野生及杂交盘羊的电刺激采精技术研究

高俊杰，潘永斌，陈海军，王东军，刘永祥，张 冰，王 潇，张居农

（1.内蒙古通辽市畜牧兽医科学技术研究所，通辽 028000；2.新疆兵团农九师170团；3.内蒙古博恩药业；4.新疆医科大学基础医学院；5.解放军第474医院；6.石河子大学动物科技学院，新疆 832003）

精液采集是人工授精的重要环节，常用方法主要有假阴道法和按摩法，已在牛、马、羊、猪和鸡等畜禽上成功应用［1］。而在野生动物或人工驯养的野生动物上，由于其野性强、性情暴烈，常采用电刺激法采集精液，如海狸鼠［2］、大熊猫［3-4］、鹿［5］、猴［6-7］、林麝［8］、黑熊［9］、乌苏里貂等［10-11］，而国内对于盘羊的相关研究未见报道［12］。

盘羊（Ovis ammon），别名大头羊、大角弯羊，属于哺乳纲、偶蹄目、牛科、羊亚科的绵羊属，是国家濒危灭绝的II级重点保护动物，已经列入《联合国濒危动物植物名录》，主要分布在我国的内蒙古、甘肃、青海、新疆和西藏以及亚洲的蒙古、印度北部、锡金等地［12］。为开发利用特种品种资源，本实验于2008年7月—2009年12月，分别在新疆和内蒙古对野生盘羊及杂交后代进行了电刺激采精技术的研究与探讨，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 公羊的饲养及管理 选用舍饲条件下15只体质较好的1～5岁成年公羊。平均体重70 kg，舍饲时间超过1年，对饲养人员具有一定的亲和性。供试羊的日粮组成主要为青贮、干草、玉米等，1日喂2次，清洁饮水。采精前对公羊禁食24 h，不禁水。

1.2 仪器及药品 DZCJ-4型电子采精仪（吉林大学生产，输出电压 0～20V）；OLYMPUS 生物显微镜；5～20mL一次性注射器；载玻片和盖玻片；静松灵注射液（兰州正丰制药有限责任公司，5mL∶100 mg），苏醒灵。

1.3 公羊的生殖保健 采用张春礼、张居农等的公羊生殖保健的技术程序［13］，对参加本实验的野生及杂交盘羊实施生殖保健。

1.4 麻醉与保定 采精前对公羊进行麻醉，麻醉方法采用肌肉注射静松灵（2 mg/kg）。数分钟后，迅速将其推倒，侧卧保定，颈部下垫草袋，1人保定头部。剪尽包皮和尿道口周围的被毛，用生理盐水洗净擦干，温水灌肠，排出肛门中的积粪。

1.5 电刺激采精 将涂有凡士林的电子采精器探棒缓慢插入直肠内8～12cm，使探棒线圈贴紧腰椎腹侧面。打开电刺激采精仪电源开关，调节输出电压，由低至高，先后顺序为2～20V，每档刺激持续时间3～5 s（秒），每次间歇3～1 s，逐步筛选出能适宜采精的输出电压和刺激时间。用集精杯分段接精液，并迅速送检。采精结束时，将采精仪各调节旋钮逐档回零，切断电源，然后拔出电极棒。

取出探棒，洗净、消毒。直肠内涂抹普鲁卡因油剂青霉素，注射0.3～0.5mL苏醒灵，解除保定。

1.6 精液品质检查 按常规的精液检查方法（目测评定法）检查精液的颜色、精液量、精子活力和密度。

2 结果与分析

2.1 生殖保健对盘羊电刺激采精成功率的影响 本实验分别在3—5月非繁殖季节和8—12月繁殖季节对未经生殖保健的4只野生公盘羊电刺激采精，结果如表1。实验发现，未经生殖保健的盘羊对各种电刺激的输出电压均有不同程度的反应。其中，对低电压的电刺激反应不十分敏感，阴茎勃起缓慢，很少出现射精动作；采用高电压和长时间的电刺激，公羊有比较强烈的肢体反应（强直反应）和间断的阴茎勃起反应，有时出现射精动作。

表1 未经生殖保健的盘羊电刺激采精情况

本实验在3—4月份对未经生殖保健的公羊均未能采出精液，这种现象与张居农等［14-16］在绵羊上观察的情况相同。而在8—9月份，对可以电刺激采精的1、9、10号公盘羊的精液镜检发现，只有极个别的精子在轻微摆动，精子活力极差。造成这种现象的原因可能与野生盘羊不适应舍饲环境，公羊未进行生殖保健等有关。

针对以上问题，本实验对4只野生公盘羊采用张春礼等的“低剂量睾酮+促卵泡素”公羊生殖保健的技术程序［13，17］进行处理，电刺激采精结果如表2。从表2可见，经过短期生殖保健处理，随着采精次数的增加，公羊对电刺激采精变得越来越敏感，并逐渐形成了在6～8V电压的刺激下，就能迅速发生阴茎勃起和射精等现象。本实验结果表明，公羊生殖保健不仅恢复了生殖机能，而且也为成功电刺激采精奠定了基础。

表2 经生殖保健的盘羊电刺激采精情况

2.2 静松灵麻醉保定对公羊电刺激采精的影响 采用张春礼等［13］的公羊生殖保健方法处理后，公盘羊的电刺激采精情况如表3。从表3可以看出，采用静松灵麻醉保定后，4只公盘羊除10号外，电刺激采精均能采出正常精液，其精液品质达到正常人工授精标准。

表3 静松灵麻醉保定后公盘羊电刺激采精情况

3 讨论

本实验注意到，在采精过程中如果输出电压过高，电刺激持续时间过长，间歇时间过短，都会造成公羊的肢体强直而影响采精效果。所以在电刺激采精过程中，对公羊要遵循电刺激电压由低到高、刺激时间由短到长、间歇时间由长到短、反复刺激、循序渐进的原则，使公羊逐渐适应并建立起对电刺激和射精的条件反射，王玉珠等［18］和张居农等［19］在犬和狼的麻醉与电刺激采精应用研究中亦有此经验与体会。

4 结论

采用公羊生殖保健的技术程序处理后，以DZCJ-4型电子采精仪对野生及杂交盘羊进行电刺激采精，实施合适剂量的静松灵麻醉保定，采集的精液品质可以达到正常人工授精的标准并用于生产实践。

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