清热解毒方剂腹腔注射对急性腹膜炎大鼠血清 TNF-α、IL-6、IL-8 水平的影响

冯丽丽，张爱平，李华伟，庞明珍

(1鹤壁职业技术学院医学院，河南鹤壁458030;2河南中医学院第一附属医院)

研究发现［1］，腹腔感染过程中大量炎性细胞被激活，释放大量炎性细胞因子，导致组织和脏器的功能障碍。中药清热解毒方剂具有抗炎作用，临床上常用于感染性疾病的治疗。2010年1月～2011年2月，我们对急性腹膜炎大鼠模型，在造模前腹腔内预防性注射清热解毒方剂，观察其血清中肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、IL-6、IL-8 水平变化，探讨清热解毒方剂对这些细胞因子的影响以及对脏器的保护作用。

1 材料与方法

1．1 实验动物分组及建模 成年健康 Wistar大鼠90只(河南中医学院实验动物中心提供)，雌雄不限，体质量200～220 g。标准颗粒饲料喂养1周后开始实验。随机分为正常组、模型组和实验组，各30只。模型组和实验组均按照文献［2］的方法大鼠腹腔注射表皮葡萄球菌液制作腹膜炎大鼠模型。

1．2 清热解毒方剂制备及给药方法 清热解毒方剂由河南中医学院药研室制备，为含生药量1 g/ml的浓缩煎剂。实验组于造模前1 h一次性给予清热解毒方剂18 g/kg腹腔注射。

1．3 检测指标及方法 模型组和实验组分别于造模后6、12、24 h用10%水合氯醛麻醉，每次10只，取腹主动脉血5 ml采用ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6、IL-8。按ELISA试剂盒(北京晶美生物工程公司)说明书操作。

1．4 统计学方法 采用SPSS12．0统计软件。计量资料以±s表示，采用配对t检验。P≤0．05为差异具有统计学意义。

2 结果

三组血清TNF-α、IL-6、IL-8水平比较见表1。

表 1 三组血清 TNF-α、IL-6、IL-8 水平比较(pg/ml，¯x ±s)

3 讨论

研究显示，腹膜炎引发的感染目前仍是外科重症患者的主要死因之一［3］。机体对重症感染引起的脓毒症是细菌、内毒素等抗原激活宿主单核巨噬细胞释放多种细胞因子所致［4］。腹腔感染过程中大量被激活的炎性细胞释放多种炎症介质，包括促炎、抗炎细胞因子，TNF-α、IL-6、IL-8即是诱发脓毒血症以及多器官功能衰竭的重要的促炎细胞因子［5］。

TNF-α是免疫炎症反应的重要介质，由活化的单核巨噬细胞和T细胞产生具有激活中性粒细胞和刺激IL-8释放等作用。TNF-α参与了机体的免疫损伤［6］。IL-8是一种中性粒细胞趋化因子，在其他细胞因子的作用下，单核巨噬细胞、中性粒细胞等均产生大量IL-8，并与上述细胞表面的IL-8受体结合，趋化炎症细胞到达炎症部位引起炎症反应［7］。IL-6是一种主要由活化的单核巨噬细胞及B、T淋巴细胞和成纤维细胞、内皮细胞等分泌的具有多种生物功能的炎症细胞因子，在机体炎症反应中起着重要作用［8］。

本实验发现，腹膜炎模型大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平较正常组明显升高(P＜0．05)。因此可以推断，在腹膜炎时单核巨噬细胞、中性粒细胞等处于一种过激活状态，释放大量炎症因子。

清热解毒方剂由大黄、黄芩、白头翁、败酱草等中药组成，清热解毒复方制剂是中医临床常用药物，目前多用于治疗各种感染性疾病及因非感染疾病而出现的热毒壅盛者，对某些肿瘤患者也有一定的疗效。对单味清热解毒中药的研究已证明其具有抗菌、抗病毒、抗毒素、解热、抗炎、调节免疫功能等作用。近年来清热解毒复方制剂的实验研究也受到关注。临床上常用于治疗急腹症［9］。根据本实验结果，腹膜炎模型大鼠预防性腹腔注射清热解毒方剂(仅1次)后，其血清 TNF-α、IL-6、IL-8水平明显低于没有注射该方剂的模型组 (P均＜0．05)。提示清热解毒方剂能够显著抑制因炎症刺激造成的细胞因子的过度分泌。通过炎症细胞因子网络的免疫调节作用，阻断了细胞因子网络的恶性循环，减轻组织及脏器损伤。说明，清热解毒方剂对急性腹膜炎大鼠起保护作用。

［1］陈红风．中医外科学［M］．北京:中国中医药出版社，2005:595．

［2］张秀丽，马健飞，吴咏今，等．姜黄素预处理后大鼠急性腹膜炎腹膜肿瘤坏死因子α的检测［J］．中国医科大学学报，2009，38(10):749-750．

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