延胡索与不同药物配伍中总生物碱含量测定的临床意义

骆霞

(湖北医药学院附属人民医院 湖北十堰 442000)

延胡索为中医临床的常用药物之一。具有活血化瘀、行气止痛的功效,临床上主要用于气血阻滞诸症的治疗[1]。中药材之间的配伍一直为中药的精髓。合理的配伍,可以使两种药物“相须为用”,增加各自的临床疗效。但是如何有效的阐明中药配伍后药效增加的机理,一直以来都是中药研究的一个研究热点。本人通过延胡索与不同药物配伍后总生物碱含量的测定,对中药配伍机理和临床意义进行了初步的研究。现将研究结果汇报如下。

1 实验材料与试剂

1.1 实验材料

延胡索(Rhizoma Corydalis)、白芷(Radix Angelica Dahurica)、当归(radix angelicaesinensis)均由长春中医药大学中药鉴定学教研室主任姜大成教授提供并鉴定。氯仿(北京化工厂)、氨水(北京化工厂)、氢氧化钠(北京化工厂)。

1.2 氢氧化钠试液的标定

精密称取氢氧化钠0.2g置于小烧杯,加少量水溶解,冷却至室温后,转移至250mL容量瓶中,加水定容至刻度。使用0.049mol/L的硫酸溶液进行标定。其结果为氢氧化钠的浓度为0.019034mol/L。

1.3 硫酸溶液的标定

精密量取1mL的浓硫酸置于250mL的容量瓶中,加少量的水将硫酸稀释,冷却至室温后,定容至刻度。使用0.02mol/L的氢氧化钠进行标定。其结果为硫酸的浓度为0.01059mol/L。

2 实验方法

2.1 总生物碱的提取方法

取待提取的中药饮片,第1次加入10倍量的水、第2次加入8倍量的水,每次提取1h,合并提取液。使用浓氨水将提取液调节pH值至11～13。将碱化液置于分液漏斗中,加入氯仿进行萃取,每次使用氯仿40mL,连续萃取4次,合并氯仿层[2]。加入3g的无水硫酸钠进行脱水。将氯仿液置于旋蒸仪中减压回收氯仿至30mL左右,冷却至室温,将浓缩液置于50mL容量瓶中,加氯仿定容至刻度,即得。

2.2 总生物碱的测定方法

取总生物碱待测液5mL,精密加入20mL0.1mol/L的硫酸溶液,置于水浴锅上挥干氯仿,加入甲基红-溴甲酚绿指示剂2滴。使用0.02mol/L的氢氧化钠进行滴定,直至溶液由红色变为蓝绿色,且半分钟内颜色不发生变化。

2.3 计算方法

以延胡索乙素作为总生物碱的含量指标,每1毫升0.01mol/L的硫酸相当于7.1084mg的延胡索乙素。计算公式为:总生物碱含量(mg/g)=[(V1-V2)×C×7.1084/0.01]/1。其中V1=20mL,V2为中和滴定的氢氧化钠所需的硫酸体积,C=0.02mol/L。

3 实验结果

延胡索中总生物碱的含量为1.80mg/g、延胡索与白芷中总生物碱含量为2.23mg/g、延胡索与当归配伍后总生物碱含量为2.01mg/g。三者中延胡索与白芷配伍后总生物碱含量最高。详细结果见表1。

表1 总生物碱含量汇总比较

4 讨论

经中药临床研究发现,延胡索中的生物碱为其止痛的主要成分。目前对生物碱的含量测定方法有很多。如酸碱滴定法、波层扫描法、高效液相色谱法等等[3]。每种方法均有其独到的优点和不足。本人按照实验操作简便化的原则,选用酸碱滴定法进行总生物碱含量的测定,测定结果发现延胡索与白芷配伍后其总生物碱含量显著增高,因此本人推测,延胡索之所以与白芷配伍后能增加其祛瘀止痛的功效可能是由于两药共煎时,白芷中的一些成分增加了延胡索在水煎液的溶解度,因而增加了延胡索中总生物碱的含量。由于酸碱滴定法为简便的理化反应且仅以延胡索乙素作为总生物碱的含量指标,因而其专属性和准确性并不是十分的理想。在后期的研究过程中,可以选择准确性更高的高效液相色谱法并以多个生物碱成分作为含量指标进行更加准确的总生物碱含量的测定,从而提高实验的专属性和准确性。

总之,进行延胡索及不同药物配伍中总生物碱的含量测定对其临床配伍机理的阐述有着重要的临床理论支撑意义,值得进行进一步的研究。

[1] 黄红英,张建华,董钰明.延胡索与不同药物配伍中总生物碱含量的测定[J].四川中医,2007,25(12):45～47.

[2] 罗彦龙,李婷婷.延胡索与不同药物配伍中总生物碱含量的测定[J].职教与成教,2011,3(1):203.

[3] 陈志桃,陈丽香,陈胜辉.高效液相色谱法测定元胡止痛片中延胡索乙素的含量[J].海峡药学,2004,16(3):51～53.