铁富萍,李德寿
(青海省海晏县畜牧兽医站,青海海晏812200)
随着近几年青海省海晏县畜牧业的迅速发展,牦牛的一些传染病在县境内时有发生,特别是出现以怀孕母牛流产、死胎、公牛睾丸肿大等侵害生殖系统为特征的一类病最为严重,给广大牧民群众造成了较大的经济损失。为了摸清青海省海晏县牦牛群中流产原因是否与布鲁杆菌病、衣原体病、弓形虫病、新孢子虫病、隐孢子虫病有关以及这5种病在海晏县境内的感染状况,我们于2009年6~9月对海晏县内牦牛群进行了血清学检测,现将结果报告如下。
1.1 被检血清:被检血清均采自青海省海晏县自然放牧的牦牛群中,采血时均空腹、颈静脉采集,采集后摆成斜面,置4℃冰箱5 h后,放在室温待血清析出后收集血清,-20℃冷冻保存待检。
1.2 诊断试剂
1.2.1 布鲁菌的抗原(生产批号:200802)、阳性血清(生产批号:2008)、阴性血清(生产批号:2008),中国兽医药品监督所生产。
1.2.2 衣原体IHA抗原、阳性血清、阴性血清、稀释液,均购自中国农业科学院兰州兽医研究所,批号分别是:090323、090323、090323 和 090323(090218)。
1.2.3 弓形虫IHA抗原、阴性血清、阳性血清、稀释液,均由中国农业科学院兰州兽医研究所生产,批号分 别是:20090512 、20090421、20090412和20090409。弓形虫的ELISA诊断抗原P30由日本国家原生动物疾病研究控制中心提供,青海省畜牧科学院兽医所生物技术研究室保存。
1.2.4 新孢子虫的GST-NcSAG1t蛋白在以前的研究中进行了克隆、表达和纯化;阴、阳性标准血清,均为日本国家原虫中心玄学南博士惠赠,青海省畜牧科学院兽医所生物技术研究室保存。
1.2.5 隐孢子虫的重组蛋白P23在以前的研究中进行了克隆、表达和纯化;阴、阳性标准血清,均为日本国家原虫中心玄学南博士惠赠,青海省畜牧科学院兽医所生物技术研究室保存。
1.3 操作与判定
1.3.1 布鲁菌试管凝集反应按照部颁规程[1-2]进行操作及判定。
1.3.2 衣原体、弓形虫间接血凝试验(IHA)均按诊断液使用说明书进行,待检血清效价达到或超过1∶16和1∶64判为阳性。
1.3.3 弓形虫、新孢子虫、隐孢子虫的ELISA的判定标准均为两孔待检样品的平均值等于或大于0.1为阳性,低于0.1为阴性。
表1 青海省海晏县牦牛布鲁菌、衣原体、弓形虫、新孢子虫、隐孢子虫抗体检测结果
2.1 布鲁菌用试管凝集反应(SAT)检测了177份牦牛血清,检出阳性血清9份,阳性率为5.08%。
2.2 衣原体采用间接血凝试验(IHA)检测了321份牛血清,检出19份阳性,阳性率为5.9%。其中200份生产母牛血清中检出19份阳性,阳性率为9.5%,121份种公牛血清中没检出阳性。
2.3 弓形虫的检测结果
2.3.1 弓形虫采用间接血凝试验(IHA)共检测牦牛血清170份,阳性血清12份,阳性率为7.06%。2.3.2 弓形虫采用重组蛋白P30作为ELISA诊断抗原共检测牦牛血清135份,检出阳性血清5份,阳性率为3.7%。
2.4 用犬新孢子虫的重组蛋白GST-NcSAGlt作为ELISA诊断抗原检测的135份被检牦牛血清中,共检出N.caninum抗体阳性血清5份,阳性率为3.7%。
2.5 用隐孢子虫的重组蛋白P23作为ELISA诊断抗原检测的135份血清,检出隐孢子虫抗体阳性血清1份,阳性率为0.74%。
3.1 血清学检测结果表明,青海省海晏县牦牛群中布鲁菌、衣原体、原虫的平均感染率为4.75%,布鲁菌、衣原体、弓形虫、新孢子虫的感染率都比较高,隐孢子虫的感染率较低,这说明青海省海晏县牦牛群中布鲁菌、衣原体、弓形虫、新孢子虫、隐孢子虫都有感染,要引起有关部门的足够重视。
3.2 青海省海晏县的布鲁菌病虽然已达到稳定控制区标准[3],但此次检测仍然检出一些阳性血清,表明海晏县的布鲁菌病的感染呈上升趋势,今后我们要进一步加强对布鲁菌病的检测力度,认真做好牦牛的布鲁菌病的防治工作。
3.3 虽然布鲁菌病曾经是引起牲畜流产的主要原因,但通过本次的检测结果可以说明引起青海省海晏县牦牛流产的原因不仅仅是布鲁菌,而且还与衣原体、弓形虫、新孢子虫、隐孢子虫的感染有一定关系。因为据资料记载,衣原体、弓形虫、新孢子虫、隐孢子虫都能引起怀孕母牛的流产[4-11]。
3.4 严格执行兽医卫生制度,认真做好动物卫生检疫工作,加强对布鲁菌、衣原体、弓形虫、新孢子虫、隐孢子虫的检疫,定期对全县的牦牛群进行以上几种病的血清学检测,检出阳性及时淘汰,死于或疑似死于以上几种病的尸体应烧毁或深埋。
3.5 对广大牧民群众加强有关这5种病的流行、传播方式的科普宣传和卫生宣传教育,搞好环境卫生、饮食卫生、个人卫生、遵守卫生防护制度,净化畜群,从而减少这5种病对人畜健康的危害和威胁。
3.6 海晏县是交通运输的重要通道,交通比较便利,因此我们要严把检疫关,防止和杜绝疫病从外地进入本县境内,为海晏县的畜牧业发展提供有力的保障。
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[2]SN/T1090-2002.布鲁菌病试管凝集试验操作规程[S].
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