慢性乙型肝炎患者检测乙型肝炎病毒大蛋白的临床意义

赵 霞

南京市红十字医院检验科，江苏南京 210001

我国慢性乙型肝炎患者约占世界的1/3[1]，且HBeAg阴性患者较多，目前对慢性乙型肝炎患者的治疗效果监测仍以HBeAg和HBV-DNA阴转及临床肝脏功能改善为主，对HBeAg阴性患者没有有效监测指标。近年来研究表明，HBVLP具有反式激活HBV细胞内复制的功能，与HBV感染、病毒复制及预后均具有密切关系[2]。本文中笔者对120例慢性乙型肝炎患者血清HBV-LP、HBeAg、HBV-DNA进行检测，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2007年1月～2010年12月收治的慢性乙型肝炎患者120例，其中，男78例，女42例；年龄34～67岁，平均（46.1±12.4）岁。所有患者均符合乙型肝炎病毒感染的临床诊断标准，且无其他类型病毒性肝炎合并感染。

1.2 方法

所有患者均于清晨采集空腹静脉血2～5 ml，分离血清，并置于-20℃冰箱冻存备用。HBV-LP和HBeAg检测采用酶联免疫吸附法进行，仪器为瑞士HAMILTON公司全自动酶联免疫分析仪，试剂盒为苏州新波生物技术公司生产。HBVDNA检测采用免疫荧光分析法，仪器为美国PE7700型自动荧光PCR分析仪，试剂为中山大学达安基因股份有限公司生产。所有试剂均在有效期内严格按试剂使用说明书使用。比较HBV-DNA、HBV-LP及HBeAg的检出率，并对HBeAg阴性的患者HBV-LP、HBV-DNA血清学检出率进行比较，并分析HBV-LP与HBeAg、HBV-DNA的相关性。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0软件进行统计学分析，计数资料比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearman相关检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 慢性乙型肝炎患者三组指标的检测结果

HBV-LP阳性率为87.50%（105/120），显著高于HBV-DNA的检出率[70.00%（84/120）]以及 HBeAg的检出率[38.33%（46/120）]（均 P<0.01）。见表 1。

表1 HBV-LP、HBV-DNA、HBeAg检出率比较

2.2 HBeAg阴性患者中HBV-LP与HBV-DNA检测结果

74例HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者中，HBV-LP阳性率为 82.43%（61/74），HBV-DNA阳性率为 44.59%（33/74），HBV-LP 阳性率显著高于 HBV-DNA 阳性率（P<0.01）。见表2。

表2 HBeAg阴性者HPV-LP与HBV-DNA检出率

2.3 HBV-LP同HBeAg及HBV-DNA表达的相关关系

相关性检验显示HBV-LP与HBV-DNA及HBeAg之间存在正相关关系（rs=0.573，P<0.05；rs=0.681，P<0.05）。 见表 3。

表3 HBV-LP与HBeAg及HBV-DNA表达的相关关系（例）

3 讨论

近年来，随着对乙型肝炎发病机制、病毒感染、复制过程中HBV-LP的作用研究，HBV-LP受到专家、学者们越来越高的重视，越来越多的人逐渐认识到HBV-LP的重要临床意义。HBV-LP是一种由s基因编码的HBV包膜蛋白[3]，具有复杂的空间构象。Dane颗粒与管状病毒颗粒（亚病毒颗粒）内均存有HBV-LP。HBV核壳体膜可与其内侧结合，而病毒受体又能与其外侧结合，HBV-LP对HBV颗粒的成熟、包装有重要作用。HBV患者血清具有感染性与否，与富含HBVLP的亚病毒颗粒及Dane颗粒的多少有密切关系。目前临床上广泛应用的HBV持续抗病毒治疗方案仅对cccDNA的再复制具有一定的抑制作用，而对于已形成的病毒表达蛋白无抑制能力，故不能清除富含HBV-LP的亚病毒颗粒，其在细胞内的长期累积可造成肝细胞的液化和凋亡，同时病毒的继续复制可被亚病毒颗粒反式激活。临床上即使患者达到治愈标准，其肝脏组织内仍然能检测出cccHBV-DNA的复制，说明仍有HBV持续感染[4]。因此，笔者认为，可以通过患者血清HBV-LP的检测对乙型肝炎病毒外膜的完整性进行判断，从而了解到病毒基因或亚病毒颗粒的存在与否。

本研究结果中显示，HBV-LP与HBV-DNA及HBeAg之间均存在显著相关性，其阳性检出率与二者的阳性检出率同样显著相关，但在总体对比上，HBV-LP阳性检出率显著高于HBV-DNA与HBeAg的阳性检出率，在HBeAg阴性组患者中，HBV-LP阳性检出率显著高于HBV-DNA，同时在HBeAg与HBV-DNA均为阴性的患者组中，HBV-LP仍有67.64%的阳性检出率。分析出现上述结果的原因可能为：①血清HBeAg的阴性结果不能说明不存在病毒的复制[5-6]，可能与长期抗病毒治疗导致病毒基因变异造成抗原合成障碍有关；②血清HBV-DNA阴性同样不是一定表明患者体内的HBV完全清除，可能是因为HBV-DNA检测敏感度有限或水平较低，有研究称，血清HBV-DNA水平较低时，肝脏内仍旧可以存在一定量的HBV-DNA；③HBV-LP易在细胞内滞留等多种原因均可造成上述结果的出现。HBV患者血清HBV-LP浓度的检测，可弥补HBV-DNA检测在HBV患者抗病毒治疗终点判断及疗效评估中的不足。当HBV患者血清HBeAg阴性时，通过HBV-LP检测可了解体内病毒的复制、疾病进展情况以及抗病毒疗效与预后[7-9]，有效减少更严重的肝硬化及肝癌的发生。如果HBV患者血清HBV-LP阳性而HBV-DNA阴性时，进行HBV-LP检测可避免不必要的停药反跳，具有更好的临床指导意义。

综上所述，笔者认为对乙型肝炎患者特别是血清HBeAg阴性的乙型肝炎患者，检测血清HBV-LP可作为监测患者体内病毒复制、疾病进展及抗病毒治疗效果的敏感指标，对提高血清学手段诊断HBV的水平有积极意义。

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