复方洛美沙星即型凝胶滴耳剂的质量标准研究

俞 冰，刘志承 ，李 东，温中明，陈丽娜

盐酸洛美沙星(lomefloxacin)是第3代喹诺酮类抗菌药物，抗菌谱广，对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌及大肠杆菌都有很强的抗菌活性[1]。将洛美沙星制成滴耳液后局部用药，则可使药液与患部直接接触，在耳漏和中耳黏膜中获得高浓度，起到杀菌作用，其副作用少，无耳鸣及听力损害[2－4]。地塞米松(dexamethasone)为甾体类强效抗炎药，可以减轻病变过程中的炎症反应及组织损害，减少疤痕形成，抑制抗原抗体反应，减轻炎细胞浸润，使炎症反应过程缩短。临床微生物研究结果显示，局部的感染常由细菌引起，细菌感染通常会导致炎症的发生，故用抗菌药物治疗感染的同时应用抗炎药来避免或减轻炎症很有必要[5－6]。为满足临床需要，笔者研制了复方洛美沙星即型凝胶滴耳剂，并对其质量标准进行了研究，现报道如下。

1 仪器与试药

KNAUER高效液相色谱仪，包括K－2501型紫外检测器(德国诺尔);TU－1810型紫外－可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);Acculab电子天平(德国艾科勒);KQ2200B型超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司);PHS－3C型精密pH计(上海雷磁精密仪器厂)。盐酸洛美沙星对照品(批号为0452－200001)，地塞米松对照品(批号为100122－200304)均购自中国药品生物制品检定所;复方洛美沙星即型凝胶滴耳剂(自制，批号分别为 20090201，20090202，20090203);乙腈(色谱纯)，枸橼酸(分析纯)均购自天津市科密欧化学试剂开发中心;三乙胺(分析纯，上海化学试剂采购供应站);三蒸水(本实验室自制)。所有试液使用前均经0.45μm微孔滤膜过滤。

2 方法与结果

2.1 性状

本品为均匀、细腻、易涂布、易洗除的淡黄色半透明凝胶剂。

2.2 酸碱度测定

取样品5 g，用纯化水25 mL稀释后测定 pH。结果pH为5.7，符合滴耳剂弱酸性的要求。

2.3 凝胶稳定试验

离心试验:取样品适量，置离心管中，以3 000 r/min的转速离心30 min后，观察有无分层现象。结果凝胶剂无分层现象。

耐热耐寒试验:取样品适量，分别置55℃干燥箱6 h，－18℃冰箱24 h，观察凝胶剂有无分层现象，外观颜色和黏度有无变化。结果凝胶剂无分层现象，外观颜色和黏度均无变化。

放置试验:将本制剂在室温下避光放置3个月，观察凝胶剂有无外观颜色和黏度的变化。结果凝胶剂外观颜色和黏度均无变化，稳定性好。

2.4 含量测定[3－4]

2.4.1 紫外检测波长选择

取盐酸洛美沙星对照品 0.005 9 g和地塞米松对照品0.010 3 g，置100 mL量瓶中，加乙腈使溶解并稀释至刻度，取1 mL至10 mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，得洛美沙星质量浓度为5.9 μg/mL 和地塞米松质量浓度为 10.3 μg/mL 的溶液。在200～400 nm波长范围内进行紫外扫描，结果地塞米松在240 nm波长处有最大吸收，洛美沙星在287 nm波长处有最大吸收，两者互不干扰，见图1。故选择240nm为地塞米松的测定波长，287nm为洛美沙星的测定波长。

图1 紫外扫描图

2.4.2 色谱条件和系统适用性试验

洛美沙星:色谱柱为 Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm，5μm)，流动相为0.05 mol/mL枸橼酸溶液(用三乙胺调节pH至4.0)－ 乙腈(85 ∶15)，流速为 1 mL/min，柱温为 40 ℃ ，UV 检测波长为287 nm，进样量为20μL，灵敏度0.08 AUFS。定量方法为外标法。在此条件下，洛美沙星保留时间为18 min，理论板数按洛美沙星峰峰计算应不低于2 500。标准色谱见图2 A。

图2 洛美沙星高效液相色谱图

地塞米松:色谱柱为 Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈 － 水(40 ∶60)，pH 为 3.0～3.5，流速为 1 mL/min，柱温为40℃，UV检测波长240 nm，灵敏度0.08 AUFS;定量方法外标法。理论板数按地塞米松峰计算应不低于4 753。标准色谱见图3 A。

图3 地塞米松高效液相色谱图

2.4.3 标准曲线绘制

洛美沙星:精密称取于105℃干燥至恒重的盐酸洛美沙星对照品12.1 mg，置200 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为60.5μg/mL的对照品溶液，分别精密量取1，3，5，8，12，15 mL，置 50 mL 量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，得质量浓度分别为 1.21，3.63，6.05，9.68，14.52，18.15 μg/mL的对照品溶液，照高效液相色谱法[7]，在2.4.2项下色谱条件下，分别取20μL注入液相色谱仪，每样进样2次，记录色谱图，以质量浓度(C)为横坐标、峰面积(A)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 A=50 337.19C+6 276.33，r=0.999 8。结果表明，洛美沙星质量浓度在1.21～18.15μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系。

地塞米松:精密称取于105℃干燥至恒重的地塞米松对照品0.015 1 g，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并定量稀释制得质量浓度为0.151 g/L的储备液。分别精密量取储备液适量，用甲醇配制成质量浓度分别为 0.015 1，0.018 12，0.024 16，0.030 2，0.036 24 g/L的工作溶液(分别相当于标示量的50%，60%，80% ，100% ，120%)，照高效液相色谱法[7]，在 2.4.2 项下色谱条件下，分别取上述对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，各质量浓度进样3次，记录色谱图，以质量浓度(C)为横坐标、峰面积(A)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 A=295.2 C－113.16，r=0.999 9(n=3)。结果表明，地塞米松质量浓度在 0.015～0.036 g/L范围内与峰面积线性关系良好。

2.4.4 回收率试验

洛美沙星:取盐酸洛美沙星对照品适量(相当于处方量的120%，100%，80%各3份)，精密称定，模拟处方加入与之相对应量的空白辅料，制得洛美沙星即型凝胶滴耳剂。分别精密量取1 mL置9个10 mL，量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，再分别精密取1 mL置50 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。另取盐酸洛美沙星对照品适量，精密称定，用流动相稀释制成每1 mL中含盐酸洛美沙星6.62μg的溶液，作为对照品溶液。按2.4.2项下色谱条件，分别取对照品、供试品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。结果平均回收率为99.8%，RSD为0.55%(n=5)。

地塞米松:取地塞米松对照品适量(相当于处方量的80%，100%，120%各3份)，精密称定，模拟处方加入与之相对应量的空白辅料，按工艺制得地塞米松滴耳液。分别精密量取3 mL置9个100 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，再分别精密量取1 mL置100 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，再分别精密量取1 mL置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀，得供试品溶液。另取地塞米松对照品适量，精密称定，用甲醇稀释制成每1 mL中含地塞米松0.3μg的溶液，作为对照品溶液。按2.4.2项下色谱条件，分别取对照品、供试品溶液各20μL注入色谱仪测定，按外标法以峰面积计算。结果平均回收率为99.01%，RSD为2.90%(n=5)。

2.4.5 精密度试验

洛美沙星:精密称取于105℃干燥至恒重的盐酸洛美沙星对照品12.1 mg，置200 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为60.5μg/mL的对照品溶液，分别精密量取1，5，15 mL，置50 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，得质量浓度分别为 1.21，6.05，18.15 μg/mL 的对照品溶液。按 2.4.2 项下色谱条件，每个质量浓度分别取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，以洛美沙星峰面积计算。结果的 RSD分别为0.75%，0.60%，0.83%(n=5)，表明该法精密度良好。

地塞米松:精密称取地塞米松对照品0.002 8 g，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，取1 mL置100 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度作为对照品溶液，取1 mL置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，按2.4.2项下色谱条件，精密量取该对照品溶液20μL注入色谱仪，连续进样6次，记录色谱图，以地塞米松峰面积计算。结果的 RSD为0.15%(n=6)，表明该法的精密度良好。

2.5 样品含量测定

洛美沙星:精密量取样品1 mL，置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，再精密量取1 mL，置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取盐酸洛美沙星对照品适量，精密称定，用流动相稀释制成每1 mL中含洛美沙星6.0μg的溶液，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μL，按2.4.2项下色谱条件，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。结果见表1。

表1 样品含量测定结果(n=3)

地塞米松:精密量取样品3 mL(约相当于地塞米松3 mg)，置100 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，去掉初滤液，再精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μL，按2.4.2项下色谱条件，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。结果见表1。

3 讨论

复方洛美沙星滴耳液为含有洛美沙星和地塞米松两主药的复方制剂，在控制产品质量时需要分别对两主药的含量进行检测，由于两主药在同一色谱条件下不容易完成，故对两个主药需分别检测，建立不同的色谱条件。

含量测定方法学考察结果表明，本法精密度、线性、回收率均较好。样品可不经分离，而即型凝胶空白基质在此无吸收，对测定无干扰，方法快速简便，故建立的高效液相色谱法适用于本品中洛美沙星和地塞米松的含量测定。方法不足之处是保留时间较长，影响分析效率。

[1]Davis R，Bryson HM.Levofloxacin:A review of its antibacterial activity，Pharmacokinetics and theraopeutic efficacy[J].Drugs，1994，47:677 －700.

[2]李 东，张 雁，陈晓凯，等.加替沙星凝胶滴耳剂的质量控制和稳定性研究[J].中国药业，2004，13(8):26.

[3]陈丽娜，李 东，谢燕贤，等.HPLC法测定复方洛美沙星即型凝胶滴耳剂中洛美沙星的含量[J].中国药房，2010，21(25):2 371－2 373.

[4]陈丽娜，李 东，谢燕贤，等.高效液相色谱法测定复方洛美沙星即型凝胶滴耳剂中地塞米松含量[J].中国药业，2010，19(12):36－37.

[5]奚念朱.药剂学[M].第3版.北京:人民卫生出版社，1996:232－233.

[6]周 军，孙增先.复方左旋氧氟沙星滴耳液的制备及临床观察[J].中国药业，2002，11(12):43.

[7]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社，2005:184，附录 28.