前列地尔乳剂的特殊安全性实验研究

李 萍 ，刘宏大 ，王宏英 ，薛 雁 ，薛百忠 ，潘月军

（1.辽宁诺康生物制药有限责任公司，辽宁沈阳 110171；2.吉林省育华药业有限责任公司，吉林长春 130122）

前列地尔乳剂是前列地尔为主要成分的脂质乳制剂，具有高效性、靶向性、持续性。前列地尔是一种高效生理活性物质，具有扩张血管、抑制血小板聚集、抗血小板活化作用，改善微循环，抑制动脉粥样硬化形成，对肝、肾、肺、胃病变均有治疗、保护作用。临床上主要用于心脑血管疾病、糖尿病并发症、闭塞性动脉硬化症、肝损伤等方面，还是老年下肢血管疾病的主要推荐药[1-2]。为了评价前列地尔乳剂是否符合静脉注射药物的安全性标准，从溶血性、血管刺激性和过敏性三个方面进行了实验研究。

1 仪器与试药

1.1 试药

0.9 %氯化钠注射液（沈阳志鹰制药厂）；前列地尔乳剂（2 ml∶10 μg，吉林省育华药业有限责任公司）。

1.2 实验动物

新西兰种白兔：体重2.0～2.5 kg，雌雄兼用，沈阳药科大学实验动物室提供，动物使用证号：SYXK（辽）2003-0012。健康豚鼠，全白色毛，18 只，体重250～300g，雌雄兼用，沈阳药科大学实验动物室提供，动物使用证号：SYXK（辽）2003-0012。

1.3 受试物

前列地尔供试溶液：2 ml 前列地尔乳剂加入10 ml 0.9%氯化钠注射液稀释，混匀，备用。鸡蛋清静脉注射液（阳性对照药）：临用时用0.9%氯化钠注射液配制成含量为2%（体积比）的浅黄色透明溶液。

2 方法与结果[3-7]

2.1 体外溶血性试验

2.1.1 方法

自家兔耳缘静脉采血15 ml，用玻璃珠除去纤维蛋白后，离心15 min（1 500 r/min），除去上清液，再以10倍量生理盐水洗涤3次（均离心弃去上清液），至上清液无红色，再用0.9%氯化钠注射液配成2%红细胞混悬液，备用。取10 ml 试管7 支，按表1 加入各种溶液，其中第6 管为生理盐水空白对照，第7 管为阳性对照（蒸馏水）。各管轻轻摇匀后，37℃水浴中温孵3 h，观察0.5～3.0h 内各试管内的溶血程度，按表2 标准判断。

表1 体外溶血试验

2.1.2 结果

前列地尔乳剂在0.5～3.0h 内未出现溶血或部分溶血现象，表现为溶液中红细胞全部下沉，上层液乳白色与前列地尔乳剂相同，摇匀后红细胞分散；生理盐水组在0.5～3.0h 内也未出现溶血或部分溶血现象，蒸馏水组在各时间点全溶血，结果见表3。

表2 溶血结果判断

表3 前列地尔注射液体外溶血试验结果

2.2 血管刺激性试验

2.2.1 方法

家兔6 只，随机分成两组，第一组左耳注射前列地尔注射液1 ml/kg；第二组左耳给等容积0.9%氯化钠注射液作对照，连续给药3d，每天1次，末次给药后24 h，处死动物，在进针部位下1 cm和5 cm 处，剪取兔耳，肉眼可见有无红肿、丘斑形成等，并以10%甲醛固定，石蜡切片，HE 染色，光镜下观察血管内皮、皮下组织及血栓形成情况。

2.2.2 结果

肉眼所见：给药组和对照组的给药局部未见明显增生、炎症及组织坏死等出现。镜下所见：给药组1 cm和5 cm 处血管腔内无血栓、血管内皮细胞及周围结缔组织均未见明显异常。氯化钠注射液组1 cm和5 cm 处血管及周围结缔组织均未见明显异常。

2.3 全身过敏性试验

2.3.1 剂量分组

2.3.1.1 试验组：前列地尔供试品溶液，致敏剂量每次1 ml，共3次（ip）；激发剂量 2 ml，共 1次 （iv）。

2.3.1.2 阳性对照组：鸡蛋清静脉注射液，致敏剂量每次1 ml，共 3次（ip）；激发剂量 2 ml，共 1次（iv）。

2.3.1.3 阴性对照组：给相同剂量的0.9%氯化钠注射液。

2.3.2 方法

取健康白色豚鼠18 只，随机分成三组，即前列地尔乳剂试验组、鸡蛋清静脉注射液阳性对照组和阴性对照组，每组6 只，雌雄兼用。每只豚鼠分别隔日、腹腔注射（ip）前列地尔供试品溶液、鸡蛋清静脉注射液和0.9%氯化钠注射液1 ml，连续3次，每次注射后观察豚鼠的反应情况。ip 结束后，每组再分成两小组，每小组3 只。分别于首次注射受试物后的第14天和第21天单次静脉注射 （iv）以上相应的受试物2 ml进行激发，观察记录动物注射后3d 内有无搔鼻、耸毛、呼吸困难、痉挛、休克直至死亡等，见表4 中的过敏症状。

2.3.3 结果

健康白色豚鼠分别隔日ip 前列地尔注射液，鸡蛋清静脉注射液，0.9%氯化钠注射液1 ml，连续3次。每次给药后三组豚鼠均未出现任何异常反应，活动、摄食、饮水均正常，与阴性对照组相同。

表4 豚鼠过敏反应级数

首次给药后14d和21d分别单次静脉注射（iv）前列地尔供试品溶液、鸡蛋清静脉注射液和0.9%氯化钠注射液2 ml。注射后，前列地尔乳剂试验组豚鼠仅出现轻微搔鼻或颤抖反应，未引起死亡，过敏反应级数为1；而鸡蛋清组豚鼠出现严重而明显的过敏反应症状，主要表现为竖毛、呼吸困难、抽搐、尿便失禁、甚至出现休克死亡，死亡时间均在2 min 内，死亡率达100%，过敏反应级数为4 级。阴性对照组豚鼠无任何异常反应。

3 讨论

体外溶血实验表明，前列地尔乳剂在临床使用的浓度下，无溶血性和红细胞黏集作用。

前列地尔冻干粉针，对血管的刺激性较强，静脉滴注后多有不同程度的灼样胀痛，若滴注过快，疼痛严重。在前列地尔乳剂的血管刺激性试验中，未见明显刺激作用，可能由于前列地尔被包裹在乳剂粒子中，具备了靶向性和提高稳定性的同时，也可避免前列地尔与血管的直接接触，有效地降低了注射过程中局部红肿和疼痛的不良反应。

过敏反应是一种变态反应，当制剂中某些物质以抗原或半抗原初次进入机体，可以通过刺激机体产生抗体。这种抗体附着在肥大细胞上，此后又有同样抗原进入机体时，即与机体发生反应，使肥大细胞释放组胺等物质，造成局部水肿，动物出现咳嗽或呼吸困难、抽搐，甚至休克死亡。实验动物中以豚鼠对过敏反应最为敏感，因此，采用豚鼠进行过敏性反应实验。过敏反应级数达2 级（含2 级）以上，则该受试物被认为过敏反应不合格。过敏性试验结果表明，前列地尔乳剂未出现明显的过敏反应，即认为无过敏反应。

以上试验结果表明，前列地尔乳剂安全性好，为临床用药提供一定的理论依据。

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