子皂苷是中药无患子中提取的有效成分，其具有清热、祛痰之功效，而前期的研究结果也显示其对于心肌肥厚有显著的抑制作用，故我们大胆推测，无患子皂苷可能通过清热解毒、祛痰化浊干预心肌肥厚的病理变化。

本实验通过行腹主动脉缩窄术复制了压力负荷型的心肌肥厚大鼠模型，通过对模型动物给予无患子皂苷证实了，无患子皂苷对模型大鼠的RAAS和NO合成系统均有显著的影响，能够通过抑制RAAS和激活NO合成系统而发挥干预心肌肥厚的作用，为无患子皂苷的临床应用奠定了基础。

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