高效液相色谱法测定安乃近片中安乃近的含量*

苏志刚，孙东凯，刘广川

(天津市宝坻区药品检验所，天津 301800)

1 仪器与试药

LC-2010AHT色谱仪，LC Solution色谱工作站，安乃近对照品(中国药品生物制品检定所，批号100002-200605)，安乃近片(市售品，批号070103、080714、080308)，甲醇(色谱纯)，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1色谱条件 以十八烷基键合硅胶为填充剂，甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值至4.5±0.5)70∶30为流动相，流速：1.0 ml/min，检测波长：265 nm，进样量20 μl。理论板数按安乃近峰计不得低于1 500。

2.2溶液制备

2．2．1对照品溶液的制备 精密称取安乃近对照品100 mg，置100 ml量瓶中加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2．2供试品溶液的制备 取样品10片，精密称定，研细，取细粉适量(约相当于安乃近100 mg)，置100 ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 ml,置100 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

2．2．3阴性对照溶液液备 按处方取不含安乃近的原料依“2.2.2”项下方法制备即得。取上述3种溶液20 μl依“2.1”项下色谱条件进样，见图1。

2.3线性关系考查 精密称定安乃近对照品100 mg，置100 ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。依次精密吸取溶液20、60、100、140、150和200 μl注入液相色谱仪，依法测定，以安乃近进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进行线性回归。得回归方程Y=634 228X+756 065(r=0.999 9)。结果表明，浓度在20～200 μg/ml范围内，线性关系良好。

2.4精密度试验 精密吸取安乃近对照品溶液20 μl，重复进样6次，按上述色谱条件测定，测得峰面积RSD为1.07%。

2.5重复性试验 取批号为070103的安乃近片样品共5份，依法测定，测得峰面积RSD为0.3%。

2.6稳定性试验 对照品溶液分别于配制后1、2、8、12和24 h，依法测定安乃近峰面积，结果RSD为0.8%。

2.7回收率试验 采用加样回收方法，精取已知含量的安乃近片的细粉 0.05 g，置100 ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液50 ml,置100 ml量瓶中，分别精密加入安乃近对照品溶液25 ml，按供试品溶液的制备方法及上述色谱条件测定。平均回收率为100.2%，RSD为0.4%，见表1。

表1 回收率试验结果

2.8样品测定 对3批样品按上述色谱条件及《中国药典》方法进行含量测定，比较结果见表2。

表2 两种含量测定方法结果比较

1.安乃近

3 讨论

3.1溶液的选择 分别以甲醇-水(60∶40)、乙腈-水(20∶80)；甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调PH值至4.5±0.5)70∶30为流动相，分别注入对照品溶液，结果以甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调PH值至4.5±0.5)70∶30为流动相时色谱图最好。

3.2波长选择 以甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值至4.5±0.5)70∶30为溶剂，取安乃近对照品溶液在200～400 nm波长范围内扫描，结果其最大吸收波长分别为265 nm和245 nm。故选取265 nm为检测波长。

《中国药典》中安乃近片含量测定只有碘量法，本文参考有关文献采用高效液相色谱法，两方法结果基本一致。