姜油对胃溃疡模型大鼠的影响

蒋苏贞，谢芳斐

(广州中医药大学中药学院，510006)

姜为姜科姜属植物姜(Zingiber officinale Rosc.)的根茎，既是一种常用的食品和调味品，也是一味临床应用十分广泛的中药。其性味辛温，具有解表散寒、温中止呕、温化水饮、调节寒热等功效，临床上常用来治疗胃肠道疾病。早期文献报道姜提取物及其化学成分有胃肠保护作用［1］，但相关进一步研究报道较少。姜的化学成分主要包括挥发油、姜辣素(烷基酚类)、二苯基庚烷类等成分，其中姜辣素成分为姜属植物中所特有成分，是姜特征性辛辣风味的主要呈味物质。采用超临界二氧化碳萃取技术能同时获得挥发性和非挥发性姜油，反应条件温和，萃取率高［2］。笔者通过复制3种大鼠胃溃疡模型，研究姜油(姜二氧化碳超临界提取物)对实验性胃溃疡的影响，为姜油及姜的开发利用提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 三用电热恒温水浴箱(上海跃进医疗器械厂)，LXJ-ПB离心机(上海安亭科学仪器厂)。

1.2 药物与试剂 姜油(广州无止境有限公司，批号:20090521)，盐酸雷尼替丁(广州白云山制药股份有限公司，批号:080115)，戊巴比妥钠(Sigma公司产品，上海化学试剂公司分装，批号:F20080615)，乙醇(分析纯，广州化学试剂厂，批号:081201)，聚山梨酯-80和甲醛均为分析纯。

1.3 实验动物 无特定病原体SD大鼠，雌雄各半，体质量(200±20)g，广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号:2008A013。

2 实验方法

2.1 大鼠给药剂量 姜油给药组设低、中、高3个剂量组，分别为姜油大鼠半数致死量(LD50)的1/60，1/30，1/15，即 50，100，200 mg·kg-1;对照药物雷尼替丁50 mg·kg-1。药物临用前用0.5%聚山梨酯-80纯化水配制。大鼠灌胃给药，给药体积为5 mL·kg-1。

2.2 大鼠水浸束缚应激性胃溃疡实验 取SD大鼠50只，雌雄各半，随机分成5组:模型对照组，雷尼替丁阳性对照组，姜油高、中、低剂量组。每天灌胃给药2次，模型对照组给予等容积0.5% 聚山梨酯-80纯化水液，连续3 d，于末次给药1 h后(实验前大鼠禁食不禁水24 h)，将各组大鼠装入特制的水浸铁丝笼固定，垂直浸入20～23℃水中，液面保持在大鼠胸骨剑突水平，8 h后取出，脱臼处死，剖腹，结扎胃贲门和幽门并经胃壁向胃腔内注入4%甲醛溶液8 mL，将胃取出浸入4%甲醛溶液中10 min后沿胃大弯剪开，采用盲法测量胃黏膜损伤长度(如为针尖大小的溃疡点，10个相当于溃疡长度1 mm)，每只动物损伤长度的总和代表该鼠的溃疡指数，同时计算溃疡抑制百分率［3-4］，比较各组间差异。

2.3 大鼠无水乙醇所致急性胃黏膜实验 取SD大鼠50只，雌雄各半，实验分组及给药同“2.2”项。于末次给药2 h后(实验前大鼠禁食不禁水24 h)，每只大鼠灌服无水乙醇1.0 mL，1 h后脱颈椎处死大鼠，结扎胃贲门和幽门，并经胃壁向胃腔内注入4%甲醛溶液8 mL，将胃取出，放入4%甲醛溶液中固定10min，沿胃大弯剪开胃壁，计算各组的溃疡指数(条索状损伤的长度＞1 mm者测量其长度，每毫米计1分，若宽度＞1 mm者将其计分加倍，计分总数为该动物的溃疡指数)，同时计算溃疡抑制百分率［3］，比较各组间差异。

2.4 大鼠幽门结扎型胃溃疡实验 取SD大鼠50只，雌雄各半，实验分组及给药同“2.2”项。实验前3 d开始给药，实验前大鼠禁食不禁水36 h，实验时在30 mg·kg-1戊巴比妥钠麻醉下，结扎幽门，手术时各组经由十二指肠给予同等剂量药1次，缝合腹腔，手术后大鼠单笼饲养，再禁食禁水16 h后，颈椎脱臼处死，剖腹，结扎胃贲门，取胃，剪开幽门，先倾出胃内容物置于刻度离心管中，而后置于4%甲醛溶液中固定10 min，沿胃大弯剪开，0.9%氯化钠溶液冲洗后，用盲法测量胃黏膜损伤长、短径，按下面公式计算溃疡面积(S)，S=π(d1d2)/4(其中 d1、d2分别表示溃疡的长、短径)，再换算成溃疡指数，即将每只大鼠溃疡面积的总和分为5个等级作为溃疡指数，当溃疡面积为0，～8，～24，～63，～120，～168mm2或穿孔时，溃疡指数分别为 0，1，2，3，4，5，同时计算溃疡抑制百分率［3-4］。胃液以3 000 r·min-1离心10 min，取上清液计算胃液量，采用酸碱滴定法滴定胃酸浓度，采用Mett毛细玻管法测定胃蛋白酶活性，比较各组间差异。

2.5 统计学方法 实验数据以均数±标准差(x±s)表示，应用SPSS 13.0统计软件进行单因素方差分析和q检验。

3 结果

3.1 姜油对大鼠应激性胃黏膜损伤的影响 见表1。姜油各剂量组与模型组比较，大鼠溃疡指数均显著下降(P＜0.01)，并呈一定剂量依赖性。结果表明，姜油具有明显降低应激性大鼠胃黏膜损伤的作用。

表1 5组大鼠水浸束缚应激性胃黏膜损伤的影响Tab．1 Effects of water immersion restraint-stressed gastric ulcer in 5 groups of rats ±s

表1 5组大鼠水浸束缚应激性胃黏膜损伤的影响Tab．1 Effects of water immersion restraint-stressed gastric ulcer in 5 groups of rats ±s

与模型组比较，*1 P＜0.05，*2 P＜0.01Compared withmodel group，*1 P ＜0.05，*2 P ＜0.01

组别 剂量/(mg·kg-1)大鼠/只溃疡指数/mm抑制率/%姜油组 50 10 28.3±8.6*1 37.9 100 10 22.6±7.9*1 50.4 200 10 19.3±7.7*2 57.7雷尼替丁组 50 10 26.4±9.3*1 42.1模型组 … 10 45.6±12.9…

3.2 姜油对大鼠无水乙醇所致胃黏膜损伤的影响见表2。姜油各剂量组与模型组比较，大鼠溃疡指数均明显下降(P＜0.01)，且呈剂量-效应关系。结果表明，姜油对无水乙醇所致的胃黏膜损伤有明显保护作用。

表2 5组大鼠无水乙醇所致胃黏膜损伤的影响Tab．2 Effects of ethanol-induced gastric ulcer in 5 groups of rats x±s

3.3 姜油对幽门结扎型胃溃疡大鼠胃液、胃酸、胃蛋白酶活性的影响 见表3。与模型组比较，姜油各剂量组幽门结扎型胃溃疡大鼠胃液的分泌、胃液酸度及胃蛋白酶活性均无明显降低(P＞0.05)。

3.4 姜油对大鼠幽门结扎型胃黏膜损伤的影响 见表4。与模型组比较，姜油各剂量组大鼠溃疡指数均差异无统计学意义(P＞0.05)。结果表明，姜油无明显降低幽门结扎型大鼠胃黏膜损伤的作用。

4 讨论

本实验通过复制水浸束缚应激型、无水乙醇诱导型及幽门结扎型3种大鼠胃溃疡模型，观察了姜油(姜二氧化碳超临界提取物)对实验性胃溃疡的影响。实验结果表明，姜油对应激性胃黏膜损伤及乙醇所致胃黏膜损伤有良好的防治作用，但对幽门结扎型大鼠的胃液分泌、胃液酸度及胃蛋白酶活性均无抑制作用，对幽门结扎型大鼠胃黏膜损伤也无明显减轻作用。

表3 5组大鼠幽门结扎胃液分泌、胃酸、胃蛋白酶活性的影响Tab．3 Effects of gastric secretion，gastric acid and peptic activity in pylorus-ligated rats of 5 groups ±s

表3 5组大鼠幽门结扎胃液分泌、胃酸、胃蛋白酶活性的影响Tab．3 Effects of gastric secretion，gastric acid and peptic activity in pylorus-ligated rats of 5 groups ±s

与模型组比较，*1 P＜0.05Compared with model group，*1 P ＜0.05

组别 剂量/(mg·kg-1)大鼠/只胃液量/mL胃液酸度/(mmol·L-1)胃蛋白酶活性/(U·mL-1)姜油组50 10 5.2±1.9 95.2±21.2 259.2±22.9 100 10 5.4±0.9 102.4±16.6 265.1±31.3 200 10 5.1±1.6 98.1±20.3 261.1±28.6雷尼替丁组 50 10 3.8±1.2*1 80.1±15.5*1 237.1±26.3*1模型组 …10 5.5±1.3 105.8±17.1 275.8±24.5

表4 5组大鼠幽门结扎型胃黏膜损伤的影响Tab．4 Effects of impairment of gastric membrane in pylorus-ligated rats of 5 groups ±s

表4 5组大鼠幽门结扎型胃黏膜损伤的影响Tab．4 Effects of impairment of gastric membrane in pylorus-ligated rats of 5 groups ±s

与模型组比较，*1 P＜0.05Compared with model group，*1 P ＜0.05

组别 剂量/(mg·kg-1)大鼠/只 溃疡指数 抑制率/%姜油组50 10 4.3±0.9 17.3 100 10 4.2±1.2 19.2 200 10 4.4±1.6 15.4雷尼替丁组 50 10 3.1±0.8*1 40.4模型组 … 10 5.2±1.1…

目前对胃溃疡的发生机制多认为与攻击因子和防御因子的失衡有关。有研究表明:应激及乙醇引起的大鼠胃黏膜损伤与体内脂质过氧化酶作用增强、氧自由基产生过多而引起的细胞膜流动性下降有关［5-6］。文献报道，姜中的化学成分具有极强的抗氧化作用［7-8］。从分子结构上看，姜的姜辣素类及二苯基庚烷类化合物均具有酚基、羟基或烯链结构，因此具有很强的抗氧化活性。有研究显示，姜酚类物质能明显提高生物体内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶、过氧化氢酶的活性，清除羟基自由基和超氧自由基，降低组织中的脂质过氧化物［9-11］。同时，姜辣素中的姜酚、姜烯酚类物质还具有舒张血管作用［12］。故推测姜油抗溃疡作用机制可能是通过增强胃黏膜保护因素而发挥，与其中姜辣素类物质抗氧化、扩张血管作用有关，其具体作用机制有待进一步深入研究。

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