颈椎生物塑化薄层切片的制作和临床意义

文会龙 胡辉东 吴一雄 黄小斐

利用生物塑化技术可取得颈椎透明的薄层切片，由于断面标本层厚较薄，连续性较好，能够对颈椎及周围结构做到连续断层显示和准确分辨，达到与断层扫描对应的要求，对颈椎临床影像学评价和外科手术有较大的帮助。

1 材料与方法

1.1 材料 生物塑化切片的制作:4具正常成年人尸，男3例女1例，年龄45～65岁。

1.2 方法 生物塑化切片的制作参照隋鸿锦等［1］的方法如下:

1.2.1 固定(fixation)及解剖(dissection) 采用福尔马林对新鲜标本进行灌注固定，通过手工精细解剖，根据需要显露内部组织结构。在冰冻状态下将标本切割成所需要颈椎部分，上至颅骨下缘，下至第7颈椎下缘，颈部长方体标本块体积约250 mmX150X100 mm。

1.2.2 脱水(dehydration)及脱脂(degreasing) 室温状态下，以丙酮酸替代组织中的水和脂肪成分。脱水时，在-25℃的冷冻环境下进行，而脱脂则在室温下完成。

1.2.3 真空浸渍(forced impragnation) 这是塑化技术的关键步骤。将充满了可挥发溶剂(丙酮)的标本放入多聚物液体中，在真空环境下，中介溶剂的沸点降低，以气体状态被持续抽吸出来。标本中由于丙酮挥发而致的孔隙，被组织周围的多聚物所替换。

1.2.4 定型(positioning)和平板箱制作(laying in flat plates)

确定标本的姿态，将解剖结构固定在正确的位置，然后将颈椎标本置于平板箱中。

1.2.5 气体硬化(gas harding)和加热固化(heat curing) 真空浸渗之后，根据所用多聚物种类的不同，将标本放置在特点环境下，采用气体熏蒸、光线照射或水浴加热等方法，使多聚物单体发生交联聚合反应而硬化。

1.2.6 切割(sawing) 经硬化处理的标本与塑化剂固化为一体，将其固定于钻石切割仪上，分别按水平面和冠状面以钻石锯线切割3、2套，层厚设定为1.0 mm，水平面60～70片，冠状面50～60片。

2 结果

塑化的取材标本为单侧颅底(含中线)软组织以及骨质。塑化后取材，前界至上颌骨中部，后界至颞骨后缘，获得大小约为80 mm×80 mm×50 mm塑化块进行切割，塑化薄层切片的厚度为1.0 mm，锯耗率约为0.1～0.2 mm。断面标本为半透明状，水平切片和冠状切片对颈椎骨质、肌肉、血管、神经显示较为清楚，颜色基本无失真，可观察组织在断面上的颈前后的器官组织的位置形态、位置、大小、毗邻及走行。对颈椎椎体显示、颈椎间盘的状态、椎动脉与神经根的解剖关系非常清晰，颈部脊髓与神经根的连接以及与椎管，椎间盘的关系非常清晰。组织塑化后，锯切时不走形，无移位、脱落，切面干净，组织清楚，易保存、携带。置于显微镜下可以观测放大的组织结构。

3 讨论

生物塑化技术是由德国人Hagens于1982年提出的，将高分子化学和真空物理学与生物学相结合，用于处理、保存和研究生物标本的一种新技术。基本原理是，用丙酮对标本组织进行彻底的脱水处理后，将一种特别配制的液态高分子单体化合物作为生物塑化剂，充填到组织内部，最后成为半透明的、坚固的塑料块，经过钻石锯线以极薄的层面设置(一般1～2 mm)层层切割，最后得到一套完整的组织标本。采用了钻石锯线进行锯切，损耗率较低。此外塑化切片层面较薄，能够满足现代诊断和治疗技术对对提高解剖学研究的精确度的要求，切片干净，可以随意保存，携带，演示。

采用生物塑化技术制作的薄层切片标本，最主要的应用在于影响诊断的参照和术入路的选择。颈椎前后解剖复杂，神经血管密集，横断薄层断面上较好地显示了正常解剖结构及其毗邻关系，为临床提供了完整、连续的薄层断面解剖学资料，对病变的诊治具有重要的参考价值［2-3］。

颈椎薄层切片还可以作为基本图像元进行计算机图像三维重建。不同部位的薄层断面图像与对应的cT和MRI图像对照观察，可为影像识别解剖结构或病变提供形态学依据。

［1］隋鸿锦，张淑琴，宫连.生物塑化技术及其应用.解剖科学进展，1996，2(1):82.

［2］张会珍，郭会利，承根会，等.Mill对神经根型颈椎病的诊断价值.中医正骨，2007，19(3):20.

［3］崔保刚.颈椎损伤的 Mill诊断与临床.中原医刊，2004，31(10):10-12.