盐酸可乐定的含量测定方法研究进展

张荣发，杨宗发，江尚飞

(重庆医药高等专科学校，重庆 400030)

盐酸可乐定又名氯压定，具有降压、镇痛、止泻等药理作用，临床上用于治疗高血压急症、偏头痛、绝经期潮热、痛经、戒绝阿片瘾毒症状以及糖尿病腹泻等疾病。为了便于更深入地系统研究，现将盐酸可乐定含量测定方法的研究进展作一综述。

1 高效液相色谱(HPLC)法

HPLC法具有简便、灵敏、快速、准确和重现性好等特点，已广泛用于盐酸可乐定复方制剂含量的测定和质量控制。

陈新善[1]采用HPLC法测定复方盐酸多塞平胶囊中盐酸可乐定的含量，结果盐酸可乐定质量浓度在2～12 μg/mL(r=0.999 9)范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率为100.34%(RSD=1.63%)。鲍立曾等[2]采用 Kromasil ODS C18柱(250 mm × 4.6 mm， 5 μm)、流动相为乙腈 － 0.2% 磷酸溶液(8∶92)检测波长为210 nm、流速为1.0 mL/min等色谱条件对盐酸可乐定进行含量测定，结果盐酸可乐定质量浓度在1.0～10 μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999，n=5)，平均回收率为 97.8% ， RSD 为 1.0%(n=9)。杨继斌等[3]采用 Zorbax Extend C18分析柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)为色谱柱，乙腈 －磷酸盐缓冲液(15∶85)为流动相，流速为 1.0 mL/min，检测波长为 210 nm，进样量为20 μL，结果盐酸可乐定的质量浓度线性范围为2.0～12.0 μg/mL(r=0.999 9)，平均回收率为 99.2% 。许伯慧等[4]采用 Phenom enex fusion－RP 色谱柱(250 mm ×4.6 mm，4 μm)，流动相为甲醇 －水 －磷酸(25∶75∶0.08)，检测波长为 220 nm，柱温为25℃，流速为1 mL/min，结果盐酸可乐定的质量浓度线性范围为 75 ～1 500 ng/mL(r=0.999 9)，平均回收率为 99.2%。马永贵等[5]采用 Hypersil C18色谱柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm)，流动相为0.22%辛烷磺酸钠 －甲醇 －磷酸(400∶600∶1，用 1 mol/L氢氧化钠溶液或磷酸调 pH至3.0)，流速为 0.9 mL/min，检测波长为220 nm，结果盐酸可乐定的质量浓度线性范围为1.37 ～ 6.85 μg/mL(r=1.000 0)，平均回收率为 100.5%(RSD=0.76%)。鲁敏等[6]采用 C18柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈 －0.2%磷酸(5∶95)，检测波长为210 nm，结果盐酸可乐定的质量浓度线性范围为 7.132 ～142.64 ng(r2=1.000 0)，平均加样回收率为 99.5% ，RSD 为 2.7%(n=9)。于文静等[7]采用Kromonsil C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，流动相为 0.22%辛烷磺酸钠溶液(用磷酸调节pH至2.7)－乙腈－甲醇(65∶19∶16)，检测波长为215 nm，结果盐酸可乐定线性范围为0.016 4～0.328 μg(r=0.999 9，n=5)，平均加样回收率为 99.0% ，RSD=1.38%。张建国等[8]采用 DiamonsilTMC18色谱柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，以0.01 mol/L磷酸二氢钠溶液(pH=3)－甲醇 －乙腈(90∶2 ∶8)作为流动相，流速为 1.0 mL/min，检测波长为 216 nm，结果盐酸可乐定进样量在0.03～0.15 μg范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0.999 8，平均加样回收率为 98.38% ，RSD=1.19%。许谙等[9]选用C18固相萃取小柱对样品进行纯化，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为0.22%辛烷磺酸钠－甲醇－磷酸(450∶500∶1，用1 mol/L氢氧化钠溶液调 pH至3.0)，检测波长为220 nm，结果盐酸可乐定质量浓度在1.03～6.18 mg/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 2)，平均回收率为98.8%。

2 反相高效液相色谱(RP－HPLC)法

采用RP－HPLC法测定盐酸可乐定的含量，具有简便、快速、准确等优点。黄东慧[10]采用RP－HPLC法测定珍菊降压片中盐酸可乐定含量，色谱柱为Kromasil－C8柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相为0.22%辛烷磺酸钠溶液－甲醇－磷酸(540∶460∶1，用 1 mol/L氢氧化钠溶液或磷酸调pH至3.0)，检测波长为220 nm，外标法计算含量，结果盐酸可乐定质量浓度在1.5～15.0 μg/mL 范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9)，平均加样回收率为 99.58%，RSD=1.16%(n=6)。Ying－Qinwei等[11]对RP－HPLC法测定盐酸可乐定含量的方法进行改进，不用液－液萃取法制备供试品溶液，而改用中性Al2O3层析柱对样品精制后，再制备供试品溶液，也取得了较好的效果。结果盐酸可乐定质量浓度在1.1 ～11.0 μg/mL 范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9)，平均加样回收率为96.5% ～99.3%，RSD为2.1% ～4.8%。

3 高效液相色谱－电喷雾质谱联用(HPLC－ESI/MS)法

HPLC－ESI/MS法具有样品处理简单、重现性好、选择性好、抗干扰能力强、分析时间短、结果可靠等优点。卢亚玲等[12]采用Spherigel C18反相色谱柱，以0.005 mol/L甲酸铵缓冲盐(pH为3.0)－乙腈－甲醇为流动相，梯度洗脱，质谱定性定量，对盐酸可乐定进行测定，取得了较好效果。

4 毛细管电泳法

毛细管电泳法具有方法简便、快速和重现性好等优点，可用于盐酸可乐定的含量测定。苏圣民等建立毛细管电泳法测定珍菊降压片中盐酸可乐定的方法，在未涂层毛细管中，20℃，20 kV电压条件下运行，压力进样50 kPa，5 s，检测波长210 nm;结果盐酸可乐定的线性范围为10～100 μg/mL，日间与日内精密度 RSD小于15%，加样回收率为94.96%[13]。高苏亚等[14]建立了带毛细管电泳法分离测定珍菊降压片中盐酸可乐定含量的方法，采用未涂层石英毛细管柱(75 μm×53 cm，有效柱长45 cm)，以20 mmol/L硼砂－5 mmol/L磷酸二氢钠(pH=9.0)为运行缓冲液，检测波长210nm，温度20℃;结果盐酸可乐定质量浓度在2.70～48.60μg/mL范围内与峰面积线性关系良好，回收率和重复性良好。

5 毛细管电泳－安培检测法

毛细管电泳－安培检测法具有选择性好、操作简单、仪器价廉、可同时实现包括盐酸可乐定在内多种成分的检测等优点。丁飞等[15]利用毛细管电泳－安培检测法实现了珍菊降压片中盐酸可乐定、氢氯噻嗪和芦丁的同时检测。在25 mmol/L Na2B4O7－50 mmol/L NaH2PO4缓冲溶液中，3种电活性物质在15 min内实现完全分离。每片珍菊降压片中3种有效成分盐酸可乐定、氢氯噻嗪和芦丁的含量差别很大，分别为0.03，5，20 mg。通过改变样品稀释溶剂，调整了3种活性物质在电极上的电流响应，实现了珍菊降压片中含量差别百倍以上的3种电活性物质的同时检测，测定结果与该药片的每片标示值之间的相对偏差均小于2%。

6 离子对萃取－分光光度法

离子对萃取－分光光度法具有测定结果准确、抗干扰能力强、重现性较好等优点。魏世超等[16]运用离子对萃取－分光光度法测定可乐保林片中盐酸可乐定含量，检测波长为412 nm，结果盐酸可乐定质量浓度在10.3～61.8 μg/mL范围内与吸光度呈线性关系，平均回收率98.6%，RSD=1.78%。

7 气相色谱法

气相色谱法具有灵敏、重现性好、分离效果好等特点，可用于盐酸可乐定的含量测定。杨雪梅等[17]采用气相色谱－电子捕获检测法测定家兔血浆中可乐定的质量浓度，以盐酸普萘洛尔为内标，在碱性条件下用乙酸乙醋提取，提取物经，3，5－二(三氟甲基)苯甲酞氯衍生化后进行分析。结果样品溶液与内标溶液分离较好，保留时间分别为16.5和21.4 min;测定质量浓度线性范围为 20 ～800 ng/mL(r=0.999 91)，测定下限为 5 ng/mL;平均回收率为(92.8±2.0)%，日内和日间 RSD分别为2.3%和3.3%，血浆中内源性物质对测定未见干扰[17]。

[1]陈新善.HPLC测定复方盐酸多塞平胶囊中盐酸多塞平与盐酸可乐定的含量[J].中国药事，1998，12(4):223 －225.

[2]鲍立曾，刘法千，金 芳.HPLC测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量及均匀度[J].中国药品标准，2007，8(5):26－28.

[3]杨继斌，汤晓枢.HPLC测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量[J].药物分析杂志，2006，26(12):1 854 －1 856.

[4]许伯慧，柯 学，王欲斌，等.HPLC法同时检测氢氯噻嗪和盐酸可乐定[J].药学与临床研究，2007，15(1):47 －50.

[5]马永贵，李自明，闵 敏，等.高效液相色谱法测定可乐宝林片中盐酸可乐定的含量[J].医药导报，2010，29(4):522－524.

[6]鲁 敏，龚 青，金樟照，等.高效液相色谱法测定珍菊降压片中绿原酸、盐酸可乐定、氢氯噻嗪的含量及含量均匀度[J].中国现代应用药学杂志，2006，23(6):495 －497.

[7]于文静，王焕群.高效液相色谱法测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量[J].中国药品标准，2009，10(2):144 －146.

[8]张建国，李志浩，孙新建，等.高效液相色谱法测定珍菊降压片中盐酸可乐定含量[J].医药导报，2008，27(5):602 －603.

[9]许 谙，姚琴红.固相萃取－高效液相色谱法测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量[J].中国医院药学杂志，2010，30(11):981－982.

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[16]魏世超，徐丽君，贺国芳，等.可乐保林片中盐酸可乐定含量测定[J].医药导报，2002，21(9):583 －584.

[17]杨雪梅，陈显瑶.血浆中盐酸可乐定的气相色谱测定法[J].药物分析杂志，1994，14(2):24 －26.