HPLC法测定盐酸氯丙嗪片的含量

陈玉璞

河南省焦作市食品药品检验所，河南焦作 454000

盐酸氯丙嗪片为吩噻嗪类抗精神病药物，主要用于治疗兴奋躁动、幻觉妄想、思维障碍及行为紊乱等阳性症状[1]。 盐酸氯丙嗪片已经用于临床多年。盐酸氯丙嗪含量测定方法为中国药典2010年版二部的紫外分光光度法，该方法在检测过程中会受到辅料的影响，杂质对测定也有不同程度的干扰[2]。笔者采用高效液相色谱法测定其中的含量，方法简便，结果更接近真实含量，重现性好，可作为盐酸氯丙嗪片质量控制指标。

1 仪器与试药

UVIKONXL型紫外分光光度计（法国），CPA225D型双量程电子天平，Agilent Technologies 1200型高效液相色谱仪（LC-10ADVP泵；SPD-10AVP紫外检测器；CS-Light Potrun Analysis数据处理系统）；盐酸氯丙嗪原料（常州康普药业有限公司，含量99.6%）；盐酸氯丙嗪片（上海信谊九福药业有限公司，H31021537）；水为纯净水，乙腈为液相色谱专用，三氟醋酸为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱 CHROM-Matrix C8柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：乙腈-0.5%三氟醋酸（用四甲基乙二胺调节pH值至5.3） （50︰50）；流速：1.00 mL/min；检测波长254 nm；灵敏度：0.01AVFS；柱温：30℃ ；进样量：20μL。

2.2 系统适用性试验

利用上述2.1色谱条件，取空白溶剂即流动相20μL注入液相色谱仪，记录色谱图。另取用盐酸氯丙嗪原料制成的对照品溶液（见2.3.1）及供试品溶液（见2.3.2），分别进样20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，从色谱图上看出，在该色谱条件下，盐酸氯丙嗪的保留时间约为4.1 min，理论塔板数为9000以上。见图1。

图1 HPLC图谱

2.3 溶液的制备

2.3.1 对照品溶液 避光操作。取盐酸氯丙嗪原料适量，精密称取10.28 mg，置25 mL量瓶中，用流动相超声溶解并稀释至刻度，摇匀。精取5 mL，置25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液，浓度为82.24μg/mL。精密量取储备液10 mL，置25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液，浓度为32.90μg/mL。

2.3.2 供试品溶液 避光操作。取样品10片，除去包衣后，精密称取细粉适量（约相当于盐酸氯丙嗪10 mg），置100 mL量瓶中，用流动相超声溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品储备液。取续滤液5.0 mL，置100 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.4 线性关系的考察

精密量取2.3.1项下的对照品储备液，用流动相准确稀释成盐酸氯丙嗪的浓度为 3.29、9.87、16.45、23.03、32.90、49.35μg/mL。分别准确进样20μL，按2.1色谱条件测定其峰面积，以对照品进样量（μg）为横坐标，以峰面积为纵坐标，进行线性回归，得盐酸氯丙嗪的回归方程：Y=172353X+10114，r=0.9996。结果表明，盐酸氯丙嗪在浓度3.29～49.35μg/mL，范围内线性关系良好。

表1 盐酸氯丙嗪片中盐酸氯丙嗪加样回收率（n=6）

2.5 精密度试验

按2.3.1项下的操作，配制对照品溶液。按照2.1的色谱条件，重复进样6次，记录峰面积，结果盐酸氯丙嗪的峰面积的RSD=0.71%，表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性试验

取2.3.2项下方法制备的供试品溶液，在室温下放置后，按照 2.1 的色谱条件，分别在 0、4、8、12、16、20、24 h，取该溶液20μL注入液相色谱仪，测定峰面积，结果盐酸氯丙嗪峰面积的RSD=0.33%。表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.7 重复性试验

取批号100702的样品，按照2.3.2项下的操作，平行制备6份供试品溶液，照2.1的色谱条件，分别进行6次进样，每次20μL，测定峰面积，结果盐酸氯丙嗪含量的RSD=0.81%。表明重现性较好。

2.8 加样回收率试验

取批号100702的样品6份，分别取约0.05 g，精密称定，分置100 mL量瓶中，分别加入对照品溶液10.0 mL，用流动相超声溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，按色谱条件2.1测定，结果见表1。

2.9 样品中盐酸氯丙嗪的含量测定

取3批样品各10片，除去包衣后，精密称定，按拟订的方法制备供试溶液与对照品溶液。分别准确进样20μL，按上述色谱条件，以峰面积计算，结果见表2。

表2 样品中盐酸氯丙嗪的含量测定结果

3 讨论

取2.3.1项下的对照品溶液，用UVIKONXL型紫外分光光度计，以流动相为空白，在200～400 nm波长范围内扫描，在254 nm波长处有最大吸收，故选用254 nm作为盐酸氯丙嗪的试验检测波长[3]。

试验流动相的不同比例，最终选择流动相为乙腈-0.5%三氟醋酸（用四甲基乙二胺调节pH值至5.3）（50︰50），此时出峰时间适宜，峰形满意程度高。

[1] 国家药典委员会.中国药典（二部）[S].北京：化学工业出版社，2005:29-31.

[2] 国家药典委员会.中国药典（二部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010:784-785.

[3] 赵素珍,宋卫云.高效液相色谱法测定清热止泻合剂中葛根素的含量[J].中国医药导报,2007,4（30）:87-88.