王 雨 武 建 杨慧鹏 何永刚 张益民
(1.南京农业大学生命科学学院,江苏 南京 210095;2.南京农业大学食品科技学院,江苏 南京 210095)
构树是一种适应性极强的落叶乔木,在我国大部分地区均有种植。构树叶中含有蛋白质、氨基酸、无机氮浸出物、钙、磷以及多种微量元素,是极具开发价值的非常规饲料资源[1]。但是,构树叶粗纤维含量高,蛋白质结构复杂,单胃动物难以消化,并且高比例饲喂未发酵构树叶时,会导致一定的肝肾损伤和体重增加减缓[2]。经研究,发酵之后的构树叶能够降低毒性,并改善其营养结构[3]。光叶楮是近几年从日本引进的构树新品种,具有生长快,产量高,经济效益好的特点[4],且与野生构树相比,光叶楮叶营养成分丰富全面,粗蛋白、粗纤维、钙、磷等含量高[5]。目前,关于发酵构树叶饲喂对小白鼠性器官、肝功能影响上的性别差异,以及光叶楮构树叶饲喂小白鼠的毒性试验均未见报道。本试验将研究不同比例的发酵构树叶引起小白鼠的性别差异,以及光叶楮构树叶饲喂对小白鼠产生的毒性影响,为构树叶饲料的实际应用提供参考。
由南京市江宁区青龙山动物繁殖场代购自南通大学实验动物中心的清洁级小白鼠72只,体重约16~18 g,雌雄各半,随机分为6组,每组12只。
试验材料构树叶:10月份摘采自江苏省连云港市赣榆县的构树枝干的树叶;发酵构树叶:上述构树叶参照张益民[3]的方法进行发酵处理;光叶楮树叶:相同时间采自上述地点的日本光叶楮品种构树的树叶。以上构树叶经南京农业大学动物科技学院粉碎处理,再由南京青龙山动物繁殖场加入试验设计的基础日粮比例配入后,混匀、加工成条状。
在小白鼠基础日粮的基础上,按照试验设计水平,将构树叶配入各组中。即光叶楮组饲喂10%光叶楮未发酵构树叶+90%基础日粮;野生组饲喂10%野生未发酵构树叶+90%基础日粮;发酵A组10%发酵构树叶+90%基础日粮;发酵B组20%发酵构树叶+80%基础日粮;发酵C组30%发酵构树叶+70%基础日粮;对照组饲喂100%基础日粮。
各组小白鼠按照试验设计饲养49 d,自由采食,自由饮水。试验期间观察小白鼠的精神状况。每天称量每组小白鼠消耗的饲料重量。每周称量每只小白鼠的体重。试验结束后,称量体重,对所有小白鼠进行断颈采血,进行血液指标的分析;同时解剖所有雄性小白鼠,获取睾丸,测量每个睾丸直径以及每组睾丸的重量。
料肉比计算公式:料肉比=消耗饲料总量(kg)/增重总量(kg)
以上试验数据用SPSS软件统计分析,采用LSD法进行方差分析比较。
试验期间所有小白鼠均活动正常,生长状况良好,无一死亡。
表1 小鼠各组料肉比
由表1可知,前3周内,雌性小白鼠料肉比均明显高于雄性小白鼠,可见雄性小白鼠对饲料的利用率更高。前2周内雌、雄鼠光叶楮组料肉比低于野生品种,而高于对照组。发酵构树叶组料肉比大部分大于对照组,且料肉比随着发酵构树叶含量增加而呈现先增高后降低的趋势,可见发酵构树叶浓度较高时对饲料利用率有不利影响。
表2 雌性小鼠体重(g)
表3 雄性小鼠体重(g)
由表2可看出,经过一段适应期后,雌性小白鼠在较低浓度(10%)的构树叶(包括光叶楮树叶、野生构树叶以及发酵构树叶)配比下,第三周起与对照组体重无显著性差异;发酵B组与发酵C组小白鼠体重在试验期内则一直明显低于对照组,具显著性差异。由表3可看出,对于雄性小白鼠,从第三周起,光叶楮组、野生构树叶组以及高浓度(30%)发酵构树叶组在试验期内,体重均显著低于对照组,可见未发酵构树叶与高浓度发酵构树叶饲喂对雄性小白鼠的生长影响较明显。未发酵构树叶饲喂对雄性小白鼠的生长的影响比对雌性更大。
图1 雌性小白鼠生长曲线
图2 雄性小白鼠生长曲线
由图1和图2可看出,相同饲料喂养下的雄性小白鼠的平均体重和生长速率均高于雌性小白鼠。雌雄小白鼠在第一周生长都最为迅速,之后速率都开始下降。雌性小白鼠第三周后的体重增长开始趋于平缓;雄性小白鼠在第四周后体重增长开始趋于平缓。
由表4可以看出,适量比例的发酵构树叶(20%)可以促进睾丸增大;光叶楮组和发酵C组睾丸重量明显低于对照组。可见光叶楮构树叶及高浓度(30%)发酵构树叶饲喂对雄性小白鼠睾丸发育具有明显抑制。
表4 雄性小鼠睾丸
表5 雌性小鼠肝功能变化
表6 雄性小鼠肝功能变化
由表5和表6可知,雌雄小白鼠血液中的丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶含量均与对照组无显著性差异。可见在30%及以下的构树叶配比饲料对小白鼠的肝功能无显著影响。
料肉比指饲养的畜禽增重10 kg所消耗的饲料量,是评价饲料报酬的一个重要指标。后期小鼠生长进入平稳期,体重增长不明显,且小鼠为啮齿动物,除正常食用外也会撕咬饲料,造成饲料消耗值的称量上存在一定误差,因此只取前3周的料肉比进行分析。本试验中,发酵构树叶组料肉比大部分大于对照组,且料肉比随着发酵构树叶含量增加而呈现先增加后降低的趋势,其可能原因是动物不能有效吸收构树叶中的营养成分,饲料中构树叶添加的比例越大,影响越大;雌性小白鼠的料肉比均明显高于雄性小白鼠,可见雄性小白鼠对饲料利用率更大。日本光叶楮品种料肉比普遍低于野生构树品种及对照组,可能是因为光叶楮构树叶营养结构更加合理,更利于动物吸收利用。
随着构树叶添加水平的增加,小白鼠的体重增长在下降。雌性小白鼠在10%的构树叶配比下,经前三周适应期后与对照组的体重无显著差异;而雄性小鼠除低浓度发酵构树叶组外,其他组差异显著。未发酵构树叶饲喂对雄性小白鼠的生长影响更大。相同饲料喂养下的小白鼠在平均体重及体重增长速率方面雄性均高于雌性,且雄性小白鼠体重增长周期更长:前5周内一直以较快速率增长,第5周之后较缓慢增长;而雌性小白鼠第3周后的生长速率即开始变缓。日本光叶楮品种在小白鼠体重方面未见明显优势。
结果显示,适当比例的发酵构树叶(20%)可以促进睾丸增大。雄性小白鼠光叶楮组睾丸重量明显低于对照组,由此可见光叶楮品种构树叶对雄性小白鼠的性激素分泌可能有显著影响。同时,发酵C组睾丸重量也明显小于对照组,可见30%构树叶配比对雄性小白鼠性激素分泌也可能有显著影响。
丙氨酸转氨酶与天门冬氨酸转氨酶是临床上检测肝功能的重要指标。当肝脏受到损伤时,血清中丙氨酸转氨酶与天门冬氨酸转氨酶的含量均会升高。本试验中所有组的小白鼠此两项指标均无显著增高。可见30%及以下的构树叶配比对小白鼠的肝功能没有显著影响。
①日本光叶楮品种的吸收利用率更高。
②对于雌性可用10%构树叶配比的饲料饲喂,发酵与否均可;但对于雄性,未发酵构树叶以及高比例发酵构树叶配比均会对体重增长产生影响,比例越高影响越大,低浓度发酵构树叶影响不显著。
③日本光叶楮品种对于小鼠体重增长并无优势。
④适量比例的发酵构树叶配比(20%)可引起小鼠睾丸直径的增大。日本光叶楮及30%发酵构树叶饲料对雄性小白鼠睾丸发育可能具有不利影响。
⑤30%及以下的构树叶配比饲料对动物的肝功能没有显著影响。
[1]李海新.发酵构树叶对生长猪营养物质消化率、肥育性能、屠宰性能及肉质的影响[D].湛江:广东海洋大学,2010.
[2]赵峰,刘丹,黄所含,等.构树叶饲喂小白鼠的亚慢性毒性试验[J].食品与饲料工业,2006(6):30-32.
[3]张益民,于汉寿,张永忠,等.构树叶发酵饲料中营养成分的变化[J].饲料工业,2008,29(23):54-55.
[4]宋协峰,范学鹏,孙广佩,等.新型“摇钱树”——光叶楮[J].种子世界,2008(3):37.
[5]李维英,苏印泉,玉泉幸一郎,等.光叶楮成分测定与分析[J].西北林学院学报,2007,22(3):141-143.