HPLC测定银叶桂中桂皮醛的含量

陈 浩 苟满枝 刘 航 徐 健

1.乐山市食品药品检验所，四川 乐山 614000;2.宜宾市食品药品检验所，四川 宜宾 644000

樟科樟属植物银叶桂Cinnamomum mairei Levl.分布于我国云南东北部、四川西部等地。为《四川省中药材标准》2010年版所载“官桂”来源，药用部位干燥树皮。有散寒止痛之功。本文根据文献报道及药效学研究结果，采用高效液相色谱法对银叶桂中含有的桂皮醛进行了含量测定研究，为进一步建立官桂药材质量标准提供依据。

1 仪器与试药

美国Agilent1100液相色谱仪;桂皮醛对照品为中国药品生物制品检定所提供 (批号110710－201016，98.6%，含量测定用);银叶桂样品分别采自宜宾市宜宾县、屏山县、长宁县，购自乐山市中药材公司、乐山市龙马药业、成都中药材市场;乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱Diamonsil C18(250×4.6mm)5μm;流动相乙腈－水 (35∶65)，检测波长为290nm，柱温为35℃，流速为1.0ml/min。对照品及样品的HPLC图见图1。

2.2 供试品溶液的制备 取样品粉末 (过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理 (功率350W，频率35kHz)10分钟，放置过夜，同法超声处理一次，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 线性范围的考察 精密称取桂皮醛对照品 (含量98.6%)48.11mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取10ml置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为贮备液;精密量取贮备液1.0、2.0、5.0、10.0、50.0ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取上述对照品溶液及贮备液各10μl，注入高效液相色谱仪分别进行测定。以进样量 (μg)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为Y=11794x+22.813，r=0.9999，结果表明桂皮醛在0.009487～0.9487μg与峰面积线性关系良好。

2.4 精密度试验 精密量吸取桂皮醛对照品溶液10μl，连续进样5次，结果桂皮醛峰面积的RSD为0.21%。

2.5 稳定性试验 精密量吸取供试品溶液10μl，分别于0，4，8，12，24h按上述色谱条件进样测定，计算RSD为0.52%。结果表明供试品溶液中桂皮醛在24h内稳定。

2.6 重复性试验 精密称取银叶桂药材同批号样品 (宜宾长宁)6份，每份约0.5g，按前述供试品制备方法及色谱条件进行桂皮醛含量测定，测得桂皮醛平均含量 (按干燥品计算)为0.38%，RSD为1.52%。

2.7 回收率试验 精密吸取浓度为0.9487mg/ml的对照品溶液1.0ml，共6份，分别置50ml锥形瓶中。取已知含量的样品 (宜宾长宁，HPLC法测定含量为0.38%)6份，每份约0.25g，精密称定，置上述锥形瓶中，按拟定方法进行供试品溶液制备和桂皮醛含量测定 (按干燥品计算)，结果见表1。

以上试验结果表明，该方法准确度良好。

2.8 样品测定

按正文含量测定方法测定6批样品中桂皮醛含量，结果见表2。

表1 回收率测定结果

表2 样品的含量测定结果

3 讨论

3.1 色谱条件的选择

3.1.1 测定波长的选择 采用甲醇作溶剂制备桂皮醛对照品溶液，在200～500nm波长下扫描其光谱图，结果在290nm波长处有最大吸收，故测定波长选定为290nm。

3.1.2 流动相的选择 采用流动相乙腈－水 (35:65)对本品供试品溶液进行系统适用性考察，结果在该流动相下，本品桂皮醛峰形对称，理论板数6000，分离度符合要求。因此选定流动相乙腈－水 (35:65)作为测定流动相。

3.2 提取方法及时间的考察

取本品粉末0.5g，3份为一组，精密称定，置锥形瓶中，每组分别精密加入甲醇25ml、乙醇25ml，称定重量，分别采用:1、超声处理10min，再称定重量，用所加溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，即得;2、超声处理10min，放置过夜，同法超声处理一次，再称定重量，用所加溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。进样量10μl，按上述选定的色谱条件实验，结果表明:采用甲醇超声处理10min，静置过夜再超声处理10min优于其它方法。因此选定本文提取方法。

3.3 本实验建立的银叶桂药材中测定桂皮醛的高效液相色谱法，具操作性、稳定性及代表性。测定了银叶桂多批次药材中桂皮醛含量，为官桂药材质量控制提供了依据。

［1］国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京:中国医药科技出版社，2010.

［2］中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志［M］.北京:科学出版社，1983.

［3］肖培根.新编中药志［M］.北京:化学工业出版社，2002.