肌氨酸氧化酶法测定绍兴地区儿童及成人血清肌酐参考值的建立

梁美春

血清肌酐(creatinine，Cr)浓度的测定，可作为反映肾小球滤过功能的指标之一，颇受临床医生重视［1］。目前，临床测定血清肌酐普遍采用的方法是碱性苦味酸法，临床使用的血清肌酐参考范围多采用碱性苦味酸法所建立的参考范围。由于肌氨酸氧化酶法测肌酐具有特异性高，干扰物质少等优点，该检测方法已逐渐被临床接受，但关于采用肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐所建立的参考范围报道较少，临床应用则更为少见［1］。本研究的目的是初步建立绍兴地区儿童及成人肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐的参考值范围。

资料与方法

1.标本来源:选择2011年5～9月在笔者医院健康体检儿童和住院患儿(男性2269例，女性1542例)。按年龄分组:出生3～12个月(组1)，1～3岁(组2)，4～6岁(组3)，7～11岁(组4)，12～18岁(组5)，成人组选择在笔者医院健康体检者(男女性各500例，组6)，年龄25～48岁。以上各组研究对象均排除肾脏系统、泌尿系统、贫血、甲亢、尿崩症等疾病和营养不良。

2.仪器与试剂:仪器为雅倍AEROSET全自动生化仪，试剂由浙江夸克生物有限公司提供。定标液和质控品均由贝克曼公司提供。真空管由浙江康是公司提供。

3.检测方法:采取空腹静脉血4ml，放入含促凝剂的真空生化管中。水浴5min后离心，标本均无脂浊、黄疸、溶血现象，血清分离后室温条件保存，3h内检测完毕。

4.质量控制:检测人员均为参加过大型生化仪培训并合格者，按照试剂盒说明书设定参数。每天对肌酐进行定标，在质控符合卫生部实验室室间质控要求后再进行标本测定，并随机加入质控进行监控，未发现仪器漂移。

5.统计学方法:应用SPSS 17.0统计软件进行分析，计数资料以均数±标准差±s)表示，对所有数据先进行频数分析，再做正态性检验，不同性别不同年龄多组间比较和变化趋势采用单因素方差分析，同组男女间比较采用t检验，以各组x±2s作为参考范围。以P＜0.05作为差异有统计学意义。

结果

1.对所有肌酐测定值进行频数分析:3811个肌酐测定值中无缺失值。再对所有数据进行正态性检验，偏度系数为0.498，峰度系数为－0.557，呈近似正态分布，正态分布直方图见图1。

图1 所测数据正态分布直方图

2.各年龄组血清肌酐测定值:见表1。各年龄组男女性合计均值分布图见图2，各年龄组男女均值分布图见图3。绍兴地区与苏州地区儿童血清肌酐参考值及本实验中成人血清肌酐参考值与《全国临床检验操作规程》(3版)血清肌酐参考值见表2。

表1 各年龄组血清肌酐测定值±s，μmol/L)

Cr 3～12个月(组1)年龄 男性 女性 合计n Cr n Cr n 116 36.15±10.22 92 35.92±6.50 208 36.07±9.08 1～3岁(组2) 426 36.05±9.13 209 35.86±7.67 635 37.08±9.41 4～6岁(组3) 317 41.31±8.41 179 41.24±8.65 496 38.16±8.78 7～11岁(组4) 361 47.95±10.09 207 46.00±10.06 568 47.31±10.24 12～18岁(组5) 549 70.44±14.52 355 57.56±10.68 904 65.36±14.56成年人(组6) 500 89.33±11.16 500 67.36±8.97 1000 78.35±14.94

讨论

血液中的肌酐分为外源性和内源性两种。外源性肌酐是肉类、鱼类食物在人体内代谢的产物，一般来说外源性的肌酐不足以影响空腹肌酐的测定。内源性肌酐是由人体肌肉中肌酸通过不可逆的非酶脱水反应缓缓形成的，再释放到血液中随尿排泄。血清肌酐浓度和尿中肌酐排泄量，正常时主要与体内肌肉总量关系密切。儿童的肌肉水平跟成人相比存在着较大差异，相对肌酐来说也存在着较大差异。

图2 各年龄组男女合计均值分布图

图3 各年龄组男女均值分布图

表2 绍兴地区与苏州地区儿童血清肌酐参考值及本实验中成人血清肌酐参考值与《全国临床检验操作规程》(3版)血清肌酐参考值比较(μmol/L)

在本实验中，3～12个月、1～3岁、4～6岁这3个年龄组内，男女性别之间相比无统计学意义(P分别为0.856、0.785、0.928，P均＞0.05)，这可能与在这3个年龄组内，男女儿童体格、肌肉含量差异不大有关，故我们将这3个年龄组男女儿童的参考值不做性别区分。1～3岁组跟3～12个月组相比差异无统计学意义(P=0.385，P＞0.05)，跟4～6岁组相比存在着显著性差异，有统计学意义(P=0.043，P＜0.05)，我们将3～12个月和1～3岁这两个年龄组合并，其出生3个月 ～3岁的血清肌酐参考值为18.13～55.29μmol/L。4～6岁的血清肌酐参考值为21.2～56.32μmol/L。7～11岁组内男女性别相比有显著性差异(P=0.027，P＜0.05)，12～18岁组内男女性别存在着高度显著性差异(P=0，P＜0.01)，说明随着年龄的增长和青春期的到来，男女性别之间血清肌酐的差异越来越大(图3)，这同样与男女性别体内激素水平导致肌肉含量的差异有很大的关系，故我们将这两个组的参考值做性别区分，7～11岁男性的血清肌酐参考值为27.77～68.13μmol/L，7～11岁女性的血清肌酐参考值为25.88～66.12μmol/L，12～18岁男性的血清肌酐参考值为41.4～99.48μmol/L，12～18岁女性的血清肌酐参考值为36.2～78.92μmol/L。成人组跟所有儿童组都存在着高度显著性差异(P均为0，P＜0.01)，随年龄的增大血清肌酐越接近成人水平(图2)，这与儿童随着年龄增加，生长加快，活动度加大，代谢能力增强的影响而使血清肌酐逐渐增高有关。

由表2可见，苏州地区儿童的血清肌酐参考值比绍兴地区儿童的肌酐参考值略低，这可能与生活习惯、检测仪器不同有一定的关系。本实验室成人的血清肌酐参考值是参照《全国临床检验操作规程》(3版)而定的，由于此参考值是在多年以前制定的，随着生活水平的改善，有些参考值难适用于临床。本实验中成年男性的血清肌酐参考值要比《全国临床检验操作规程》(3版)的血清肌酐参考值略高一些，而成年女性的血清肌酐参考值则相差无几，这可能与现代女性追求骨感和苗条美有关。本实验室将征求临床意见，将成年男性的血清肌酐参考值设为67.01～111.45μmol/L，成年女性的血清肌酐参考值设为49.42～85.3μmol/L。

因此根据不同检测方法、不同检测仪器、不同生活习惯和不同年龄性别，建立适合自己实验室儿童及成人的参考值，对疾病的预防、诊断、疗效及预后都有重要的指导意义。

1 康格非，巫向前.临床生物化学和生物化学检验［M］.2版，北京:人民卫生出版社，1998:271－272

2 薛建，黄辉，冯建国，等.苏州地区儿童血清肌酐参考值的建立［J］.检验医学与临床，2010，7(18):1921－1924

3 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3版，南京:东南大学出版社:2006:465－466