奶牛布鲁菌病的血清学检测

任 可,李 桐,张 勇

(1.包头医学院,内蒙古包头 014040;2.包头市动物卫生监督所,内蒙古包头,014040;3.陕西英考鸵鸟股份有限公司杨凌鸵鸟示范中心,陕西杨陵 712100)

奶牛布鲁菌病(Brucellosis)是由布鲁菌(B rucella)引起的一种慢性人兽共患传染病,其特征是引起奶牛生殖器官和胎膜发炎、不育、流产和各种组织的局部病灶[1-2]。布鲁菌病历史悠久,分布广泛,世界动物卫生组织(OIE)曾将其列入B类传染病,我国将其列为二类传染病[3-4]。据世界统计资料表明,1887年首次证实了本病病原体,20世纪30～60年代布鲁菌病在世界范围内已大面积流行,全世界200多个国家中,已有160多个国家和地区有布鲁菌病存在和流行,每年因布鲁菌病造成的经济损失近30亿美元,经过十多年的努力,大部分国家宣布清除了布鲁菌病[5-6]。我国布鲁菌病疫情在20世纪80年代末至90年代初曾得到较好控制,但我国每年因该病造成的经济损失也达数亿元[7-8]。近年来,奶牛布鲁菌病发病率逐年呈上升趋势,为了及时掌握疫情动态,采取有效地防制措施,控制布鲁菌病的发生和蔓延,以保护人畜健康,我们对部分奶牛场布鲁菌感染情况进行了抽样调查,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 被检血清 随机抽取规模奶牛养殖小区、中小规模养殖场和散养户奶牛血清共1 000份。

1.1.2 诊断液 布鲁虎红凝集抗原(R型)批号:200805;布鲁虎红凝集抗原(S型)批号:200810;布鲁菌试管凝集抗原(R型)批号:200807;布鲁菌试管凝集抗原(S型)批号:200805;R型阳性血清批号:2008;S型阳性血清批号:2008。由农业部动物诊断液制备中心提供。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 按照农业部颁发的《中华人民共和国国家标准动物布鲁菌病诊断技术》中规定的技术要求进行操作,血清以布鲁菌虎红平板凝集试验(RBPT)初筛,吸取0.03mL滴于洁净玻璃板上,加入0.03 mL虎红平板凝集抗原,混匀后4 min,阳性或疑似阳性的样品用布鲁菌试管凝集试验(SPT)方法进行确认。

1.2.2 判断标准 以出现50%凝集(++)的血清最大稀释度作为该被检血清的凝集价,当凝集价1∶00以上时判为阳性,1∶50～1∶00之间判为可疑,1∶50以下判为阴性。

2 结果

个体养牛户与不同规模养殖场布鲁菌病的检测结果见表1。由表1可知,随机检测的1 000头奶牛,通过虎红平板凝集试验进行初检,阳性头数为30头,阳性率为 3%;其中散养户共检测225头,阳性头数为11头,阳性率为4.89%,中小规模养殖户共检测330头,阳性头数为11头,阳性率为3.33%,规模养殖场共检测445头,阳性数为8头,阳性率为2.02%。然后对初检阳性的血清进行试管凝集试验进行确诊,结果表明,散养户阳性率为2.67%,中小规模养殖场为1.52%,规模养殖场为1.12%。

表1 布鲁菌病虎红平板凝集试验和试管凝集试验检测结果Table1 Rose bengalplate agglutination and tube agglutination test for b rucellosis

3 讨论

本次调查是随机抽样对部分散养户、中小规模及规模养殖场共1 000头奶牛进行进行布鲁菌病血清学检测,根据结果可知,散养户阳性率2.67%,中小规模养殖场阳性率为1.52%,规模养殖场阳性率为1.12%,散养户布菌阳性率要比规模养殖场阳性率要高些,说明规模化的养殖模式能比较有效地防制本病的发生,中小规模和散养户奶牛阳性率也相对较低,这样就说明中小规模的养殖场只要注意布鲁菌病的防控措施,也能取得较好的防控效果。此次调查结果与齐景文等[9-10]调查结果基本一致。

目前布鲁菌病的诊断和检测技术主要有虎红平板凝集试验(RBPT),试管凝集试验(SAT),酶联免疫吸附试验(ELISA),补体结合试验(CFT),乳汁环状试验(MRT)等[11-12]。本次调查先用虎红平板凝集(RBPT)方法进行初筛,由于其特异性不高,而且存在人为因素影响,因而对检测结果为阳性或可疑阳性的样品,再使用试管凝集试验(SAT)方法确诊。CFT试验试验条件要求高,基层兽医站难以应用;试管凝集试验是我国法定的诊断布鲁菌病的方法。SAT的准确性较高,但该方法繁琐费时,不适于现场操作;虎红平板凝集操作比较简单,和MRT是国际奶牛贸易上初步检测的方法,但是其特异性较低,受试验温度和凝集时间相对较短的影响,不易准确判断结果。所以,用RBPT检测为阳性者,还要经过SAT或CFT进行确诊,只有这两种检测均为阳性者,才能最终判断为阳性[13]。

布鲁菌病是人兽共患病,危害性非常大,必须引起政府重视,但是并不是不可防治的。只要重视和加强强制性防疫,群防群控,做好防疫工作,布鲁菌病就可以得到控制。一但处理不好,应对不当,将会引发较大公共卫生事件,严重时还可能会对社会经济发展造成巨大影响。因此,必须加强组织领导,提高各级领导对布鲁菌病防治工作重要性认识。将其放到更加突出位置,高度重视,全力应对。加大宣传力度、定期开展检测监测、规模各行处理程序、解决经费不足、严格净化监督管理等,只要措施得当,政策对路,落实到位,就可以控制动物疫病的发生。

[1]蔡宝祥.家畜传染病学[M].4版.北京:中国农业出版社,2001.

[2]杨建伟,曹维伟.奶牛布鲁氏菌病的检测技术研究进展[J].中国牛业科学,2010,36(5):51-53.

[3]任洪林,卢士英,周 玉,等.布鲁氏菌病的研究与防控进展[J].中国畜牧兽医,2009,36(9):139-143.

[4]尚德秋.布鲁氏秆菌病实验室诊断的非特异性反应及其鉴别[M].北京:海洋出版社,1995.

[5]Davis DS,Elzer PH.Brucella vaccines in w ildlife[J].Vet M icrobiol,2002,90(11):533-544.

[6]孙耀贵,黄姜生,陈 佳.三种血清学方法检测牛布鲁氏秆菌病的比较试验[J].黑龙江畜牧兽医,2005(1):42-43.

[7]崔丽瑾,王兴龙,王英超,等.野生动物布鲁氏菌病[J].中国人兽共患病学报,2010,26(3):283-288.

[8]Godfroid J.Brucellosis in wildlife[J].Rev SciTech Off In Epiz,2002,21(2):277-286.

[9]齐景文.布鲁氏菌病常用诊断方法应用现状及评价[J].中国畜牧兽医,2006,33(8):70-73.

[10]姜风华,于 刚.布鲁氏菌PCR快速检测方法的建立[J].现代畜牧兽医2008(2):4-5.

[11]马仕宾,苏乙拉图,革 命,等.牧区防控动物布鲁氏菌病存在的问题[J].畜牧与饲料科学,2010,31(4):105-106.

[12]于桂芳,温富勇,王国良,等.奶牛布病试管凝集试验与补体结合试验结果差异分析[J].中国动物检疫,2006,23(12):34-35.

[13]马桥凤.牛布鲁菌病的诊断与防治[J].畜牧与饲料科学,2009,30(3):137-138.