水产品在消毒水作用下产生呋喃西林代谢物的研究

杨 曦，李红光

(1.广东恒兴集团有限公司质量检测中心，广东湛江524094;2.湖北省汉川市人民医院药剂科，湖北汉川430016)

水产品在消毒水作用下产生呋喃西林代谢物的研究

杨 曦1，李红光2

(1.广东恒兴集团有限公司质量检测中心，广东湛江524094;2.湖北省汉川市人民医院药剂科，湖北汉川430016)

水产品在加工过程中，残留的消毒水(主要成分为次氯酸钠)与水产品作用能产生呋喃西林代谢物，其含量与消毒水浓度(含量≤3%)、作用时间和接触面积成正比。利用液相色谱串联质谱仪，研究了消毒水浓度、浸泡时间和接触面积与SEM残留量的关系。

水产品，消毒水，次氯酸钠，呋喃西林代谢物，液相色谱串联质谱仪(LC－MS/MS)

呋喃西林作为一种抗菌药物而被广泛应用于水产品中。1995年欧盟禁止在动物饲料中添加呋喃西林等违禁药物。在动物体内，呋喃西林的代谢速度快，因而只能通过检测其代谢产物SEM(见图1)来推断呋喃西林的残留量。近些年来，在水产品加工生产过程中，往往出现原料合格，但经加工生产后，部分产品含SEM的现象。K.Hoenicke［1］研究发现，水产品生产加工过程中所用的消毒水与水产品作用后可能会产生SEM。本文研究了消毒水浓度、浸泡时间与SEM残留量的关系。

图1 呋喃西林及其相应代谢物的化学结构

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

呋喃西林代谢物标准品 Sigma公司，纯度≥99%;邻硝基苯甲醛 Alfa Aesar公司，纯度≥98%;甲酸 天津市科密欧化学试剂有限公司，优级纯;正己烷 Merck公司，色谱级;乙酸乙酯Honeywell公司，色谱级;二甲基亚砜 Sigma公司，纯度≥99.5%;乙腈 Fisher Scientific公司，色谱级;消毒水 湛江绮梦日化有限公司，纯度12%。

API 3200液相色谱－质谱联用仪 配有电喷雾离子源(ESI)及Analyst software1.4数据处理系统，美国Applied Biosystems公司。

1.2 实验方法

试样中残留的呋喃西林在酸性条件下用邻硝基苯甲醛衍生化，用乙酸乙酯提取。电喷雾离子化，液相色谱－串联质谱检测，用外标法定量。

1.2.1 实验条件

1.2.1.1 色谱条件 色谱柱:Luna C18，150×2.00mm，5μm，美国phenomenex公司;流动相A(水+0.1%甲酸)－流动相 B(乙腈);梯度 洗脱 0～6min，80%A～10%A;6～10min，10%A;10～11min，10%A～80%A;11～18min，80%A;流速:0.2mL·min－1。

1.2.1.2 质谱条件 离子化模式为+ESI，质谱分辨率为单位分辨率，检测方式为MRM，定性离子对为209.1/192.2、209.1/166.1，定 量 离 子 对 为 209.1/192.2，定量方式:外标法定量。

表1 消毒水浓度与SEM残留量的关系

表2 消毒时间与SEM残留量的关系

表3 消毒水接触面积的影响

2 结果与讨论

2.1 消毒水浓度与SEM残留量的关系

分别采用浓度为0、0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1%、3%(含量超过3%后水产品表面颜色变黄，实际生产过程中所使用浓度小于3%)的消毒水浸泡罗非鱼片和虾仁，时间为2h。取出后在自来水中漂洗，30s内取出，放入PE袋，－18℃保存，第2d进行测定，结果见表1。

2.2 浸泡时间与SEM残留量的关系

采用浓度为0.2%消毒水浸泡罗非鱼片和虾仁，时间逐渐增加，取出后在自来水中漂洗，30s内取出，放入PE袋，－18℃保存，第2d进行测定，结果见表2

由表1和表2可知，经过消毒水处理后，阴性样品(南美白虾、罗非鱼片)产生了SEM，在消毒水含量从0增加到3%时，随着消毒水浓度和浸泡时间的增大，SEM的残留量也增大［1］。其原因为:

a.水产品(南美白虾、罗非鱼片)经消毒水处理后会分解出游离的氨基酸，一部分氨基酸(精氨酸、组氨酸、瓜氨酸等)自身能分解产生SEM;

b.氨基酸进一步代谢产生尿素和氨，氨与次氯酸钠作用产生氯胺，氯胺与尿素在一定条件下能产生SEM;

c.氯胺与氨还能作用生成联氨，同时带酰胺基团物质与次氯酸钠作用能生成异氰酸盐，联胺与异氰酸盐反应也能产生SEM。

但若继续增大消毒水含量后，样品表面颜色开始变黄，同时产生大量气体，严重影响外观，所以一般水产品加工企业所用于消毒处理的含量都不会超过3%。

2.3 水产品接触消毒水面积与SEM残留量的关系

将大小大致相同的罗非鱼片分成两部分，剪成块状后的罗非鱼(面积大约3cm×2cm)与罗非鱼片(面积大约15cm×8cm)用消毒水在相同条件下(浓度0.2%，时间2h)浸泡，取出后在自来水中漂洗，30s内取出，放入PE袋，－18℃保存。第2d进行测定，结果见表3。

由表3可知，剪成块状后的罗非鱼与罗非鱼片用消毒水在相同条件下(浓度0.2%，时间2h)处理后产生的SEM含量高于自身，可能原因为大小大致相同的罗非鱼片剪成块状后，增大了与次氯酸钠接触的表面积，化学反应进行得更充分，产生SEM的浓度也就越大。

3 结论

在水产品加工过程中，往往会用到消毒水。当残留消毒水引入到水产品后就会产生SEM。其含量与消毒水浓度(含量≤3%)、作用时间和接触面积成正比。因此，清洗过程一定要注意尽可能清除残留的消毒水。

［1］K Hoenicke，R Gatermann，L Hartig，et al.Formation of semicarbazide(SEM)in food by hypochlorite treatment:is SEM a specific marker for nitrofurazone abuse［J］.Food Additives and Contaminants，2004，21(6):526－537.

Study on formation of semicarbazide(SEM)in aquatic products by hypochlorite treatment

YANG Xi1，LI Hong－guang2
(1.Guangdong Evergreen Group Co.，Ltd.，Quality Inspection Center，Zhanjiang 524094，China;2.Pharmacy of Hanchuan City People’s Hospital，Hanchuan 430016，China)

In the process of manufactured，residual disinfectant(hypochlorite)can react with the aquatics and produce SEM.The content of SEM was in direct proportion to the concentration of disinfectant(≤3%)or time of reaction and immersion area with disinfectant.The relation of concentration，time and immersion area and content was analyzed by liquid chromatography tandem mass spectrometry(HPLC－MS/MS).

aquatics;disinfectant;hypochlorite;SEM;liquid chromatography tandem mass spectrometry(LC－MS/MS)

TS254.1

A

1002－0306(2011)04－0158－02

2010－03－15

杨曦(1980－)，男，硕士研究生，研究方向:分析化学，食品安全。