疏肝健脾中药复方对IBS－D患者血红色氧合酶－1和一氧化碳影响的研究

詹 奇

广东省广州市正骨医院，广东 广州 510045

肠易激综合征 (Irritable Bowel Syndrome，IBS)是一种肠道功能紊乱性疾病，临床主要症状有腹痛、腹胀、排便习惯改变及大便性状异常等，持续存在或间歇发作。随着我国人民生活水平提高、社会竞争加剧、工作生活节奏加快，本病的发病率持续升高。目前本病的具体病因病机尚不十分清楚，多数学者认为是各种因素引起神经－内分泌－免疫方面的异常所导致。由于病因及其发病机制尚不十分明了，目前现代医学临床尚缺乏单一、安全、完全有效的治疗IBS的药物，中医药治疗IBS的疗效及作用机制越来越受到人们的重视［1］。

我们研究了疏肝健脾中药复方对IBS－D患者治疗前后结肠粘膜HO－1及血CO变化情况，旨在探讨疏肝健脾中药复方治疗IBS－D的可能机制。现将研究报告如下。

1 资料与方法

1.1 IBS诊断及亚型分类标准［2］

1.1.1 IBS诊断标准 最近3个月内，每月至少3天出现反复发作的腹痛或腹部不适，并具有下述各项中的2项或2项以上:(1)排便后症状改善;(2)发作时伴排便频率的改变;(3)发作时伴粪便性状的改变。注意，诊断前症状出现至少6个月;腹部不适是指不舒服的感觉，而非疼痛。

以下症状可支持诊断:(1)每周＜3次排便，或每天＞3次排便;(2)粪便为块状/硬便或糊状/稀水样;(3)排便费力;(4)排便急迫感或不尽感;(5)排黏液;(6)腹胀。

1.1.2 IBS临床亚型分类标准

腹泻型 (IBS－D) 至少25%的排便为糊状粪或水样粪，且硬粪或干球粪＜25%的排便。

便秘型 (IBS－C) 至少25%的排便为硬粪或干球粪，且糊状粪或水样粪＜25%的排便。

混合型 (IBS－M) 至少25%的排便为硬粪或干球粪，且至少25%的排便为糊状粪或水样粪。

不定型 (IBS－U) 粪便性状不符合以上各型标准。

1.2 肝郁脾虚证中医辨证标准［3］

主症:(1)脘腹胀满或隐痛 (为必备);(2)大便不尽感;(3)大便溏或时溏时干;(4)心烦失眠;(5)舌质淡或淡红;(6)脉弦或弦细;

次症:(1)纳差食少;(2)神疲体倦;(3)少腹胀痛;(4)肠鸣矢气;(5)食后腹胀。

凡具备主症 (1)+三项主症;或者具备主症 (1)+其它主症两项+次症两项，即可诊断为肝郁脾虚证。

1.3 病例分组及用药

按照随机、对照、盲法的原则，将符合纳入标准的受试病例60例，随机分为疏肝健脾法治疗组 (治疗组)30例和安慰剂对照组 (对照组)30例，同时设立健康志愿者组 (健康组)15例。

治疗组给予疏肝健脾法的中药复方 (由柴胡10、白芍15g、枳实15g、党参15g、茯苓15g、白术15g、炙甘草6g、延胡索15g、防风10g组成，功效为疏肝、健脾、理气、止痛)，用该中药复方提取物做成胶囊，4粒/次，3次/日，4周为一疗程;对照组给予安慰剂 (安慰剂主要由淀粉组成，剂型、外观同治疗组)，4粒/次，3次/日，4周为一疗程。健康组不给予药物治疗。

1.4 检测方法与统计分析

1.4.1 免疫组织化学法测肠粘膜组织HO－1 治疗组、对照组用药前后以及健康组，分别在肠镜下于脾曲处检取粘膜4块，参照王启志等报道［4］免疫组织化学法检测肠粘膜组织HO－1，试剂盒购自南京建成生物医药科技有限公司。

在显微镜下观察肠粘膜切片中HO－1免疫染色阳性细胞的分布和着色情况，以组织切片中细胞胞质内出现明显的黄色颗粒为阳性细胞，无黄色颗粒为阴性细胞。为量化着色深浅、区别肠粘膜组织中HO－l染色差异，采用计算机图像分析技术半定量检测其蛋白表达的强弱，平均光密度越高说明表达越强，反映细胞内HO－1蛋白表达量越多。以平均光密度值来进行量化后的统计学分析。

1.4.2 紫外分光光度计法间接测定动脉血一氧化碳血红蛋白 (COHb)含量 治疗组、对照组用药前后以及健康组，分别在桡动脉处取新鲜动脉血4ml，参照王虹等报道［5］紫外分光光度计法间接测定动脉血一氧化碳血红蛋白 (COHb)含量。

2 结果

表1 各组HO－1平均光密度值( ±SD)

表1 各组HO－1平均光密度值( ±SD)

平均光密度治疗组 治疗前 30 0.313±0.027组别 例数 HO－1＊＊治疗后 30 0.165±0.019△△对照组 治疗前 30 0.310±0.025＊＊治疗后 30 0.192±0.021△＊15 0.164±0.018健康组

注:与健康对照组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与同组治疗前相比，△P＜0.05，△△P＜0.01。

表2 各组血浆一氧化碳浓度

注:与健康对照组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与同组治疗前相比，△P＜0.05，△△P＜0.01。

3 讨论

HO－1的表达上调可引起结肠组织内、细胞内和细胞间CO分布和量的改变，从而影响胃肠道的生理信息传递;又可扩张血管和介导细胞因子，使结肠粘膜的血管舒张，粘膜充血，增加血管和上皮的渗透性，与IBS－D患者腹泻时血管扩张、充血渗出、腺体分泌增加有关;其甚至还与IBS－D患者的痛觉有关。

IBS－D属于中医学“腹痛”、“泄泻”范畴，多数学者认为肝郁脾虚为本病的基本病机，疏肝健脾为治疗本病的基本大法。

有学者研究认为［6］，IBS－D肝郁脾虚证形成过程:情志失调→肝郁气滞→肝木乘脾→肝脾不调、肝郁脾虚，在症状变化上由单纯肝郁症状，如情绪抑郁、善太息、心烦易怒、失眠多梦，最后发展到肝郁与脾虚症状共见，如抑郁、暖气、善太息、心烦易怒、失眠多梦，腹胀、腹痛、腹泻、纳差等。现代医学中HO－1/CO径路参与IBS－D的病理形成过程:精神心理等应激因素，诱导HO－lmRNA表达上调，通过转录使HO－l表达上调，催化血红素分解，产生CO，影响肠道的生理信息传递、扩张结肠血管和介导细胞因子、结肠动力学紊乱和内脏敏感性异常，产生腹痛、腹泻、腹胀等症状，同时伴见心烦、失眠、抑郁等精神神经症状。IBS－D肝郁脾虚证形成过程与现代医学中HO－1/CO径路参与IBS－D的病理形成过程极为相似。

本课题研究结果表明，IBS－D患者结肠粘膜HO－1表达增高，血浆CO水平也相应升高，且较健康组比较有显著性差异，随着疏肝健脾中药复方的治疗好转，其HO－1表达及血浆CO水平也相应降低，这可能是疏肝健脾中药治疗IBS－D的疗效机理之一。

［1］Leung WK，Wu JC，Liang SM，et al.Treatment of diarrhea－predominant irritable bowel syndrome with traditional Chinese herbal medicine:a randomized placebo － controlled trial［J］.Am J Gastroenterol.2006，101(7):1574－1580.

［2］中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会.肠易激综合征中西医结合诊疗共识意见［J］.中国中西医结合杂志，2011，31(5):587－590.

［3］郑筱萸.中药新药临床研究指导原则［M］.北京:中国医药科技出版社，2002:364－367.

［4］王启志，章明，朱有法，等.诱导型一氧化氮合酶与血红素氧合酶在人肠易激综合征结肠中的表达［J］.解剖学报，2005，36(2):168－172.

［5］王虹，李华强，潘捷.哮喘豚鼠血红素氧合酶－1与内源性一氧化碳的相关性［J］.中华儿科杂志，1999，37:562－564.

［6］陶双友，周福生，许仕杰，游章才.腹泻为主型肠易激综合征肝郁脾虚证与HO－1/CO径路的相关性［J］.新中医，2008;40(1):107－108.