注射口蹄疫疫苗对不同肉用品种种公牛精液品质的影响

张淑二 ，林 雪 ，刘 栋 ，胡洪杰 ，尹旭升

（1.山东省畜牧总站，济南 250022；2.山东省种公牛站有限责任公司，济南 250300；3.山东省畜牧业贸易服务中心）

口蹄疫（foot-and-mouth disease，FMD）是由 FMD 病毒（FMDV）引起的牛、羊、猪等偶蹄动物发生的一种急性、热性、高度接触性传染病，该疫病的平均致死率仅为1%，但其传播力极高，且可以远距离传播［1］。我国部分地区已先后发生亚洲Ⅰ型、A型和O型口蹄疫等多次疫情，给我国畜牧业带来了巨大损失。当前，许多国家是通过注射口蹄疫疫苗对该病毒流行进行预防与控制，并取得了较好效果。种公牛站作为我国养牛业发展的源头行业，为我国的奶牛、肉牛养殖业发展提供种源保障，这一特点决定了对种公牛进行及时正确的口蹄疫疫苗免疫注射对预防该疫情传播具有重要意义。目前，山东省种公牛站饲养利木赞种公牛、西门塔尔种公牛与鲁西牛种公牛共计50余头，在年度防疫工作中发现，各品种种公牛在注射口蹄疫疫苗后一段时间内，其精液品质产生了不同程度的下降。现将本站2011年度1月份种公牛注射口蹄疫疫苗前后一段时间内的各品种种公牛精液的生产及利用情况进行总结与对比，找出其影响规律，为进一步提高种公牛精液生产提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 主要仪器 精子密度测定仪（Accucell 1145），电子天平（HR-120），电视显微可视系统（OPTIPHOT-2），低温冷冻仪（GCS-300），磁力搅拌器（Jan-78），冷藏箱（BYY-190），恒温水浴锅（HH-2），细管精液分装一体化机（UR.G10），超声波洗涤器（SK8200H）。

1.2 动物 选择1.5～5岁的不同品种种公牛20头，其中西门塔尔牛10头、鲁西牛5头、利木赞牛5头，根据其营养需要进行统一分圈饲养，先粗后精，干草、精料补充料日喂量按照体重的1.2%与0.6%补给，青绿饲料每日3kg，自由饮水，适量运动。

1.3 材料 口蹄疫亚洲Ⅰ型与O型双价灭活苗，新疆天康畜牧生物技术有限公司，生产批号：2010024；口蹄疫A型灭活苗，中农威特生物科技股份有限公司，生产批号：1003022J。

采取颈部肌肉注射，使用4cm长16号针头，每头牛一个针头，颈部三角区深层肌肉注射，用量为成年牛每头2mL。

1.4 采精情况 20头种公牛，由专职采精员负责采精工作，成年牛采精频率为每周2次，每次分早晚各采1次，青年公牛每周1次，每次于早晨采集。采精期间，台牛基本固定，并严格执行采精操作规程。

1.5 精液制作方法 采集的原精送入检测室，专人检测原精的采精量、活力和精液密度，确定稀释倍数。稀释好的精液放入4℃冰箱中平衡3 h，镜检活力后用细管精液分装机进行分装，利用冷冻仪按设定好的冷冻程序冷冻8 min，最后用附电视显微摄像系统的生物显微镜进行活力评定，镜检合格者方可进行包装［2］。

1.6 统计处理 采用统计软件SPSS13.0 OnewayANOVA进行方差分析，各组数据均以平均数±标准差（±S）表示。

2 结果与分析

2.1 注射口蹄疫疫苗对西门塔尔种公牛精液品质的影响 由表1可以看出，注射口蹄疫苗前后西门塔尔种公牛的次均采精量差异并不显著（P＞0.05），其精液平均密度在注射疫苗后出现增加且差异显著（P＜0.05），注射疫苗后第3～4周精液平均密度比注射前提高，且差异极显著（P＜0.01）；精液平均活力则在疫苗注射后出现下降趋势，且于注射后的3～8周精液活力与注射前相比达到极显著水平（P＜0.01），第9周精液活力开始逐步恢复正常；伴随精液活力下降，精液废弃率增加，注射后第1周精液废弃率明显高于疫苗注射前精液废弃率（P＜0.05），第3～8周精液废弃率与注射前相比差异极显著（P＜0.01），第9周后精液利用率开始增加并达到注射前水平（P＞0.05）。其制冻数量在疫苗注射后第9～10周出现显著增加（P＜0.05）。

2.2 注射口蹄疫疫苗对利木赞种公牛精液品质的影响由表2可以得出，与疫苗注射前相比，疫苗注射后利木赞种公牛精液次均采精量无显著增加（P＞0.05），而精液密度仅在疫苗注射后的第3～4周显著高于其他时段（P＜0.05）；疫苗注射后的第3～6周种公牛精液平均活力出现降低且显著低于疫苗注射前精液活力（P＜0.05）；注射疫苗后的种公牛精液废弃率有增大趋势，但差异不显著（P＞0.05）；其精液制冻数量也仅在疫苗注射后的第3～4周显著高于疫苗注射前及其他时段（P＜0.05）。

2.3 注射口蹄疫疫苗对鲁西牛种公牛精液品质的影响 由表3可以看出，疫苗注射后鲁西牛种公牛的次均采精量、平均密度、精液废弃率及制冻数量与注射前相比差异均不显著（P＞0.05）；精液平均活力在疫苗注射后的第5～6周与注射前相比差异显著（P＜0.05），其它时段无明显差异（P＞0.05）。

表1 口蹄疫疫苗对西门塔尔种公牛精液品质的影响

表2 口蹄疫疫苗对利木赞种公牛精液品质的影响

表3 口蹄疫疫苗对鲁西牛种公牛精液品质的影响

3 讨论

近年来，我国多地发生各种类型的口蹄疫疫情，给我国畜牧业生产带来了重大损失。种公牛站作为牛冷冻精液供应单位，对疫情的防控意义要远大于一般商品场，所以，利用口蹄疫疫苗对种公牛进行多次免疫是各种公牛站年度防疫工作的重点。但在生产实践中发现，种公牛注射口蹄疫疫苗后会出现精液活力下降、精子畸形率增加及死精现象，其原因可能与疫苗的注射应激及疫苗中氢氧化铝或双相矿物油等佐剂对动物细胞具有毒性作用有关［3］。这给冻精生产带来了一定的不利影响，本试验通过分析口蹄疫疫苗对不同品种种公牛的精液生产的影响，为种公牛站减少因疫苗注射造成的精液生产损失提供数据参考。

采精量与精液密度均是评价种公牛精液品质的重要指标。由本试验的注射免疫情况可以看出，口蹄疫疫苗注射对3个品种种公牛的次均采精量影响不大，注射前后采精量表现平稳，这说明注射该疫苗对种公牛采精量没有影响。但对种公牛的精液密度有一定影响，西门塔尔种公牛在免疫后的第3～10周精液密度显著增加，利木赞种公牛在疫苗注射后的第3～4周精液密度有大幅增加，但鲁西牛种公牛精液密度变化不大。这有可能与精液密度随着气温升高逐步提高有关［4］，1月底山东地区气温回升较快，在疫苗注射后的近两个月试验期间，适宜的气温对提高精液密度也起到了积极作用。而鲁西牛作为山东地方良种肉牛对山东地区环境气候较为适应，气温对其影响不大。

根据GB4143—2008《牛冷冻精液》国家标准的要求，种公牛鲜精活力须≥65%，冻后活力≥35%，不符合该标准的精液均要废弃，鲜精活力大小与精液废弃率高低可以更好地说明口蹄疫疫苗对种公牛精液生产的影响。由本试验结果可以看出，各品种种公牛鲜精活力及精液废弃率均有一定变化，但影响程度不一。其中西门塔尔牛与利木赞牛的精液出现变化的时间较早，且幅度明显、影响期较长。2个指标相伴而行，影响期在4～6周不等。相比而言，疫苗对鲁西牛精液活力的影响时间出现的较晚，幅度也比较小，影响期也仅有1周左右，且恢复较快。同时，鲁西牛精液的废弃率变化也不明显，这在精液生产上具有重要意义，表现出我国地方品种牛比外来品种牛对疫苗应激具有更好的抵抗与适应能力，但其机理尚不明确，这可能与疫苗生产及动物对环境的适应性有关。

精液的制冻数量是体现种公牛精液品质的决定性指标，在本试验中，口蹄疫疫苗注射前后3个品种种公牛精液的制冻数量变化较小。仅在疫苗注射后的第9周开始，西门塔尔牛精液制冻数量比之前显著增加，疫苗注射后的第3～4周，利木赞牛精液制冻数量显著高于其他时段，这都与其同时段精液密度升高有关。

就上述几个指标的影响情况来看，口蹄疫疫苗注射对种公牛精液的平均活力及废弃率均起到负面影响，而对种公牛精液密度影响不显著，精液密度的提高则与疫苗注射对精液生产的其他指标造成的负面影响起到了良好的拮抗作用。

综上所述，口蹄疫疫苗注射对种公牛产生较大应激，对种公牛精液品质有一定的负面影响。所以，合理安排种公牛的免疫时间可以较好地缓解因疫苗应激引起的精液产量下降，比如采取在每年的停采期进行疫苗注射或减少疫苗注射次数等措施，都可以减少种公牛站的生产损失。

［1］Mahy B W，Sobrino F，Domingo E.Overview of foot-and-mouth disease and its impact as a reemergent viral infection.In：Foot-and-Mouth Disease，Current Perspectives［J］.Horizon Bioscience，2004：437-446.

［2］杨库，李聚才，张巧娥，等.不同品种种公牛采精量、精液密度及制冻数量的比较［J］.黑龙江畜牧兽医，2003（12）：25-26.

［3］蒋文俊，李华春，李乐，等.口蹄疫疫苗研究进展［J］.畜牧与兽医，2004，36（5）：42-43.

［4］李杰，杨立峰，李恒帅，等.不同季节种公牛精液各项指标分析［J］.中国畜牧杂志，2008，44（24）：61-64.