复方坦索罗辛非那雄胺胶囊的含量测定方法研究

哈药集团制药六厂，黑龙江哈尔滨 150056

盐酸坦索罗辛是一种强效和高选择性的α1-肾上腺素受体抑制剂，它作用于血管平滑肌而不影响血压，松弛尿道紧张状态，使排尿障碍得到改善，临床上可用于治疗良性前列腺增生和前列腺肥大引起的排尿障碍[1]。非那雄胺为良性前列腺增生治疗药物，具有抑制5α-还原酶而阻断双氢睾酮（DHT）的合成作用[2]，临床上用于治疗老年男性前列腺炎和男性脱发[3-4]。目前，国内外暂未有复方坦索罗辛非那雄胺制剂上市。

1 仪器与试药

湿法混合制粒机；GKF-900型胶囊充填机；ZES-8G型智能溶出试验仪；Waters 515型高效液相色谱仪。盐酸坦索罗辛；非那雄胺。

2 方法与结果

2.1 盐酸坦索罗辛含量测定

2.1.1 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：KromasilC18（250nm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈-0.2mol.L-1磷酸二氢钾-0.2mol.L-1磷酸盐溶液=5:7:7（v/v），流速为1mL.min-1，柱温为30℃，进样量为20μl，检测波长225nm。在该色谱条件下，供试品中盐酸坦索罗辛峰能达到基线分离，理论塔板数按盐酸坦索罗辛峰计应不低于2000。

2.1.2 溶液制备

2.1.2.1 对照溶液精密称取盐酸坦索罗辛对照品25.12mg，加流动相溶解，并定容至25mL量瓶中，制成浓度为 1.0048mg·mL-1的盐酸坦索罗辛对照品贮备液。精密量取5mL贮备液置10mL量瓶中，即得0.5024mg.mL-1的对照品溶液。

2.1.2.2 供试品溶液取本品20粒的内容物，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸坦索罗辛25mg），置于50mL量瓶中，加流动相充分溶解并稀释至刻度，摇匀即得。

2.1.3 专属性试验取空白溶剂和空白辅料，依法测定，结果空白溶剂对主峰和降解产物测定无干扰，表明此方法专属性强。

2.1.4 线性关系考察精密称取对照品贮备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、7.0mL，分别置于10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl注入液相色谱仪。结果盐酸坦索罗辛50.24～351.68μg·mL-1浓度范围内，呈良好的线性关系（r=0.9999）。

2.1.5 精密度试验精密称取对照品贮备液适量，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样6次，结果盐酸坦索罗辛的峰面积RSD=1.2%（n=6），表明该方法的精密度良好。

2.1.6 稳定性试验取“2.1.2”项下供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、12、16、24h进样测定。结果盐酸坦索罗辛峰面积RSD=1.3%（n=8），表明供试品溶液在24h内稳定。

2.1.7 重复性试验取同一批供试品 6份，按“2.1.1”项下色谱条件测定。结果盐酸坦索罗辛的含量平均值为99.23%，RSD=1.2%。

2.1.8 加样回收率试验精密称取已知含量的同一批样品细粉（相当于盐酸坦索罗辛5mg）6份，置于20mL量瓶中。再精密量取盐酸坦索罗辛对照溶液（1.0048mg·mL-1）5mL加至上述20mL量瓶中，加甲醇适量，超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液1mL置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得供试品溶液。依法测定，结果平均回收率99.1%，RSD=0.48%（n=6）。

2.1.9 含量测定按“2.1.2”项下供品溶液的制备方法制备三批样品的供试品溶液，按“2.1.1”项下色谱条件测定盐酸坦索罗辛峰面积，并计算其含量。结果三批样品的含量分别为99.8%、99.7%、99.8%，平均含量为99.77%。

2.2 非那雄胺含量测定（高效液相色谱法）

2.2.1 非那雄胺色谱条件及系统适应性试验色谱柱：WatersC18（250mm×4.6mm，5.0μm），流动相为甲醇-水（75:25），流速为1mL·min-1，检测波长220nm，理论塔板数按非那雄胺峰计算大于1500。

2.2.2 溶液制备

2.2.2.1 对照溶液精密称取非那雄胺对照品50mg，置100mL的量瓶中加流动相70mL，超声5min使非那雄胺溶解。加流动相稀释至刻度，摇匀，备用。

2.2.2.2 供试品溶液取本品20粒的内容物，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于非那雄胺5mg），置于50mL量瓶中，加流动相适量，超声5min使溶解并用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，备用。

2.2.3 线性关系考察精密称取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml对照品溶液分别置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，配成0.04、0.08、0.12、0.16、0.20mg·mL-1的溶液。结果非那雄胺在0.04～0.20mg·mL-1浓度范围内，呈良好的线性关系（r=0.9996）。

2.2.4 精密度试验称取对照品溶液适量，连续进样6次，结果峰面积RSD=0.61%，结果表明该方法的精密度良好。

2.2.5 稳定性试验取供试品溶液分别于0，2，4，6，8，12，24h进样测定，结果RSD=0.68%测定溶液在24h内稳定。

2.2.6 回收率试验精密称取非那雄胺对照品5mg六份，分别置于50mL量瓶中，再分别按处方比例加入相应的空白辅料，加流动相超声溶解并稀释至刻度，滤过。精密量取滤液2mL置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，依法测定，结果平均回收率（n=6）为99.24%，RSD=0.38%。

2.2.7 含量测定依法测定本品三批，按峰面积以外标法计算含量，结果三批样品的含量分别为99.7%、99.6%、100.1%，平均含量为99.8%。

3 小结

试验结果表明，复方坦索罗辛非那雄胺胶囊中主药含量采用高效液相色谱法外标法进行测定，方法准确，专属性强，杂质不干扰主药的测定，是可以控制产品质量的。

[1]刘艳红,徐文奎,马德保,等.盐酸坦洛新胃漂浮缓释小丸的制备与体外释放[J].沈阳药科大学学报,2009,26(11):852-856.

[2]Mconnell JD,Wrlson JD,George FW,et al.Prostate volume predicts outcome of treatment of benign prostatic hyperplasia with finasteride:Meta–analysis of randomized clinical trisls[J].Urology,1996,48(3):398.

[3]Beisland HO,Brekkan E,et al.Scandinavian clinical study of finateride in the treatment of begign prostatic hyperplasia[J].Ear Urol,1992,22(4):271.

[4]Stoner E.The Finasteride Study Group.The clinical effects of 5α-reductase inhibitor,finasteride,on begign prostatic hyperplasia[J].J Urol,1991,147(5):1298.