别鹏飞,金玉姬,董传兴,安家慧,王光慧,韩洪军 (吉林医药学院组织与胚胎学教研室,吉林 吉林132013)
中药菟丝子已有报道具有滋补肝肾、壮阳、固精缩尿、安胎、明目、降压等功效,近年来又有其抗氧化和抗衰老作用的报道[1]。本文从菟丝子的药物成分入手,重点论述菟丝子在抗氧化、抗衰老中的作用,并展望菟丝子在抗氧化、抗衰老中的应用价值。
菟丝子生药成分主要包括黄酮类、多糖类、生物碱类、萜类、甾体类、挥发油以及木质素等化合物[2-5]。目前从菟丝子中提取的成分有山奈酚、槲皮素、金丝桃甙、紫云英甙、新芝麻脂素、山萘酚-3-O-β-D吡喃葡萄糖苷、4,4,6-三羟基橙酮、软脂酸、硬脂酸、花生酸、β-谷甾醇、胡萝卜甙、虫漆醋酸,某些氨基酸及锌、铁、铜、锰等微量元素。其中以黄酮类化合物为主要药效成分,而主要的黄酮类化合物有山奈酚、槲皮素、金丝桃甙、紫云英甙等[6]。
近年来,大量的体内和体外研究表明,黄酮类化合物具有较强的抗氧化和清除自由基的活性。有人利用体外产生活性自由基系统,通过自由基的清除作用证实菟丝子黄酮是一种有效的自由基清除剂。菟丝子的主要药效成分是黄酮,菟丝子黄酮对下丘脑-垂体-性腺轴内分泌功能具有多方面的影响,具有类雌激素样活性[7],因此可能是补肾安胎的物质基础[8-10]。此外菟丝子黄酮具有成骨细胞活性的促进作用、提高垂体对促性腺释放激素的反应性等广泛的生物学效应[11]。
王晟等通过测定丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、活性氧(ROS)等氧化损伤指标,原位末端标 记 (TdT-mediated dUDP-Xnick end labeling,TUNEL)法检测睾丸细胞凋亡,观察中药菟丝子总黄酮对大鼠睾丸细胞氧化损伤和凋亡的保护作用。结果表明,不同剂量的菟丝子总黄酮可抑制无血清培养所诱导的大鼠睾丸细胞氧化损伤和凋亡,且其作用具有剂量依赖性,以500 mg/L最明显[12]。
真国辉等从菟丝子中提取纯化黄酮类活性成分(CF),采用MTT法检测细胞活力,DPPH测定CF在无细胞体系中对自由基的清除能力,利用Hoechst33258染色和流式细胞仪技术对凋亡细胞进行形态观测和比例测定。不同剂量CF预处理可提高PC12细胞存活率,明显抑制细胞的凋亡,降低细胞的凋亡比率;CF对DPPH自由基的清除率呈剂量依赖性增强。CF对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用,其机制可能是通过清除自由基、提高抗氧化酶活性从而抑制细胞凋亡[13]。
吴春等用DPPH体系、羟基自由基体系、烷基自由基引发的亚油酸氧化体系、超氧阴离子自由基体系对菟丝子黄酮的抗氧化活性进行研究,并同维生素C(Vc)、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)进行了比较,结果发现菟丝子黄酮对上述自由基的清除率可达91.56%、89.39%和87.65%;其对烷基自由基的抑制率为84.22%,且其抗氧化活性强于Vc和BHT,也可以说明菟丝子黄酮是一种天然有效的自由基清除剂[14]。将菟丝子黄酮制成脂溶性微胶囊后,考察了其在油脂中的抗氧化活性。结果表明,微胶囊菟丝子黄酮能明显延长油脂过氧化的诱导期,Vc、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、EDTA等对其抗氧化作用均具有协同增效作用,与合成抗氧化剂混合使用时,其抗氧化能力均好于只添加单一抗氧化剂的效果[15]。
这些充分证明菟丝子黄酮有抗氧化和抗细胞凋亡的作用。
蔡曦光等通过试药组衰老小鼠,分别灌胃给菟丝子多糖,7周后分别测定心、肝、肾中MDA、超氧化物歧化酶(SOD)、胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和脑中脂褐质(LF),胸腺指数和脾脏指数,结果发现受试组小鼠分别灌服不同剂量的菟丝子多糖能使心、肝、肾组织中MDA含量和脑中LF不同程度下降,SOD及GSH-Px活力不同程度提高,胸腺指数和脾脏指数不同程度升高,显示菟丝子多糖有显著抗衰老作用[16-17]。王昭[18]等采用 D-半乳糖所致衰老模型小鼠,灌服菟丝子水煎剂30 d后测定红细胞C3b受体花环率(RBC2C3bRR)及免疫复合物花环率(RBC2ICR)。结果发现菟丝子水煎剂能提高小鼠RBC2C3bRR(P<0.05),使小鼠RBC2ICR降低(P<0.05),说明菟丝子明显增强衰老模型小鼠的红细胞免疫功能,具有延缓衰老作用。刘玉平[19]及蔡曦光等[20]将大鼠随机分为青春期对照组、衰老模型组和模型给药组,用D-半乳糖制造衰老模型,同时模型给药组灌服菟丝子醇提液并在不同时间杀鼠,测定糖化血红蛋白(GHb)、糖化血清蛋白(GSP)、MDA水平及SOD活性,发现菟丝子醇提液使大鼠GHb、GSP、MDA水平明显减低(P<0.05,P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.01),说明菟丝子抑制非酶糖基化反应,减少自由基生成,菟丝子作为一种抗氧化剂,具有一定的抗衰老作用。《太平圣惠方》中所收载的抗衰益寿方剂中出现概率最多的药物中就含有菟丝子,研究表明,菟丝子是通过延长细胞生存期,调节机体免疫功能,改善机体代谢,改善内脏机能以及提高机体应激能力而实现抗衰延寿作用的[21]。
胡淑平等[21]在关于菟丝子研究进展中提到,通过观察菟丝子水煎剂对老龄小鼠红细胞膜SOD活性、血清过氧化脂质(LPO)水平、脑内脂褐素含量(采用Sohal法[22])及肝单胺氧化酶B(MAO-B)活性的影响发现,菟丝子可使老龄小鼠SOD活性增强,血清LPO、脑脂褐素含量及MAO-B活性明显降低。临床试验[23]也表明,菟丝子能使糖尿病患者红细胞膜SOD活性增强,抑制体内自由基的产生,使血清LPO水平明显下降。可见菟丝子能增加老龄小鼠SOD活性,抑制体内脂质过氧化和脑脂褐素的生成。张晓鹤[24]在对菟丝子的研究进展中提到,在对4种菟丝子补肾壮阳作用进行比较时发现,其多糖成分能显著降低阳虚小鼠血清中MDA的含量,增加SOD活性,使小鼠胸腺、脾脏、肝、肾等脏器增重,而SOD活性降低和MDA含量增加能导致衰老。
以上也可以说明,菟丝子总提取物具有充分的抗氧化、抗衰老作用,现代研究已证明其有一定的延寿作用,但其作用机制仍需深入研究。
目前,对菟丝子药理作用的研究主要集中在调节下丘脑-垂体-性腺轴功能、免疫、抗衰老、神经营养、保肝等方面,这为菟丝子补肾壮阳、安胎、抗衰老等临床应用提供了实验依据。但是,菟丝子中起主要作用的有效成分至今尚不明确,菟丝子各成分之间协同、拮抗等相互作用仍需进一步研究,若能对其成分进行分离、纯化,其中的抗氧化、抗衰老成分有望成为纯天然有效物。所以分离纯化其有效成分,揭示其作用机制,将为菟丝子的抗氧化、抗衰老的临床应用开拓广阔的前景。
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