血浆α-synuclein水平与帕金森病相关性的Meta分析

周 波 张春林 文 敏 焦 玲 (贵阳医学院人体解剖学教研室，贵州 贵阳 550004)

我国帕金森病(PD)患病人数已超过200万。目前临床上对PD的诊断尚无准确、特异的生物诊断标记〔1，2〕。近年来研究发现α-synuclein的异常聚集与PD密切相关，以血浆α-synuclein表达水平作为PD诊断的生物标记已经成为当前研究的热点，但国内外研究结果不尽相同，甚至出现了相反结果。因此，本研究拟通过对国内外公开发表的以及本课题组尚未发表的有关血浆α-synuclein表达水平与PD关系的研究文献进行Meta分析，以期综合评价两者间的联系。

1 资料与方法

1.1 资料来源 分别以“α-synuclein/α-突触核蛋白”、“parkinson/PD/帕金森”与“blood/plasm/血浆”结合以“主题、关键词、主题词”途径，联合检索中国生物医学文献数据库(CMB)和中国学术期刊全文数据库(CNKI)获得全部相关的中文文献，运用Endnote检索Medline、Pubmed等外文数据库，收集1990～2010年国内外公开发表的以及本课题组尚未发表的有关人血浆α-synuclein表达水平与PD关系的研究文献。

1.2 文献纳入标准 ①1990～2010年以前国内外发表的一次文献及本课题组尚未发表的数据;②独立性研究，目的一致;③各文献研究对象来源明确，病例诊断明确，病例和对照的例数明确;④原始数据提供了样本量、均数、标准差;⑤资料收集方法科学、资料分析方法正确。

1.3 文献排除标准 ①动物实验;②α-synuclein在血浆外表达。③剔除重复报告、质量差、报道信息太少(未给出α-synuclein均数和标准差)及无法利用的文献。

1.4 统计学分析 运用RevMan5.0分析软件进行异质性检验，如果各研究结果之间差异无统计学意义则用固定效应模型，若有则采用随机效应模型，计算合并效应指标值及95%CI，画出森林图，并进行敏感度分析和漏斗分析。

2 结果

2.1 研究资料基本情况表 共收集到符合纳入标准的文献4篇，累计病例共444人，累计对照共252人。各项研究结果差异较大，认为PD患者血浆α-synuclein表达水平与正常对照差异有统计学意义且高于对照的有两篇(Lee〔3〕和焦玲)。认为PD患者血浆α-synuclein表达水平与正常对照差异有统计学意义且低于对照的有一篇(Neumayer〔4〕)，认为两者差异无统计学意义的有一篇(Min Shi〔5〕)。见表1。

表1 纳入Meta分析文献的基本情况

2.2 资料的异质性分析 对纳入分析的各研究结果进行异质性检验。结果显示，χ2=86.47，P ＜ 0.00，I2=97%，因此，认为各独立研究存在异质性，可能与患者年龄、性别、病程等不同有关，故采用随机效应模型对效应指标值进行合并统计分析。RevMan软件绘制森林图(图1)，结果显示，总体效应检验Z=0.57，P=0.57，标准化均数差(S)为0.26，95%CI= －0.64～1.17，在森林图中，其95%CI横线与无效竖线相交，提示尚无充分证据说明血浆α-synuclein表达水平与PD相关。

2.3 敏感性分析 逐一剔除其中一组数据后，再行Meta分析，结果显示，合并后95%CI横线仍与无效竖线相交，与上述结果一致，说明敏感性低，研究结果较为稳定可信。

图1 血浆α-synuclein表达水平与PD关系Meta分析森林图

2.4 偏倚的评估 图2，分布呈倒漏斗形，近似对称，小样本研究分布在漏斗底部，发表偏倚较小。

图2 血浆α-synuclein表达水平与PD关系Meta分析漏斗图

3 讨论

在筛选文献过程中发现，关于人血浆α-synuclein表达水平与PD关系国内尚无文献发表，而国外发表的文献中大部分研究并没有提供均数、标准差等原始数据，使得很多研究难以用于分析和验证，建议今后在病例对照研究的文章中尽可能提供基本的原始数据，增加纳入分析的文献数量，减少偏倚。

本研究利用Meta分析，对人血浆α-synuclein表达水平与PD的关系做综合定量评价，通过联合使用多种文献检索途径，尽可能全的检索到相关文献，以减少偏倚。对4篇不同研究背景下人血浆α-synuclein表达水平与PD关系的分析结果表明，PD组与健康对照组血浆α-synuclein表达水平差异无统计学意义。排除权重较大或较小的文献后，Meta分析结果合并效应量变化不大，说明敏感性低，结果较为稳定可信。

Shi等〔5，6〕研究发现，α-synuclein 广泛存在于血液的各种成分之中，红细胞中约占99%，血小板、白细胞和血浆中含量仅占1%，血浆中α-synuclein表达水平易受溶血及血小板污染等因素的影响，因此，检测血浆中α-synuclein表达水平存在许多不稳定因素，这可能是各研究结果不一致的原因之一。

近年对α-synuclein蛋白纤维化过程的生理物理学研究发现，α-synuclein主要以单体、寡聚体和多聚体三种形式存在〔7〕，Wakabayashi等〔8〕进一步研究发现对神经细胞产生毒性作用的主要是可溶性的寡聚体，提示α-synuclein寡聚体可能是帕金森发病机制的关键。因此，检测人血浆中α-synuclein寡聚体的表达水平在总α-synuclein中所占比例可能会更有意义〔9〕。本课题组检测了贵州地区人血浆中α-synuclein寡聚体的表达水平在总α-synuclein中所占比例，证实了上述推断。但要将这一结论推广，尚需更多的研究数据支持。

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3 Lee PH，Lee G，Park HJ，et al.The plasma alpha-synuclein levels in patients with Parkinson's disease and multiple system atrophy〔J〕.J Neural Transm，2006;113(10):1435-9.

4 蒋雨平.第11届国际帕金森病和运动障碍大会简讯〔J〕.中国临床神经科学，2007;15(5):454.

5 Shi M，Zabetian CP，Hancock AM，et al.Significance and confounders of peripheral DJ-1 and alpha-synuclein in Parkinson's disease〔J〕.NeurosciLett，2010;480(1):78-82.

6 Barbour R，Kling K，Anderson JP，et al.Red blood cells are the major source of alpha-synuclein in blood〔J〕.Neurodegener Dis，2008;5(2):55-9.

7 Bosco DA，Fowler DM，Zhang Q，et al.Elevated levels of oxidized cholesterol metabolites in Lewy body disease brains accelerate alpha-synuclein fibrilization〔J〕.Nat Chem Biol，2006;2(5):249-53.

8 Wakabayashi K，Tanji K，Mori F，et al.The Lewy body in Parkinson's disease:molecules implicated in the formation and degradation of alpha-synuclein aggregates〔J〕.Neuropathology，2007;27(5):494-506.

9 El-Agnaf OM，Salem SA，Paleologou KE，et al.Detection of oligomeric forms of alpha-synuclein protein in human plasma as a potential biomarker for Parkinson's disease〔J〕.FASEB J，2006;20(3):419-25.