高效液相色谱法测定琥珀安神丸中五味子醇甲含量

吴宏岩，孙长仁，孙 坤

(吉林省白山市药品检验所，吉林 白山 134300)

琥珀安神丸是由地黄、当归、五味子、柏子仁等18味药材组方，具有育阴养血、补心安神功效，用于心血不足、怔仲健志、心悸失眠、虚烦不安[1]。部颁标准中没有含量测定方法，为更有效地控制该制剂的质量[2]，笔者采用高效液相色谱法(HPLC)法测定琥珀安神丸的五味子醇甲的含量，现报道如下。

1 仪器与试药

安捷伦1200型效液相色谱仪。五味子醇甲对照品(中国药品生物制品检定所，批号为171242－200404，供含量测定用);琥珀安神丸(吉林吉特药业有限公司);甲醇(色谱纯)，水(纯化水)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:kromasil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇 － 水(65 ∶35);流速:0.8 mL/min;柱温:室温;检测波长:250 nm;进样量:对照品溶液10 μL，供试品溶液20 μL。在此色谱条件下，理论板数按五味子醇甲峰计不低于3 000，五味子醇甲与杂质峰的分离度大于1.5，峰形良好，阴性对照品溶液无干扰(图1)。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

精密称取五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1 mL含10 μg的对照品溶液。取样品10丸，剪成长约5 mm的碎条，取5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定质量，超声处理40 min，放冷，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过;精密量取续滤液2 mL，置中性氧化铝柱(100 ～200 目，1.5 g，内径 1 cm)上，用 50%甲醇洗脱，收集洗脱液约9 mL，置10 mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。按处方比例及工艺自制不含五味子阴性样品，按供试品溶液制备方法制得阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察:精密吸取对照品溶液(23.54 μg/mL)2，4，6，8，10 μL，依法测定，以进样量为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，回归方程 Y=2 580 869 X －560.3，r=1.000 0(n=5)。结果表明五味子醇甲进样量线性范围是 0.047 08 ～ 0.235 4 μg。

精密度试验:取同一对照品溶液，连续进样6次，依法测定。结果峰面积的 RSD为1.06%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:取供试品溶液，于 1，5，10，15，20 h 后测定。结果峰面积的 RSD为1.23%(n=5)，表明供试品溶液20 h内稳定。

重复性试验:取同一批(批号20060201)样品，依法制备供试品溶液并测定。结果的 RSD为1.52%(n=5)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:精密称取已知含量的样品6份，分别精密加入对照品溶液适量，依法测定含量并计算回收率。结果见表1。

表1 五味子醇甲加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

依法测定 3批样品，结果批号为 20050803，20060201，20060401 样品中五味子醇甲含量分别为 1.08，1.02，1.24 mg/丸。

3 讨论

比较了甲醇超声后使用中性氧化铝柱的含量测定效果，结果含量稳定，色谱图中杂质峰较少，且在五味子醇甲峰附近无杂质峰干扰。该方法精密度、重现性好，可以有效地控制产品质量。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:44.

[2]WS3－B－2621－97，卫生部药品标准·中药成方制剂(第十三册)[S].