连参通淋片中三种成分的蒲层色谱鉴别△

郑国成，陈浩达，李菲，张纲，2

（1.神威药业有限公司，河北 石家庄 051430；2.河北省中药注射剂工程技术研究中心，河北 石家庄 051430）

连参通淋片中三种成分的蒲层色谱鉴别△

郑国成1*，陈浩达1，李菲1，张纲1，2

（1.神威药业有限公司，河北 石家庄 051430；2.河北省中药注射剂工程技术研究中心，河北 石家庄 051430）

目的：研究连参通淋片中盐酸小檗碱、原儿茶醛和大黄素的鉴别方法。方法：采用薄层色谱鉴别方法。结果：鉴别方法重现性好、专属性强。结论：方法简单可靠，可用于连参通淋片中盐酸小檗碱、原儿茶醛和大黄素的鉴别。

连参通淋片；盐酸小檗碱；原儿茶醛；大黄素；薄层色谱

连参通淋片由黄连、苦参、栀子、大黄、丹参等10余味中药组成，具有清热解毒，燥湿杀虫，利尿通淋，健脾化浊的功能，用于临床诊断为非淋菌性尿道炎，辩证属湿热下注者，临床表现为尿频、尿急、尿痛，排尿困难，尿道刺痒，尿道口有分泌物。方中黄连清热解毒、燥湿杀虫，大黄泄热降火而通淋，丹参清腐化瘀而通淋。本文对黄连中盐酸小檗碱、丹参中原儿茶醛和大黄中大黄素进行了鉴别研究，方法操作简便，重复性好，空白无干扰。

1 仪器与试药

G型薄层层析硅胶板、GF254型薄层层析硅胶板（青岛海洋化工厂），ZF-2型三用紫外仪 （上海市安亭电子仪器厂）。

连参通淋片 （神威药业有限公司，批号1004001，1004002，1004003），盐酸小檗碱、原儿茶醛、大黄素对照品 （中国药品生物制品检定所），所用化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 盐酸小檗碱的鉴别

2.1.1 溶液制备 取连参通淋片1片，研细，加乙醇30 mL，超声处理5 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2.5 mL使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。取缺黄连的阴性样品0.8 g，同供试品溶液制法得缺黄连的阴性对照溶液。

2.1.2 鉴别试验 照薄层色谱法试验[1]，吸取上述3种溶液各1μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯 －醋酸乙酯 －甲醇-异丙醇 －水（3.5∶3∶1.5∶1.5∶0.4）为展开剂，置氨蒸气饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，结果见图1。

图1 盐酸小檗碱薄层鉴别图

2.2 原儿茶醛的鉴别

2.2.1 溶液制备 取连参通淋片5片，研细，加乙醇30 mL，研磨提取5 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，加水饱和的正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇3 mL使溶解，作为供试品溶液。取原儿茶醛对照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。取缺丹参的阴性样品4 g，同供试品溶液制法得缺丹参的阴性对照溶液。

2.2.2 鉴别试验 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液4μL、对照品溶液2μL、阴性对照溶液4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－丙酮－甲酸（8∶1∶1）为展开剂[2]，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁稀乙醇溶液－2%铁氰化钾稀乙醇溶液（1∶1），静置至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，结果见图2。

图2 原儿茶醛薄层鉴别图

2.3 大黄素的鉴别

2.3.1 溶液制备 取连参通淋片5片，研细，加三氯甲烷20 mL、盐酸1 mL，加热回流提取45 min，滤过，收集续滤液5 mL，蒸干，加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取大黄素对照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。取缺大黄的阴性样品4 g，同供试品溶液制法得缺大黄的阴性对照溶液。

2.3.2 鉴别试验 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μL、对照品溶液2μL、阴性对照溶液5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－醋酸乙酯（10∶3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%氢氧化钾乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，结果见图3。

图3 大黄素薄层鉴别图

3 讨论

盐酸小檗碱鉴别试验中，供试品溶液的制备最初选用甲醇提取，点样量为5μL时盐酸小檗碱斑点才清晰可见，经探索改提取溶剂为乙醇后[3-5]，点样量为1 μL时盐酸小檗碱斑点即清晰可见，表明乙醇对盐酸小檗碱的提取率比甲醇高，故采用乙醇提取。曾采用苯－醋酸乙酯 －甲醇 －异丙醇 －水（6∶3∶1.5∶1.5∶0.3）为展开剂[3]，展开后主斑点 Rf值较小，只有0.2左右，故调整了展开剂配比。

原儿茶醛的鉴别试验中，曾采用70%乙醇超声提取30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用稀盐酸调pH值为2，用醋酸乙酯萃取2次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液[6-7]，此种提取方法实验效果不理想，斑点都不很清晰。因为原儿茶醛溶于冷乙醇，故使用乙醇提取的方法，对比了乙醇回流提取、乙醇超声提取和乙醇研磨提取，经试验后发现乙醇回流和超声提取出来的杂质较多，杂质斑点对原儿茶醛斑点有干扰，研磨提取则提取的杂质较少，对原儿茶醛斑点无干扰，薄层色谱斑点清晰。

大黄素的鉴别试验中，曾采用甲醇回流提取1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加5%氢氧化钠溶液使溶解，滤过，滤液加盐酸调至pH 2～3，置水浴回流加热30 min，冷却，用三氯甲烷萃取2次，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液，此方法鉴别效果明显，但处理过程复杂，处理时间较长，采用上文方法可以节省一半以上的供试品处理时间，大大提高了效率，故最后采用上文的方法[8-10]。

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Identification of Berberine hydrochloride，Protocatechuic aldehyde and Emodin in the Lianshentonglin Tablets by TLC

ZHENG Guo-cheng1，CHEN Hao-da1，LIFei1，ZHANG Gang1，2
（1.Shineway Pharmaceutical Co ltd，Shijiazhuang051430，China；2.Hebei Province Engineering Research Center for Traditional Chinese drug Injections，Shijiazhuang051430，China）

Objective：To study the identification of berberine hydrochloride，protocatechuic aldehyde and emodin in Lianshentonglin tablets.Methods：The thin-layer chromatography was used.Results：The identification method is repeatable and has a strong specificity.Conclusion：The method we founded can be used for the identification of berberine hydrochloride、protocatechuic aldehyde and emodin in Lianshentonglin rablets.

Lianshentonglin Tablets；Berberine hydrochloride；Protocatechuic aldehyde；Emodin；TLC

石家庄科学技术研究与发展计划课题（03120023A）

*郑国成，E-mail：lifei08170923＠126.com

2011-06-13）