畜牧兽医科技文摘

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌基因多态性分型试验/邓海平（中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所中国农业科学院新兽药工程重点开放实验室甘肃省新兽药工程重点实验室，甘肃兰州 730050），倪春霞，蒲万霞//中国兽医学报.-2011，31(6).-891～898

利用随机引物AP-7，建立引物随机多态性扩增(RAPD)体系对71株引起内蒙古和贵州地区奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌分离株进行基因分型研究。结果表明，71株金黄色葡萄球菌均得到清晰的RAPD指纹图谱，扩增产物为2～9条带，产物大小为240～4 500bp。菌株共分为6个基因型，其中Ⅰ型17株(占23.9%)、Ⅱ型3株(占4.2%)、Ⅲ型33株(占46.5%)、Ⅳ型15株(占21.1%)、Ⅴ型2株(占2.8%)、Ⅵ型2株(占2.8%)。Ⅰ型为内蒙古地区的流行优势菌群，Ⅲ型为贵州地区的流行优势菌群。两地区各基因型菌株比例有明显差异，这可能与奶牛养殖业水平和环境差异有关。

大鼠感染微小隐孢子虫后小肠、肾及肺脏病理学变化/刘德义（安徽科技学院，安徽凤阳 233100），顾有方， 李升和…//中国兽医学报.-2011，31(6).-880～883

将40只SPF级SD大鼠随机均分为地塞米松免疫抑制感染组和对照组n=20，免疫抑制感染组大鼠一次性接种1×106个/L微小隐孢子虫卵囊液1mL，空白对照组接种1mL灭菌生理盐水。于试验结束后宰杀大鼠，立即剖检取小肠、脾、肺，Bouin液固定，常规石蜡切片，HE染色，奥林巴斯显微摄影系统观察并显微摄影。结果显示，免疫抑制感染组大鼠小肠绒毛和肠腺受损严重，数量明显减少，结构模糊，绒毛上皮细胞和肠腺细胞明显肿胀、解体，细胞结构消失;肾脏肾小体数量减少，有的血管球明显萎缩甚至碎解，肾小囊腔明显增大，有的肾小囊壁层细胞的连续性遭到破坏;肺脏肺泡隔明显增厚，充血现象严重，肺泡隔内的细胞萎缩，胞核固缩，细胞结构模糊。试验结果表明，微小隐孢子虫对大鼠小肠、肾和肺等器官的组织结构具有明显损伤作用，进而影响大鼠的消化吸收、泌尿和呼吸等功能。

柴胡舒肝汤对脂肪肝模型动物的影响/张 雨，（吉林大学和平校区门诊部，吉林长春 130062）韦 倩//中国兽医学报.-2011，31(6).-870～874

采用高脂日粮饲喂海兰褐蛋公雏，制作脂肪肝动物模型，再以柴胡舒肝汤进行干预。结果显示，试验组鸡只逐渐出现类似脂肪肝综合征的临床症状，实验室检验血清呈黄色稠膏凝脂状，血脂含量显著升高，剖检肝脏肿大呈土黄色泽，肝脏脂肪含量明显升高，表明以高脂日粮加丙基硫氧嘧啶人工造模成功。中药预防组在其饮水中加入4.5mL柴胡舒肝汤，结果较好地对抗了高脂日粮与丙基硫氧嘧啶的作用，试验鸡没有出现相应临床症状与实验室检验指标，表明柴胡舒肝汤对高脂日粮加丙基硫氧嘧啶所致脂肪肝有预防作用。对已发生脂肪肝病变的鸡以柴胡舒肝汤进行治疗，使相关临床症状逐步消失，肝脏病变与其他检验指标得到恢复，表明柴胡舒肝汤对高脂日粮加丙基硫氧嘧啶所致脂肪肝有治疗作用，可将在其饮水中加入4.5mL柴胡舒肝汤作为推荐剂量。试验中没有发现动物对柴胡舒肝汤呈现不良反应。

重庆地区家畜附红细胞体分子流行病学调查及危险性因素/聂 奎（西南大学动物科技学院，重庆北碚 400715），周作勇，周荣琼…//中国兽医学报.-2011，31(6).-848～851

本试验对重庆地区牛、猪和羊附红细胞体进行分子流行病学调查及危险性因素分析。在2006～2008年期间，采用鲜血压片法、姬姆萨染色法和基于16SrRNA-PCR方法，共检测了307头份牛血样，检测阳性率分别为46%、48%和11%;检测猪血样1 658头份，检测阳性率分别为63%、68%和76%;检测羊血样1 191份，检测阳性率分别为61%、70.4%和16.1%。危险性因素分析结果显示，山区牛附红细胞体感染阳性率极显著高于丘陵地区(OR=16.03，95%CI=5.47～17.11)(P<0.01)，山区猪和山羊附红细胞体感染阳性率显著高于丘陵地区(猪:OR=1.38，95%CI=1.06～1.79;羊:OR=1.43，95%CI=0.54～3.82)(P<0.05)。农户散养牛和猪的附红细胞体感染阳性率极显著高于规模化养殖(牛:OR=3.2，95%CI=1.48～6.89;猪:OR=2.28，95%CI=1.79～2.89)(P<0.01)。农户散养山羊附红细胞体感染阳性率高于规模化养殖场(OR=1.19，95%CI=1.09～1.54)(P>0.05)，但差异不显著。

云南省不同宿主H9N2感染调查和NA分子进化分析/张泉鹏（成都军区疾病预防控制中心，云南昆明 65003），李作生，鲍晓伟…//中国兽医学报.-2011，31(6).-828～834

2006年6月-2007年10月，从云南省16个地州随机采集的各种家禽、家猪的喉气管和口腔棉拭子样品7 901份，应用RT-PCR结合血凝、血凝抑制试验和抗原捕捉ELISA，检测H9N2亚型禽流感感染情况，选择具有代表性的阳性样品，克隆NA全基因并进行基因序列分和推导氨基酸的糖基化位点分析。结果表明，云南省2006～2007年H9N2亚型禽流感病毒在全省14个地州均有流行，感染宿主包括鸡、鸭、鹅和猪;分离的19个毒株中的13个鸡源和1个鹅源毒珠的NA全基因长1 407bp，编码469个氨基酸，同源性为96.1%～99.6%，是目前云南省流行的优势亚群;3个鸭源毒株、1个鹅源和1个猪源毒株NA基因长1 398bp，编码466个氨基酸，5个非鸡源毒株的NA基因的同源性为99%，构成云南目前流行的另一分支，推导氨基酸第61～63位3个氨基酸的缺失是与优势分支的特征性区别;2个分支间NA基因同源性为90%，与国内外其他毒株比较神经氨酸酶基因序列具有多态性。

山羊痘、羊口疮及山羊传染性胸膜肺炎混合感染的检测与分析/颜新敏（中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室，甘肃兰州730046），储岳峰，吴国华…//中国兽医学报.-2011，31(6).-809～813

利用特异性PCR方法从病山羊组织病料中分别扩增山羊痘病毒、羊口疮病毒和山羊支原体山羊肺炎亚种特异性片段，继而将扩增的特异性片段克隆、测序，并与GenBank上相应的基因序列进行比对、绘制系统进化树，进行流行病学分析。结果表明，从病山羊中可同时扩增出山羊痘病毒、羊口疮病毒和山羊支原体山羊肺炎亚种特异性片段，并通过基因序列比对分析确证了PCR检测结果，首次证实我国存在山羊痘、羊口疮及山羊传染性胸膜肺炎的混合感染，为我国现阶段羊病的流行病学和有效防制措施的制定提供了参考依据。

禽多杀性巴氏杆菌ompa DNA疫苗在小鼠体内免疫效果试验/牛明福（河南科技大学，河南洛阳 471003），宫 强，秦翠丽…//中国兽医学报.-2011，31(6).-799～803

应用PCR技术扩增获得禽多杀性巴氏杆菌的ompa基因片段，克隆到pUCm-T载体，再亚克隆到真核表达质粒载体pCDNA3.1(+)上，构建重组质粒pcA，体外转染Vero细胞，RT-PCR和间接免疫荧光试验检测其转录表达情况。动物免疫分为3组:pCDNA3.1(+)组、PBS对照组和pcA组，每组16只BALB/c小鼠，pCDNA3.1(+)组和pcA组以100μg/只的剂量肌注免疫，PBS组每只小鼠肌注100μL 1×PBS，各组均免疫3次，每次间隔2周。间接ELISA检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平，MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况，三免2周后检测脾淋巴细胞IFN-γ分泌情况。强毒攻击，计算小鼠存活数目及保护率。结果显示，间接免疫荧光试验和RT-PCR检测结果均表明pcA可在体外培养的Vero细胞中表达目的蛋白。动物免疫后，pcA组免疫小鼠血清抗体水平持续上升，与pCDNA3.1(+)组和PBS组相比差异极为显著(P<0.01)。经提取的禽多杀性巴氏杆菌总外膜蛋白(Omps)刺激后，pcA组的刺激值(SI值)与pCDNA3.1(+)组及PBS免疫组相比均差异显著(P<0.05)。脾细胞产生的IFN-γ极显著高于两对照组(P<0.01)。强毒攻击后pcA组保护率明显高于两对照组，可达60%。结果表明，成功构建了禽多杀性巴氏杆菌ompa DNA疫苗，该疫苗可诱导免疫小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答及一定的保护效果。

山西猪源基因Ⅰ型乙型脑炎病毒的分离与鉴定/曹齐树（华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，湖北武汉430070），钱 平，朱巧艳…//中国兽医学报.-2011，31(5).-696～696，702

利用RT-PCR技术从2009年山西运城某猪场疑似乙型脑炎仔猪脑组织扩增出乙型脑炎病毒pr M和E基因，采取病样通过BHK-21细胞传代，分离到1株病毒。间接免疫荧光和RT-PCR进一步证实该病毒为猪源乙型脑炎病毒，并命名为SX09S-01。根据pr M基因绘制的进化树表明SX09S-01毒株属于基因Ⅰ型，E基因与SA-14、SA-14-14-2、P3、HW和XJ69株的核苷酸同源性分别为88%，87%，88%，88%，98%，其蛋白具有强毒株典型特征。

H9N2亚型禽流感病毒西藏分离株的全基因组遗传进化分析/索朗斯珠（华中农业大学农业微生物国家重点实验室，湖北武汉 430070），邹 威，王 灿…//中国兽医学报.-2011，31(5).-668～673

根据GenBank登陆的H9N2亚型AIV全基因组序列，设计了8对引物，运用RT-PCR的方法获取了3株H9N2亚型AIV西藏分离株A/Chiken/Tibet/S1/2009、A/Duck/Tibet/S2/2009和A/Chiken/Tibet/S4/2009的8个基因序列，并对所得序列进行同源性及遗传进化分析。结果显示，分离毒株的各基因片段均有完整的开放阅读框，HA基因裂解位点处均为RSSR/G，符合低致病性禽流感的特征;3株西藏分离毒株之间同源性为98%～99%，可能起源于同一种系;各分离毒的HA、NS和NA基因与欧亚分支A/Chiken/Beijing/1/94分支中的A/Duck/HongKong/Y280/97遗传距离最近，而M、NP、PA、PB1和PB2基因与欧亚分支中另一分支A/Quail/HongKong/G1/97群系遗传关系近。由此可见3株分离株的各基因所属分支不具有统一性，说明本研究所分离的3株H9N2亚型AIV西藏分离毒株可能是来源于不同亚系AIV的毒株在感染同一种宿主时发生基因重排的产物。

野生树鼩寄生虫感染调查/杨建发（云南农业大学动物科学技术学院，昆明 650201），马玉华，吕龙宝…//中国动物传染病学报.-2011，19(2).-73～74

为了解野生树鼩的寄生虫感染状况，剖检昆明市西郊野外捕获的3只树鼩(雄性1只、雌性2只)后进行寄生虫检查。结果显示，雌性树鼩的体表和体内均未检出寄生虫，在雄性树鼩的肠道发现严重绦虫感染，共检出虫体16条，经鉴定为长膜壳绦虫(Hymenolepis diminuta)，绦虫总重量为3.4 g，占该树鼩体重的3.6%。

1991～2010年江苏省世业镇牛血吸虫感染情况调查/任雪枫（江苏省动物疫病预防控制中心，南京20110036），高 升，包新奇…//中国动物传染病学报.-2011，19(2).-69～72

本文报告了江苏省镇江市丹徒区世业镇1991～2010年牛血吸虫感染情况。世业镇牛血吸虫感染率在不断反复中逐渐降低，到2006年下降至0。在1994～1998年和2002～2005年出现不同程度的反弹，经分析与江水水位变化有密切的关系。观测结果说明江苏省取得了显著血防效果，但血吸虫病防控仍是一项长期任务。

上海及周边地区猪圆环病毒2型基因型分析/刘 健（上海市动物疫病预防控制中心，上海 201103），周锦萍，王建…//中国动物传染病学报.-2011，19(1).-27～30

采集上海及周边地区猪内脏样本，进行猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2， PCV22)病原学检测，并对阳性样本的ORF2序列进行分析和比对。结果显示，发病猪群PCV22阳性率为39. 06% (25 /64) ，健康猪群阳性率为13. 51% (5 /37) ， PCV22总阳性率为29. 70% ( 30 /101) 。30份阳性样本中PCV22a亚型为2株，检出率为1. 98 % (2 /101) ，其余28株均为PCV22b亚型，检出率为27. 72% (28 /101) 。PCV22的ORF2序列与已登录的ORF2序列的同源性在90.7% ～100%。2株PCV22a株相互间的同源性为99. 6%; 28株PCV22b株的同源性在94.4%～100% ， PCV22b株中只有4株与已登录株DQ141322、AY321984和AY484413株同源性关系最近，处于同一分支中，而另外24株与Q151643中国株同源性关系最近且处于同一分支中。研究结果表明上海及周边地区PCV22感染比较普遍，发病猪场的感染率远高于健康猪场，且感染率比往年有升高， PCV22在猪场疫病的爆发和传染中起着重要的协同作用;在PCV22的感染病例中， PCV22b亚型为感染的优势毒株;绝大多数PCV22b ORF2片段的同源性与已登录的一株中国株同源性关系密切，在基因进化树上处于同一分支，但是否可以推断其为PCV22的另一个亚型有待进一步考证。