胎膜早破原因与血清中Th1/Th2细胞因子变化的相关性研究

言献波

（东莞市石排医院，广东 东莞 523330）

妊娠是最成功的同种异体自然移植。妊娠期母体Th l/Th2免疫调节过程维持着一种微妙的、依据妊娠进程不断变化的平衡过程[1]。胎膜早破(premature rupture of membranes,PROM)是产科常见的并发症。发生的机制和原因目前尚不清楚。损伤，宫颈口松弛，妊娠后期性交导致机械性损伤或引起感染，生殖道感染，可由细菌、病毒或弓形体等微生物引起；羊膜腔内压力异常(如羊水过多、多胎妊娠)，胎先露部与骨盆入口未很好衔接(如头盆不称，胎位异常等)，胎膜发育不良至菲薄脆弱等均可致胎膜早破。另外，胎膜早破可能与Th l/Th2变异（平衡紊乱）有关。为此，我们测定胎膜早破孕妇血清中Th1型细胞因子代表因子IFN-γ、IL-2及Th2型细胞因子代表因子IL-4、IL-10的含量，观察它们在胎膜早破患者血清中的变化,并分析Th1/Th2在胎膜早破发生中的部分机理。现将结果报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选取2010年1月～2012年1月收住院分娩者，入院时未临产的胎膜早破孕妇86例。平均年龄27.6岁，孕周28～38+6周，平均35.7周。并随机抽取同期产科门诊定期产前检查，无临产、感染及破膜征象的正常孕妇100例为对照组，平均年龄28.3岁，孕周28～37周，平均36.1周。所有孕妇均无产科及其他合并症。胎膜早破组与对照组年龄及孕周相比，P＞0.05无显著性差异。阴道炎：如有白带增多，阴部瘙痒，分泌物涂片可见革兰氏阴性杆菌、加德纳菌、滴虫、霉菌、伴有尖锐性湿疣、宫颈糜烂。血常规白细胞正常或高于正常，中性粒细胞正常或高于正常。

1.2 绒毛膜羊膜炎的诊断标准[2]1)有症状者以胎膜组织病理检查呈炎症反应，产前或分娩24 h后体温≥37.5℃，恶露臭味，白细胞计数升高为标准。2)无症状者以胎膜病理结果呈炎症反应为标准。

1.3 胎膜组织绒毛膜羊膜炎病理分期标准[3]I期：中性粒细胞浸润少、散在，几乎全部局限于绒毛板下纤维蛋白沉积物内，或胎膜的蜕膜层。Ⅱ期：中性粒细胞浸润增多，并延伸至绒毛膜组织内或绒毛膜板组织及胎儿血管；但未进入羊膜。Ⅲ期：中性粒细胞已广泛浸润蜕膜、绒毛膜，并达羊膜。

1.4 检测方法 胎膜早破孕妇于入院后即抽肘静脉血6 mL，采用ELISA法，试剂盒购于武汉华美生物工程有限公司，操作严格按说明书执行。测定IFN－γ、IL-2及IL-4、IL-10浓度。分娩时取4 cm×4 cm胎盘胎膜组织，用10%甲醛溶液固定，送病理检查。对照组孕妇于产检时抽血同法测定IFN－γ、IL-2及IL-4、IL-10浓度。分娩时取4 cm×4 cm胎盘胎膜组织，用10%甲醛溶液固定，送病理检查。

1.5 统计学处理 所获数据采用方差分析，t检验和x2检验。

2 结果

2.1 两组孕妇生殖道感染及高危因素比较 见表1～2。胎膜早破组又分为感染组和分感染组。

表1 两组孕妇生殖道感染情况比较(例，%)

2.2 孕妇血清中Th1/Th2细胞因子水平的变化比较早产感染组中IFN-γ和IL-2的水平均显著增高，与另外两组比较P＜0.05有显著性差异；早产非染组中IFN-γ和IL-2的水平虽高于正常对照组，但无显著性差异(P＞0.05)。正常对照组中IL-4和IL-10的水平均显著增高，与胎膜早破组比较，P＜0.05，有显著性差异；早产非感染组中IL-4和IL-10的水平虽低于正常对照组，但无显著性差异(P＞0.05)详见表3)。

表2 两组孕妇高危因素情况比较（例，%）

2.3 破膜时间与血清Th1/Th2细胞因子的关系 破膜时间在72h以上的血清IFN-γ和IL-2水平均显著高于72h以内的另外两组，P＜0.05，有显著性差异；破膜时间72h以内的另外两组间无显著性差异P＞0.05详见表4。

3 讨论

近年来国内外文献报道胎膜早破与细菌性阴道病密切相关，为此必须重视细菌性阴道病的早预防、早发现、早治疗，借以减少胎膜早破的发生。胎膜早破易引起早产、新生儿感染与产妇产褥期感染。发生胎膜早破的原因还有胎位不正、骨盆异常、巨大儿或双胎（多胎）等有关。胎膜早破可能与Th l/Th2变异（平衡紊乱）密切相关。CD4+T细胞被激活后分泌的细胞因子可分为Th1、Th2和Th3三效应细胞，分别分泌不同的细胞因子，发挥不同的免疫作用。Th1细胞分泌白细胞介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子(TNF-β)而Th2细胞则分泌IL-4，IL-5，IL-6，IL-9，IL-10，IL-13和IL-17A[3]。Th1和 Th2来

表3 三组血清Th1/Th2细胞因子的变化(ng/L,x-±s)

早破感染组与早破非感染组与足月组比较P＜0.05;早破非感染组与足月组比较,P＞0.05。

表4 破膜时间与血清T h1/T h2细胞因子变化的关系(n g/L,-x±s)

破膜感染组＜24 h组、24～72 h与组＞72 h组比较P＜0.05;24～72 h组与＜24 h组比较P＞0.05。自一个共同的母体细胞（T h0），被抗原刺激后分化为中间状态的Th0细胞,在多种因素的影响下可向Thl或Th2方向分化发育[4]。

Th1/Th2漂移的概念是Th1和Th2细胞的分化与功能互相制约，只有当Th1/Th2处于动态平衡时，机体才处于健康状态。若Th1/Th2失衡，就会发生感染性疾病、过敏性疾病、病理性妊娠等，也与衰老的发生发展有一定的关系。在某些状态下，Th1/Th2的相互制约动态平衡状态被打破。而造成偏向Th1或Th2优势应答，这种现象称为Th1/Th2漂移[5]。

妊娠成功是必备条件之一是母体与胎儿间生理的免疫相容。近年来对Th1/Th2型细胞因子的大量研究表明：正常妊娠Th2占优势，即妊娠期母体是趋向于Th2型细胞因子为优势参与的体液免疫，而Th1型细胞因子参与的细胞免疫处于劣势状态。有人检测妊娠期妇女外周血单个核细胞（PBMC）中CD4+T细胞的亚群，结果正常妊娠晚期外周血中Th1细胞比例较未孕妇女还低，Th2细胞比例在孕早期就明显升高，孕中晚期Th1/Th2细胞比例明显下降[6]。正常妊娠孕晚期Th1型细胞因子（IFN-γ、IL-2）的分泌较正常未孕及孕早中期相比降低，Th2型细胞因子（IL-4、IL-10）随着妊娠的进展分泌逐渐增加，到孕晚期达高峰。使胎儿免受母体免疫排斥而启动分娩过程[5]。

我们选择Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2及Th2型细胞因子IL-4、IL-10。而IFN-γ和IL-4是调节Th1/Th2平衡中最重要的细胞因子，较明确参与调节的还有IL-2、IL-10和I L-12。IL-4可以下调组织相同容性复合体（MHC）限制性的细胞毒性作用，上调MHC2Ⅱ类分子[7]。IL-4还抑制TNF-α受体在胎盘血管中发挥作用，以利于妊娠。IL-10可抑制Th1型细胞因子的产生，进而抑制Th1型免疫反应及NK细胞的激活，对妊娠具有保护作用[8]。IL-10是抑制Th1细胞、促进Th2细胞分化的重要因子。有学者测定黄体中期的子宫内膜发现，Th1型细胞因子的表达缺乏，而表现为Th2型细胞因子的优势表达。可以保护胎儿[9]。

本资料胎膜早破患者血清中IFN-γ、IL-2的表达水平均显著高于对照组，并随时间延长而含量逐渐增高（P＜0.05）；有绒毛膜和（或）羊膜炎者血清IFN-γ、IL-2高于无绒毛膜羊膜炎者及对照组（P＜0.01）。从而证明在胎膜早破患者血清中细胞因子较正常孕妇的异常表达。与报道一致[10]。有学者用ELISA方法检测了PROM组和正常妊娠中IL-2、IFN-γ、TNF-α、TNF-β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12的表达，结果Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平及对Th1反应起诱导作用的IL-1水平胎膜早破中较正常妊娠组显著增加，而Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10在正常妊娠足月胎盘中显著增加，这些数据表明在胎膜早破妇女中有Th1偏移现象[11-12]。还有人用ELISA方法检测了胎膜早破组和正常妊娠羊水中的MMP-9、IL-6明显高于正常妊娠组。MMP-9增高，增加了胎膜的脆性，IL-6增高说明胎膜早破的原因是源于感染，胎膜早破又加重了羊膜腔的感染[13]。根据实验提出在有关细胞因子与胎膜早破的研究中,应同时考虑到感染与细胞因子的作用,从而为胎膜早破预测、诊断和治疗提供线索。

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