扶正固本膏对正常小鼠免疫功能的调节作用

孙庆弟 王京昆 陆 瑛

1．云南省药物研究所，云南 昆明 650101;2．昆明医学院，云南 昆明 650101

扶正固本膏是中药复方制剂，具有培元固本、扶正祛邪之功效，主治肾阳不足。临床用于肾阳不足引起的腰膝酸软、畏寒肢冷、神疲乏力、性欲减退、夜尿频多等症。本研究采用正常小鼠连续灌胃给予扶正固本膏15天，观察其对小鼠免疫功能的调节作用。

1 实验材料

1.1 供试品

扶正固本膏，棕褐色稠厚半流体，批号20091227，10－15天为一个疗程。供试品辅料对照:棕黄色流体，批号:20100201。由本所科研管理部提供;给药时，高剂量组直接使用，低、中剂量组用灭菌纯化水配成约0.34g/ml、0.68g/ml的药液，使用前充分混匀。

1.2 实验动物

SPF级昆明种小鼠60只，雌雄各半，体重29～32g，由昆明医学院实验动物中心提供，许可证号:SCXK(滇)2005－0008，发证单位:云南省科学技术厅。

1.3 环境条件

温度范围:20～26℃ (日温差范围≤4℃);湿度范围:40%～70%;换气次数:10－15次/h;气流速度:0.1－0.2m/s;压强梯度:20Pa;空气洁净度:10000级;氨浓度(动态):0mg/m3;照明:12h:12h明暗交替;动物照度:18Lx;工作照度:376Lx;噪音:52dB。实验动物环境及设施检测报告编号:J201003031，检测单位:云南省医疗器械检定所。实验动物使用许可证:SYXK(滇)2005－0001，发证单位:云南省科学技术厅。

1.4 实验仪器 L104型电子分析天平，梅特勒－托利多仪器 (上海)有限公司;JJ2000型电子天平，常熟双杰测试仪器厂;1500全波长酶标仪，芬兰Thermo electron corporation。

1.5 统计方法 用SPSS17.0 for Windows软件进行统计分析。计量资料正态分布、方差齐用单因素方差分析，偏态分布或方差不齐用秩和检验。统计结果以x±SD表示，检验水准a=0.05。

2 分组及剂量

用Excel进行随机区组设计法，分为阴性对照组、辅料对照组、扶正固本膏低、中、高剂量组，每组10只，雌雄各半。阴性对照组给予灭菌纯化水，辅料对照组给予扶正固本膏辅料，给药组按6.8、13.6、27.2g/kg给予扶正固本膏，各组均按20ml/kg连续给药15天。

3 方法与结果

SPF级昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为阴性对照组、辅料对照组、扶正固本膏低、中、高剂量组，每组10只。阴性对照组给予灭菌纯化水，辅料对照组给予扶正固本膏辅料，给药组按6.8、13.6、27.2g/kg给予扶正固本膏，连续给药15天。末次给药60min，按0.1 ml/10 g小鼠尾静脉注射20%印度墨水，分别于注射后2、12 min用毛细管于小鼠眼眶静脉丛取血10ul置于2ml 0.1%NaCO3溶液中混匀，用1500全波长酶标仪于波长680 nm处测定吸光度 (A);颈椎脱臼处死小鼠取肝、脾、胸腺称质量，按公式计算廓清指数 (K)、吞噬系数 (a)和脏器系数。K=(lgA1－lgA2)/(t2－t1)=(lgA1－lgA2)/10，α =K1/3×体质量/(肝质量+脾质量)，脏器系数=脏器质量/体质量［1］。

表1 对小鼠体重的影响 (n=10)

表2 对小鼠免疫器官的影响 (n=10)

表3 对小鼠碳粒廓清的影响 (n=10)

表1显示，连续灌胃给予小鼠扶正固本膏15天，对小鼠体重无明显影响，各组动物体重组间比较无显著性差异(P＞0.05);表2显示，中、高剂量组脾脏指数与阴性对照组比较有显著性差异 (P＜0.05/P＜0.01)，说明扶正固本膏可增加小鼠脾脏指数;表3显示，低、中、高剂量组廓清指数及吞噬系数与阴性对照组比较有显著性差异 (P＜0.05/P＜0.01)，说明扶正固本膏能增强巨噬细胞的吞噬功能，加速碳粒的清除。

4 讨论

随着社会的发展，现代生活节奏的加快，人们面临的压力也日益沉重，激烈的社会竞争使人心理应激明显增多。先天原因，后天原因:药误、久病、七情所伤、房劳、饮食等多种因素导致人群出现肾阳虚。

扶正固本膏具有培元固本、扶正祛邪之功效，主治肾阳不足。临床用于肾阳不足引起的腰膝酸软、畏寒肢冷、神疲乏力、性欲减退、夜尿频多等症。

中医学认为，肾为先天之本，肾藏精是肾的主要生理功能之一。精是构成人体的基本物质，也是人体各种功能活动的物质基础。精能化气，肾精所化之气称为“肾气”。肾的精气盛衰，关系到生殖和生长发育的能力。故古代医家认为肾为五脏之本［2］。肾脏有病必影响其他脏腑之功能，反之脏腑有病，久必及肾。因此，肾气盛衰决定着人体的健康状况。肾气充盛，则五脏六腑功能正常，人体正气充盛则健康无病［3］。所谓正气就是人体的功能活动和对外界环境的适应能力，是抗病能力和康复能力，是机体识别和排除外源性异物维持自身生理平衡与稳定的能力。而现代免疫学认为，人体的免疫功能表现为防御、自稳、监视3个方面。因此，正气与现代免疫理论密切相关。中医学认为，肾为先天之本，为正气之根，说明了肾与免疫功能关系更为密切。大量研究表明，肾虚患者常有免疫功能的紊乱，而补肾药有一定的免疫调节作用［4］。

人体免疫是人体对外界的病原微生物等的防御机能，或者说是防御系统。在正常情况下，它能够保证人体不受外界病原微生物的侵害。通常说的人体免疫力就是指人体的免疫系统抵御外来病原微生物等侵害的能力。在人体免疫力正常的情况下，人体自身能够抵御相当多的病菌的侵害，避免对人体造成损伤［5］。

机体的免疫系统是由非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫共同构成的防御系统，它通过识别、吞噬、呈递和分泌细胞因子或形成抗体来清除外来病原微生物和体内的异常细胞，对于维护体内环境具有十分重要的意义［6］。脾、胸腺是小鼠重要的免疫器官，观察其质量的变化，可以直接地反应小鼠免疫功能的变化;碳粒廓清实验是通过静脉注射一定大小的颗粒物质，其迅速被肝、脾等器官内网状内皮细胞吞噬而使其在血浆浓度降低，从而可以了解整个单核巨噬细胞系统的吞噬功能［7］。

脾在胚胎期是重要的造血器官，出生后造血功能停止，但仍然是血细胞尤其是淋巴细胞的再循环场所，脾还是发生免疫应答的重要基地。此外，脾还有两个显著的特点:(1)产生抗体，脾富含B细胞和浆细胞，因此是全身最大的抗体产生器官，尤其是产生IgM和IgG，其数量对调节血清抗体水平起很大作用;(2)分泌体液因子，脾可以合成补体 (C5和C8等)和备解素等重要的免疫效应分子。长期以来人们对胸腺的功能不甚了解，直到60年代初Miller和Good分别用切除新生小鼠和家兔胸腺的办法证明了胸腺的免疫功能。胸腺能训化T细胞、分泌胸腺激素、促进肥大细胞发育、调节机体的免疫平衡，维持自身的免疫稳定性，是重要的中枢免疫器官，也是T淋巴细胞分化成熟的场所。

本实验结果显示，扶正固本膏可增加正常小鼠脾脏质量，能增强巨噬细胞的吞噬功能，加速碳粒的清除。提示，扶正固本膏对小鼠体液免疫和非特异性免疫均有一定增强作用。

［1］岑晓江，侯思名等．海枫藤水煎液对小鼠免疫功能的影响［J］．细胞与分子免疫学杂志，2011，27(6)．

［2］沈自尹．从肾本质研究到证本质研究的思考与实践［J］．上海中医药杂志，2000(4):44－47．

［3］颜亭祥，李震，陶汉华等．“劳倦过度房室不节”肾阳虚模型小鼠免疫功能的观察［J］．山东中医药大学学报，2007，31(1):79－81．

［4］鲁珽，潘永明．抗衰老片对实验性肾阳虚小鼠免疫功能的影响［J］．甘肃中医学院学报，2011，28(2)．

［5］徐志毅．复方枸杞袋泡茶对免疫力低下小鼠免疫功能的影响［J］．临床合理用药，2011，4(3C):27．

［6］韩峰，陈建萍，谢婷等．益甘颗粒剂对小鼠免疫功能的影响［J］．时珍国医国药，2004，15(4):124－126．

［7］吴克枫等．不同剂量环磷酰胺对小鼠的免疫毒性研究［J］．贵州医药，1999，23(2):92－93．