果酒中邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯检测方法研究

吴继军， 徐玉娟， 肖更生， 刘学铭， 唐道邦， 温 靖

(广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所/广东省农产品加工公共实验室，广东广州 510610)

果酒中邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯检测方法研究

吴继军， 徐玉娟， 肖更生， 刘学铭， 唐道邦， 温 靖

(广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所/广东省农产品加工公共实验室，广东广州 510610)

邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯是使用最广泛的增塑剂邻苯二甲酸二-2-乙基己基酯在体内的主要代谢产物，对人体有一定的危害.建立了一种邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯的气相色谱－质谱联用检测方法，并采用该方法对荔枝酒中邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯的含量进行了检测.

邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯;邻苯二甲酸二-2-乙基己基酯;检测方法;增塑剂

人们在生活中广泛使用塑料，邻苯二甲酸酯类是PVC塑料中应用最多的一类增塑剂，约占增塑剂总产量的85%，其中邻苯二甲酸二-2-乙基己酯(简称DEHP，结构式如图1)因增塑性能优良，是邻苯二甲酸酯类增塑剂中用量最大的一种.据1995年全国第三次工业普查数据，全国PVC塑料树脂产量141.48万吨，其中DEHP产量16.31万吨.

邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯(简称MEHP，结构式如图2)是DEHP在人体内的主要代谢产物［1－3］.DEHP进入人体后代谢的第一步是在胃肠道水解成为单酯，未水解部分在肝脏、肾脏、胰腺、肺、血液、睾丸组织中也可水解为单酯［4］.只有在肝脏内，DEHP可被完全水解成邻苯二甲酸［5］，而DEHP对人体的危害基本上是通过MEHP实现的.

图1 DEHP结构式Fig.1 Molecular Structure of DEHP

据估计，塑料及其制品在城市垃圾中所占的比例为10%，DEHP大量存在于城市垃圾中的塑料及其制品中.在PVC塑料中，DEHP的主要作用是软化塑料.DEHP与树脂分子通过氢键和范德华力作用，彼此保持相对独立的化学性质，随着时间的增加，DEHP很容易从塑料中转移到环境中［6－7］.环境中的DEHP可通过呼吸、饮食及皮肤接触等多种途径进入人体［8－9］.

图2 MEHP结构式Fig.2 Molecular Structure of MEHP

DEHP和MEHP对人体具有一定的毒性，DEHP及MEHP有类似环境雌激素的作用，能干扰内分泌;对人及啮齿类动物的生殖发育有影响，具有胚胎毒性;在动物实验中发现，DEHP及MEHP对小鼠肝、肾、心脏等脏器有损伤，有致癌、致畸、致突变作用，能引发哮喘和过敏症状，对人类危害较大［10－16］.

目前对DEHP的研究较多，如蔡全英等［17］对广州(含增城、花都)和深圳地区的9个代表性蔬菜基地土壤中的6种邻苯二甲酸酯类化合物进行研究，发现DEHP在全部土壤样品中均被检出，质量浓度达2.82～25.11 mg/kg.Petersen等［18］检测了29种成人食品，22种婴儿食品(其中11种婴儿配方食品)，发现 DEHP的平均质量浓度为0.11～0.18 mg/kg.日本发现奶瓶的奶头、食品包装、加工食品用手套和火腿中均含 DEHP［19］.蔡智鸣等［20］对杭白菊中的2种酞酸酯类化合物进行检测，发现样品中DEHP的质量浓度为8.52±0.46 mg/kg.2000年，Blount等［21］对目标人群中邻苯二甲酸酯类物质的代谢物进行了研究，结果表明大于75%的受检对象体内存在MEHP，并且生育期的妇女要高于男性和其他年龄段的女性.Latini［22］所做的一项针对新生儿的调查表明，88.1%的新生儿的脐带血中可以分别检测到DEHP和MEHP，而两者可以同时检测到的样本数占全部被调查样本数的77.4%.迄今为止，对MEHP的研究报道较少，因此本文开展了MEHP检测方法的研究，并以荔枝酒为例检测了其中MEHP的含量.

1 材料与方法

1.1 材料与设备

MEHP，德国Dr.Ehrenstorfer GMBH公司;荔枝酒，市场上采购;其他试剂，分析纯;6890/5973型气质联用仪，HP－5MS型毛细管柱，美国Aglient公司.

1.2 样品前处理方法

样品60 mL与二氯甲烷60 mL等体积混合，装入500 mL三角瓶中，在14℃控温摇床中，以200 r·min－1萃取4 h，二氯甲烷层经微滤后采用旋转蒸发仪在35℃条件下进行浓缩，浓缩到3 mL左右.将浓缩后的样品直接进气质联用仪进行分析.

1.3 气质联用条件

在35℃保持6 min，以3℃/min的速度升至180℃，保持2 min，以5℃/min的速度升至270℃，保持3 min.

2 结果与讨论

2.1 MEHP检测标准曲线

用二氯甲烷将标准品稀释到质量浓度为50～600 mg/kg，直接进样进行检测，标准品在71.2 min出峰，标准品色谱图如图3，对谱图中标准品峰面积进行积分，得到峰面积与标准品质量浓度的关系，回归方程是 y=2.68 ×10－6x+33.3，R2=0.992.

2.2 市售荔枝酒MEHP检测

某市售荔枝酒经样品处理后，采用GC/MS检测，重复5次，典型谱图如图4所示，NIST2005谱库检索匹配度为91%，采用标准曲线计算MEHP平均质量浓度为 35.95 mg/kg，标准偏差(RSD)为6.3%.加内标300 mg/kg，检测3次，检测平均回收率达到93.6%，方法准确度较高.

图3 MEHP标准品图谱Fig.3 Chromatogram of MEHP standard

图4 市售荔枝酒中MEHP检测的色谱图Fig.4 Chromatogram of MEHP in litchi wine

分析结果显示荔枝酒中含有一定的MEHP，可能来自于荔枝产地的土壤、大气、水中，也有可能是生产过程中包装材料等使用了塑料，也有可能是在荔枝汁荔枝酒加工过程中产生，其产生途径有待进一步研究.

3 结论

建立了一种MEHP的气质联用检测方法，对一种市售的荔枝酒中的MEHP进行检测，采用标准曲线计算出MEHP的平均质量浓度为35.95 mg/kg.其来源可能是荔枝产地的土壤、大气、水，也可能是包装材料的塑料，也有可能是加工过程中受到污染.如能采用其他方法同时检测，可使准确度，可信度进一步提高.

［1］张蕴晖，陈秉衡，丁训诚，等.DBP、DEHP及其代谢物MBP、MEHP的体内雌激素样活性分析［J］.环境与职业医学，2005，22(1):11 －12.

［2］朱正平，王玉邦，宋玲，等.邻苯二甲酸单乙基己基酯对原代培养大鼠睾丸Leydig细胞睾酮合成的影响［J］.中华男科学，2005，11(4):247 －251.

［3］Davis B J，Maronpot R R，Heindel J J.Di-(2-ethylhexyl)phthalate suppresses estradiol and ovulation in cycling rats［J］.Toxicol Appl Pharmaco1，1994，128(2):216 －223.

［4］Yano R，Nakamura T，Aono H.The amount of the loss of cyclosporine a dose correlated with the amount of leaching di(2-ethylhexyl)phthalate from polyvinyl chloride infusion tube［J］.Yakugaku Zasshi，2001，121(2):139 －144.

［5］张蕴晖.邻苯二甲酸二乙基己酯对环境和生物体的危害［J］.国外医学卫生学分册，2002，29(2):73－77.

［6］陈蕙，汪瑗，朱若华.两种色谱法对塑料食品包装袋中邻苯二甲酸酯类化合物的分析［J］.分析试验室，2006，25(4):45 －49.

［7］王连平，罗南，张春献.塑料食品袋溶出酞酸酯DBP和DEHP的测定［J］.同济大学学报(医学版)，2005，26(1):15－17.

［8］Jennifer J，Adibi，Frederica P P，et a1.Prenatal exposures to phthalates among women in New York city and krakow［J］.Envkon Health Perspect，2003，111(14):1719－1722.

［9］杨左军，王成云，张伟亚，等.PVC塑料中邻苯二甲酸酯类增塑剂在体液中的迁移行为研究［J］.聚氯乙烯，2006，34(2):23 －27.

［10］Aldyreva M V，KIimova T S，Iziumova A S，et al.The effect of phthalate plastieizers on the generative function［J］.Gig Tr Prof Zabol，1975，19(12):25 －29.

［11］马明月，张玉敏，裴秀丛，等.DEHP及MEHP对小鼠卵巢颗粒细胞分泌功能的影响［J］.癌变·畸变·突变，2010，22(2):104 －109.

［12］蔡晓辉，沈浣，鹿群，等.邻苯二甲酸－单－乙基己基酯对人卵巢颗粒细胞活性及分泌功能的影响［J］.中国妇产科临床杂志，2010，11(5):335 －339.

［13］Fredricsson B，Moller L，Pousette A.Human sperm motility is affected by plasticizers and diesel particle extracts［J］.Pharmacol Toxicol，1993，72(2):128 － 133.

［14］Kleinasasser N H，Harreus U A.Softeners in synthetic materials-are they harmiful to humans frist indication of genotoxic effect of phthalates［J］.Mmw Fortschr Der Med，1999，141(40):46 －49.

［15］Foster P M D，Cattley R C，Mylchreest E.Effects of din-butyl phthalate(DBP)on male reproductive development in the rat:implications for human risk assessment［J］.Food Chem Toxicol，2000，38(1):97 －99.

［16］Gary L E，Ostby J，Furr J，et al.Perinatal exposure to the phthalates DEHP，BBP，and DINP，but not DEP，DMP，or DOTP，alters sexual differentiation of the male rat［J］.Toxicol Sci，2000，58(2):350 － 365.

［17］蔡全英，莫测辉，李云辉.广州、深圳地区蔬菜生产基地土壤中邻苯二甲酸酯(PAEs)研究［J］.生态学报，2005，25(2):283 －288.

［18］Petersen J H，Breindahl T.Plasticizers in total diet samples，baby food and infant formulae［J］.Food Additives and Contaminants，2000，17(2):139 －141.

［19］姚卫蓉.食品中酞酸酯类污染物的研究概况［J］.食品研究与开发，2004，25(6):21 －23.

［20］蔡智鸣，王枫华，张前龙，等.杭白菊中酞酸酯类环境污染物的测定［J］.同济大学学报，2004，25(4):388－390.

［21］Blount B C，Silva M J，Candill S P，et al.Levels of seven urinary phthalate metabolites in a human reference population［J］.Environ Health Perspect，2000，108(10):972－982.

［22］Latini G，De Felice C，Presta G.In utero exposure to di-(2-ethylhexyl)phthalate and uration of human pregnancy［J］.Environ Health Perspect，2003，111(14):1783－1785.

(责任编辑:叶红波)

Method for Determining Mono(2-ethylhexyl)Phthalate in Fruit Wine

WU Ji-jun， XU Yu-juan， XIAO Geng-sheng， LIU Xue-ming， TANG Dao-bang， WEN Jing
(Guangdong Open Access Laboratory of Agricultural Product Processing，Sericulture＆ Farm Produce Processing Research Institute，Guangdong Academy of Agricultural Science，Guangzhou 510610，China)

Di(2-ethylhexyl)phthalate(DEHP)is the most commonly used plasticizer in polyvinyl chloride(PVC)products.Mono(2-ethylhexyl)phthalate(MEHP)is initial metabolism of DEHP in animals and humans，which is harmful to animals and humans.The method for determining MEHP was established using GC/MS in this paper.The yield of MEHP in litchi wine was detected using this method.

MEHP;DEHP;determination;plasticizer

TS207.3

A

1671-1513(2011)04-0039-03

2011－03－09

广东省科技计划项目(2007B080401019，2008B080401008).

吴继军，男，研究员，硕士，主要从事农产品加工方面的研究.