益肺康心胶囊对大鼠肺心病模型血浆内皮素、一氧化氮、心钠素的影响*

梁 群 蒋希成 吴海坤

黑龙江中医药大学附属第一医院（黑龙江哈尔滨150040）

肺心病多因久病肺虚，痰瘀潴留，每因复感外邪诱使病情发作或加剧。近年来，中医药治疗肺心病的报道日益增多，已取得了可喜的成果。为了明确益肺康心胶囊治疗肺心病的药效，笔者采用野百合碱复制大鼠肺心病动物模型，观察其对肺心病大鼠内皮素（ET）、一氧化氮（NO）及心钠素（ANF）的影响。

1 材料与方法

1.1 动物 wistar大鼠，体质量（200±20）g，雄性，由黑龙江中医药大学实验动物中心提拱，按清洁级标准饲养。

1.2 药物 益肺康心胶囊：10g/粒，黑龙江中医药大学附属医院制剂室提供，主要成分为人参、黄芪、茯苓、蛤蚧、麦冬、半夏、干姜、厚朴、陈皮、丹参、当归、桃仁、地龙、葶苈子、杏仁等中药。硝苯地平：每片10mg，常州康普药业有限公司，批号1006030。

1.3 试剂及仪器 野百合碱：每支8mg，研域（上海）化学试剂有限公司，批号315220。ET、NO和ANF试剂盒（北京东雅生物技术研究所提供）；紫外分光光度计（美国DV640 Beckman loulter）；FJ-2008P型-自动免疫计数器 （南昌新长征医疗科技发展有限公司）。

1.4 分组与造模 将40只大鼠随机分为空白组、模型组、治疗组、对照组，每组10只。空白组不造模，其余3组均造模。将野百合碱用无水乙醇和生理盐水（2∶8）混合液配成质量分数为1%的溶液，按照50mg/kg腹腔注射1次，14d后即形成动物模型。根据大鼠体质量折算系数，造模14d后，治疗组将益肺康心胶囊细粉加蒸馏水配制成0.26g/mL的水溶液，按2.6g/kg灌胃，每日1次。对照组将硝苯地平配制成0.27mg/mL的水溶液，按2.7mg/kg灌胃，每日1次。空白组与模型组均灌同体积的生理盐水。连续给药15d，至检查前24h停药。

1.5 标本采集及测定 ET测定：采用放射免疫分析方法。取静脉血1mL，注入含7.5%EDTA-2Na 15μL和抑肽酶20μL的试管中，混匀，4℃，3000r/min离心 10min，分离血浆。-20℃保存，测定前，使样本置于室温或冷水中复融，再次4℃，3000r/min离心5min，取上清液测定。ANF测定：采用放射免疫分析方法。取静脉血2mL，注入含7.5%EDTA-2Na 30μL和抑肽酶30μL的试管中，混匀，4℃ 3000r/min离心 10min，分离血浆，-20℃保存，测定前使样本置于室温或冷水中复融，再次4℃3000r/min离心5min，取上清液测定。NO测定：采用镉还原比色法。取静脉血1mL，放入肝素抗凝管中，测血浆中NO稳定代谢产物亚硝酸/硝酸根离子（NO2ˉ/NO3ˉ）。

2 结 果

2.1 益肺康心胶囊对肺心病大鼠ET及ANF水平的影响 表1。模型组与空白组比较，ET与ANF水平均显著升高（P＜0.01），治疗组、对照组与模型组比较ET与ANF水平明显下降（P＜0.05或0.01），治疗组与对照组比较无显著差异（P＞0.05）。

表1 各组大鼠ET及ANF水平比较 (ng/L，±s）

表1 各组大鼠ET及ANF水平比较 (ng/L，±s）

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。 下同。

组别n ANF空白组 435.28±23.83**模型组 658.43±49.88治疗组 560.41±42.17*对照组 536.29±56.66**10 10 10 10 ET 125.84±11.31**315.2±15.22 214.96±20.03*224.75±26.54**

2.2 益肺康心胶囊对大鼠NO的影响 见表2。模型组与空白组比较，NO显著下降（P＜0.01），治疗组与模型组比较，NO显著上升（P＜0.05），对照组与模型组比较 NO 显著上升（P＜0.01），治疗组与对照组比较无显著差异（P＞0.05）。

表2 益肺康心胶囊对肺心病大鼠NO的影响 (±s）

表2 益肺康心胶囊对肺心病大鼠NO的影响 (±s）

n组别空白组模型组治疗组对照组10 10 10 10 NO 41.61±7.09**34.18±5.33 49.87±7.45*55.32±12.91**

3 讨 论

ET是血管内皮细胞合成与释放的缩血管活性多肽，其缩血管作用强烈而持久，主要通过自分泌及旁分泌机制发挥作用[1]。缺氧、酸中毒、肺部感染均可导致血ET在肺循环过程中的恶劣机制减弱，从而导致血ET含量的增加。NO作为内皮衍生舒张因子是一种近年来发现的重要信使分子，具有多种生理功能，包括血管调节、舒张支气管、神经介质、机体防御等作用。生理情况下，二者在维持血管舒缩平衡、抗血小板聚集，及防止血管内凝血方面有重要的作用。DinhAT等[2]研究发现原发或继发性肺动脉高压时肺动脉内皮细胞NO合成酶表达减少而使NO量下降，从而导致肺动脉高压形成。说明缺氧时内皮功能紊乱，NO释放减少是造成肺动脉高压和肺心病形成的重要原因。ANF升高可降低肺血容量和肺动脉高压。因此，血浆ANF水平可反映肺动脉高压的进展。经强心、利尿、扩血管治疗后，随着症状和心功能的改善，ANF水平明显降低；而在治疗不当，病情恶化时ANF水平又进行性升高。因此，循环ANF水平是反映血流动力学异常和心力衰竭严重程度、观察疗效、随访病情的可靠指标[3]。

益肺康心胶囊是笔者多年使用治疗肺心病的有效验方，有补养心肺，化痰降气，化瘀宣肺的功效。本实验提示，益肺康心胶囊具有与卡托普利类似的作用，可能是其改善心功能、防治肺心病的作用机制之一。

[1]Dzau VJ.Autocrine and paracrinemechanisms in the pathophysiology ofheart failure[J].Am JCardiol，1992，70（10）：4-11.

[2]A Tuan Dinh， Xuan MD，TimothyW，et al.Impairment of endothelium-dependent pulmonary artery relaxation in chronic obstructive lung disease[J].NEngl JMed，1991，324（22）：1539-1547.

[3]芪蛭胶囊对肺心病心衰大鼠血浆内皮素、一氧化氮和血浆心钠素的影响[J].中医药信息，2004，21（5）：37