肺结核患者外周血腺苷脱氨酶活性与T淋巴细胞亚群定量检测的相关性及临床意义

端木和运,韦生坤

(江苏省常州市第三人民医院肺科,江苏常州,213001)

结核病的免疫是 T淋巴细胞介导的细胞免疫,对结核病的发病和转归具有决定性意义。腺苷脱氨酶(ADA)是人体嘌呤核苷代谢中的重要酶,在淋巴细胞中活性最高,是前 T淋巴细胞分化为T淋巴细胞不可缺少的酶。为进一步了解外周血ADA活性与T淋巴细胞亚群的关系及其临床意义,本院对肺结核患者,进行了外周血淋巴细胞内ADA活性和 T淋巴细胞亚群的定量检测,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将本科2008年9月—2012年5月收治的145例住院肺结核患者纳入检测组,其中初治100例,复治45例,均依据临床症状、影像学、痰涂片或培养阳性进行诊断,且经抗结核治疗后好转。上述患者中男102例,女43例,年龄15～82岁,平均(44.5±6.4)岁。初治患者采用2HE(S)RZ/ 4HR方案,复治患者采用 2HLvERZ/HERZ/ 5HRE方案。所有患者未使用免疫调节剂,且均无心、肝、肾等重要脏器疾患,肝、肾功能检查正常,无合并糖尿病。另选同期60例来自本院健康体检者作为对照组,其中男36例,女24例,年龄23～76岁,平均(46.8±6.1)岁。2组患者性别、年龄等资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法

标本采集时间为6∶00～7∶00,空腹采静脉血2 mL于肝素抗凝管内,用流式细胞仪检测 T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+,采静脉血2 mL于肝素抗凝管内,由美国杜邦全自动化分析仪ADA检测,试剂:由上海复星长征医学科学有限公司生产。采用流式细胞检测技术(FCM)检测外周血中的 T淋巴细胞亚群,FCM为美国BD公司生产,型号为FACS Calibur。

2 结 果

2.1 2组各数据检测结果比较

检测组患者与正常对照组ADA、T淋巴细胞亚群检测数据比较,差异有统计学意义(P<0.05或 P<0.01),见表1。

表1 2组各数据检测结果比较(±s)

表1 2组各数据检测结果比较(±s)

与对照组比较,3P<0.05,33P<0.01

组别 n ADA CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+对照组 65 8.0±5.0 70.0±6.0 40.0±4.0 31.0±5.0 1.3±0.2检测组 145 17.0±3.033 60.0±10.03 36.0±6.03 37.0±8.03 0.9±0.33

2.2 检测组各数据检测结果与年龄的比较

肺结核ADA、T淋巴细胞亚群检测数据与年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表2。

表2 检测组各数据检测结果与年龄的比较(±s)

表2 检测组各数据检测结果与年龄的比较(±s)

指标 <30岁(n=15) 31～40岁(n=25) 41～50岁(n=45) 51～60岁(n=40) >60岁(n=20) ADA 18.0±7.0 19.0±7.0 25.0±5.0 16.0±7.0 16.0±7.0 CD3+ 60.0±10.0 58.0±10.0 58.0±10.0 59.0±10.0 60.0±10.0 CD4+ 35.0±8.0 37.0±8.0 36.0±11.0 34.0±10.0 35.0±7.0 CD8+ 37.0±6.0 37.0±8.0 37.0±7.0 38.0±7.0 38.0±8.0 CD4+/CD8+ 1.0±0.1 1.1±0.2 1.0±0.0 0.9±0.1 0.9±0.1

2.3 检测组各数据检测结果与肺结核病情比较

检测组ADA、T淋巴细胞亚群检测数据与病情比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表3。

表3 检测组各数据检测结果与肺结核病情比较(±s)

表3 检测组各数据检测结果与肺结核病情比较(±s)

痰菌涂片初复治指标 涂(+)(n=70) 涂(-)(n=75)初治(n=100) 复治(n=45) ADA 18.0±6.0 17.0±4.0 17.0±5.0 18.0±6.0 CD3+ 59.0±9.0 59.0±50.0 60.0±7.0 59.0±9.0 CD4+ 35.0±6.0 36.0±5.0 37.0±5.0 35.0±7.0 CD8+ 38.0±8.0 36.0±8.0 37.0±8.0 38.0±8.0 CD4+/CD8+ 1.0±0.19 1.0±0.2 0.9±0.2 1.0±6.5

2.4 检测组各数据检测结果与治疗不同时期的比较

检测组ADA、T淋巴细胞亚群检测数据与治疗不同时期的比较,差异有统计学意义(P<0.01),见表4。

表4 检测组各数据检测结果与治疗不同时期的比较(±s)

表4 检测组各数据检测结果与治疗不同时期的比较(±s)

与治疗前比较,33P<0.01

指标 治疗前 治疗后2个月 治疗后6个月ADA 17.0±4.0 14.0±4.033 12.0±4.033 CD3+ 59.0±10.0 62.0±9.033 67.0±7.033 CD4+ 35.0±8.0 37.0±7.033 37.0±5.033 CD8+ 37.0±8.0 36.0±6.033 33.0±5.033 CD4+/CD8+ 0.9±0.2 1.1±0.133 1.2±0.133

3 讨 论

ADA是嘌呤核苷酸代谢过程中起重要作用的酶,广泛分布于 T淋巴细胞内,是前 T淋巴细胞分化为T淋巴细胞不可缺少的酶,与T细胞的分化与增殖密切相关,尤其与T淋巴细胞的激活有关。鄢仁晴等[1]认为持续高活性的ADA即可使T化成熟不可缺少的成分,持续高活性的ADA即可使 T淋巴细胞不断处于旺盛的增殖状态; ADA活性亦是反映细胞免疫功能的一个重要指标,是活动性肺结核辅助性 T淋巴细胞(CD4+)的一种标志物。结核是 T淋巴细胞介导为主的多种细胞因子参与的综合病理反应有关[2-3],可激发前淋巴细胞分化为T淋巴细胞增加,促使淋巴细胞内小分子ADA进入血液中,导致肺结核患者血清中ADA明显升高。T淋巴细胞不仅是细胞免疫的主要细胞,而且是更重要的免疫调节细胞,其免疫调节作用是通过亚群细胞实现的。由于ADA活性是反映细胞免疫功能的一个重要指标,肺结核患者T淋巴细胞亚群比例失调与淋巴细胞内ADA活性升高有密切的关系[4]。Kar2 taloglu等[5]报道肺结核患者血清ADA水平明显高于健康人,在肺结核不同时期,血清ADA水平亦有变化,随着治疗病情好转,血清ADA逐渐下降。血清ADA分为ADA1与ADA2两种,Ishii等[6]通过测定肺结核患者治疗前后3个月血清ADA,ADA1、ADA2及T淋巴细胞亚群,发现肺结核患者ADA水平与T淋巴细胞亚群有关,血清ADA2的活性与CD3+淋巴细胞及CD4+淋巴细胞数量有关,血清ADA1的活性与淋巴细胞的数量无关,而血清ADA1的活性与肺结核病程有一定的关系。Reiley等[7]认为CD4+T细胞在肺结核免疫防御机制中占有重要地位,CD4+T细胞表达降低可能是肺结核恶化有原因之一。抗结核治疗后病情好转后CD4+水平升高。外周血T淋巴细胞用其亚群分析是公认的反映机体细胞免疫状态的较好指标[8]。其中CD3+代表 T淋巴细胞总数,CD4+为辅助性 T淋巴细胞、CD8+为抑制性T淋巴细胞,T细胞亚群间相互协作和制约,能产生适度的免疫应答,既能清除病原体,以能避免过强的免疫反应损伤自身组织,是机体正常自稳的功能。T细胞在肺结核免疫防御机制中占有重要地位,CD4+T细胞的表达降低,可能是肺结核恶化的原因之一。有效的抗结核治疗有助于CD4+水平升高。本文研究发现肺结核患者与正常对照组ADA、T淋巴细胞亚群检测数据对比分析,肺结核患者血清ADA水平明显高于健康人群,CD3+、CD4+明显低于健康人群:CD8+升高, CD4+/CD8+降低,2者比较差异有统计学意义。抗结核治疗2、6个月后,血清ADA水平明显下降,CD3+、CD4+。显著升高,CD8+细胞显著降低,两组比较差异有统计学意义。可见ADA与T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+2者之间有着明显的相关性。本研究结果显示,患者的年龄及病情影响ADA,T淋巴细胞亚群在外周血中的表达差异无统计学意义。T淋巴细胞亚群表达功能异常是结核病灶存在和发展的基础,如果CD3+、CD4+/ CD8+比值继续下降并伴CD8+升高,提示病情加重、病灶扩散,预后较差。及时治疗、纠正和提高机体细胞免疫功能有利于结核菌的清除、病情的缓解,适时检测患者外周血ADA、T淋巴细胞亚群的变化对病情监控、疗效判定和预后判断具有临床意义。

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