公安办案中大麻树脂的前处理方法研究*

翟晚枫

（中国人民公安大学 刑事科学技术系，北京 100038）

对样品进行提取净化是毒品分析的一个重要步骤，样品前处理技术在现代分析方法中占有重要的基础性地位。目前，对于大麻类毒品，常见的提取方法有溶剂提取或萃取法[1-12]、固相萃取法（主要适用于大麻油和体内大麻检材）[13-15]等，液相微萃取、固相微萃取等方法虽然应用前景广阔，很有发展潜力，但对于大麻树脂并不实用。当前国内外广泛应用的大麻前处理方法是溶剂提取或萃取法，较为简便易行。为确定一个针对大麻树脂类检材，高效、省时、简便、低成本的前处理方法，服务于公安办案工作，笔者对提取过程的各个环节进行了细致考察和优化，最终确定了大麻树脂样品前处理的首选方法。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

Prominenece UFLC液相色谱仪（日本岛津公司）；十万分之一电子分析天平（瑞典METTLER公司）；EYELA型涡旋混合器（日本EYELA公司）；KQ3200型超声振荡器（昆山市超声仪器有限公司）；台式高速冷冻离心机（德国SIGMA公司）；SynergyUV型纯水制备系统（美国Millipore公司）。

盐酸溶液、正己烷为分析纯，北京化学试剂公司；甲醇（优级纯 国药集团化学试剂有限公司）；乙醇、氯仿、乙酸乙酯、乙醚均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司；石油醚、苯、甲苯，分析纯，北京长海化工厂；环己烷（A.R.天津市福晨化学试剂厂）；异丙醇（A.R.北京化工厂）；四氢呋喃（色谱纯 美国TEDIA公司）；庚烷（色谱纯 东京化成工业株式会社）；乙腈（色谱纯 美国Fisher Scientific公司）；去离子水（蒸馏水再经Millipore公司SynergyUV型纯水系统制备）；大麻树脂样品（案件中收缴）。

1.2 色谱条件

色谱柱：岛津Inertsil ODS-SP（4.6mm×150mm,5μm）色谱柱；流动相：乙腈-水；梯度程序：以乙腈-水比例70∶30为初始浓度，有机相浓度以2%·min-1升至 96%·min-1。柱温：40℃；流速：1mL·min-1。

2 结果与讨论

2.1 溶剂的选择

取大麻树脂样品适量，剪碎，精确称量30.00mg（±0.30mg）的样品 14份，置于 1～14号试管中，依次分别加入10mL水、甲醇、乙醇、氯仿、石油醚、苯、甲苯、乙酸乙酯、正己烷、环己烷、异丙醇、乙醚、四氢呋喃、庚烷，1500r·min-1振荡 30min，离心，各取3mL上清液，N2吹挥干后，各用5mL甲醇定容。用相同色谱方法进样分析，得到1～14号样品中3种大麻组分的色谱峰面积与样品称量重量的比值，所得结果见图1。

图1 不同溶剂对四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影响Fig.1 Effects of different solvents on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol

综合考虑基线稳定、杂质含量、成本高低、毒性有无等因素，选择甲醇作为提取溶剂。

2.2 萃取溶剂酸碱性的考察

考虑到大麻酚、大麻二酚、四氢大麻酚均为酚类物质，设计了两组实验以考察提取溶剂的酸碱度对提取效率的影响。

第一组实验：用不同pH值溶液直接提取法。设计如下实验，精确称量30.00mg（±0.30mg）的大麻树脂样品7份，编号1～7号。将0.01mol·L-1的HCl溶液稀释，配制 HCl浓度分别为 0.00001、0.0001、0.0005、0.001、0.005mol·L-1的 HCl- 甲醇溶液。1 号样品溶于10mL甲醇溶液，2～6号样品分别溶于10mL上述配制好的不同浓度的HCl-甲醇溶液，7号样品溶于以9mL甲醇稀释的1mL pH值9的NH3·H2O溶液，将1～7号试管1500r·min-1振荡15min后，离心取上清液，用相同色谱条件进样分析，得到1～7号样品中3种大麻组分的含量数据见图2（1～6号样品）。

图2 HCl浓度对四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影响Fig.2 Effects of HCl concent on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol

结果表明，酸性条件对3种大麻组分的提取效率和保留时间均无显著影响，碱性环境（7号样品）使保留时间稍有减小，但对提取效率仍无显著影响。由于本实验使用的色谱柱pH值耐受范围为2～7.5，故未尝试在其它更加极端的溶剂环境下提取。

第二组实验：反提法。考虑到酚羟基具有弱酸性，可能与强碱结合成盐，实验中对反提法进行了考察。但结果表明反提法效果不佳，对于大麻树脂，反提法不能达到提高对目标组分的提取效率，对杂质的净化作用也很有限，相反，由于反提法增加了操作步骤，目标组分更易在操作过程中损失，增大了误差和不稳定性，故放弃反提法。

2.3 振荡、超声辅助方式的比较

为比较振荡辅助萃取、超声辅助萃取的效果并获得最佳条件参数，实验中考察了超声时间、振荡转速和振荡时间对3种大麻组分提取效率的影响，所得结果见图3～5。

图3 超声时间对四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影响Fig.3 Effects of time of ultrasound-assisted oscillation on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol

图4 振荡转速对四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影响Fig.4 Effects of speed of oscillation on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol（t:15min）

图5 振荡时间对四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影响Fig.5 Effects of time of oscillation on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol（speed:1500r·min-1）

结果表明，振荡、超声两种方式相比，均无特别显著优点，差别仅在于超声更省时一些。而如果没有超声仪，振荡也能获得相同的效果。经过比较，保守选择1500r·min-1振荡10min或超声5min作为辅助萃取方式。

此外，为考察浸泡过夜是否会提高有效组分回收率的问题，设计了如下实验，精确称量30.00mg（±0.30mg）的大麻树脂样品 6份，编号 1～6号，1～3号分别溶于10mL甲醇，手动振荡数次，静置过夜（12小时）后，将4～6号分别溶于10mL甲醇，将1～6号同时以1500r·min-1振荡10min，用相同色谱条件分离分析，结果表明两种方法等效，所以无需浸泡过夜，可以直接使用溶剂提取-超声波或涡旋振荡辅助法作为大麻树脂的前处理方法。

2.4 膜过滤实验

液相色谱由于使用的是填料柱，如果样品溶液中含有大量的不溶解物质，在进行色谱柱分离时会产生沉淀现象，堵塞色谱柱，致使柱压增高，影响色谱柱的使用寿命，为了防止此类情况，在进样之前均会进行过滤操作，一般使用的是商品化的滤膜。为了考察常用过滤膜对研究毒品是否存在吸附、反应等现象，试验中比较了不同尺寸过滤膜的过滤效果，见表1，结果表明，过滤操作以及滤膜的尺寸对大麻的3种主要组分无影响，因此，在定量过程中，标准物质溶液可不随样品进行过滤操作，并且可采用直径较小的过滤膜以增加对固体颗粒的过滤效果。

表1 过滤对大麻3种组分提取效率的影响Tab.1 Effects of filtration on extraction efficiency of the three constituents of cannabis

3 结论

最终确定的大麻树脂前处理方法是：以甲醇作为提取溶剂、1500r·min-1振荡10min或超声5min，离心取上清液或滤膜过滤。该方法快速省时、简便高效，适用于大麻类毒品的提取和检测，尤其适用于办案过程中批量快速检测大麻树脂检材的情况。

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