免疫组化在肺小细胞癌支气管镜活检标本鉴别诊断中的应用

牛春波,贾飞勇,辛 华,王雪梅,王丽萍*

(1.吉林大学中日联谊医院,吉林长春130033;2.吉林大学第一医院 儿内科)

本研究旨在分析肺小细胞癌(SCLC)与鳞状细胞癌(SCC)相关蛋白表达特点,探讨免疫组化方法在两者鉴别诊断中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 选择吉林大学中日联谊2009年1月-2010年8月支气管镜活检标本,均为10%中性福尔马林液固定,常规石蜡包埋,HE染色制片。显微镜观察支气管镜活检标本的病理形态,首先筛选诊断小细胞癌和鳞状细胞癌共60例,观察两种类型肺癌的病理形态特点;并选择病理形态不能确切分型而疑似两种类型的标本29例,其中男17例,女12例,年龄42-65岁,并进一步检测实验组癌组织CD56、PAX-5、TTF1、CgA、Syn、CK5/6及 P63蛋白表达。

1.2 方法

1.2.1 形态学分型判断 观察HE染色切片病理形态特征,做出初步形态学分型鉴别。

1.2.2 蛋白表达检测及结果判定 应用免疫组化SP法检测29例支气管镜活检标本各相关蛋白表达 ,CD56、PAX-5、TTF1、CgA、Syn、CK5/6 及 P63 均为即用型抗体,购自福州迈新生物技术开发有限公司,按试剂盒说明书步骤进行染色。用PBS代替一抗作阴性对照,用已知阳性组织作为阳性对照。CD56和CK5/6为细胞膜阳性,PAX-5、TTF1及P63为细胞核阳性,CgA和Syn为细胞浆阳性。

1.3 统计学分析 采用SPSS10.0软件进行进行统计分析,组间比较用 χ2检验。

2 结果

2.1 肺小细胞癌的病理形态特征 小细胞癌细胞体积小,约是静止淋巴细胞的2-3倍,组织处理好时观察细胞略偏大。细胞呈圆形或椭圆形,胞质少,染色质呈细颗粒状,核仁不明显或缺乏核仁,核分裂易见。细胞排列呈梁状、缎带状、巢状等,可见菊形团形成。低分化鳞癌细胞核略大,短梭形或椭圆形,核染色质较粗糙,核仁明显,胞浆丰富,细胞界限清楚,常可见间桥,癌细胞巢周围可有基底细胞样排列。部分病例两种类型肺癌存在形态上的重叠。

2.2 肺小细胞癌与非角化鳞状细胞癌的免疫表型

见表1,2。

表1 实验组肺癌的相关蛋白表达(n=29)

表2 肺小细胞癌与非角化鳞状细胞癌的免疫表型对比(n=29)

3 讨论

本研究检测肺小细胞癌支气管镜活检标本CD56阳性率较高(20/21例),其在小细胞癌的表达远远高于其它神经内分泌标记,是肺细胞癌最稳定表达的蛋白标记[1-5]。PAX-5是一种B细胞特异性激活蛋白(BSAP),是一种新的B细胞标记,用于B细胞淋巴瘤的病理诊断。最近有报道PAX-5在神经内分泌肿瘤中有不同程度的表达[6],小细胞癌和Merkel细胞癌阳性表达,而在类癌表达阴性,被用于分化差的神经内分泌癌的鉴别诊断,并可作为CD56和其它神经内分泌标记阴性时的补充诊断标记。本研究检测肺小细胞癌支气管镜活检标本,PAX-5阳性率也很高(13/21例),且一例CD56阴性小细胞癌标本PAX-5阳性,可作为其与低分化鳞状细胞癌鉴别诊断的标记。甲状腺转录因子(TTF-1)是在正常甲状腺和肺上皮细胞表达的一种转录调节因子,在肺和甲状腺的组织发生和细胞分化过程中起重要的调节作用。文献报道在TTF-1在肺小细胞癌表达阳性率达80%-100%,而在鳞状细胞癌阳性率小于10%。本研究结果显示肺小细胞癌支气管镜活检标本,TTF-1阳性率也很高(20/21例),而低分化鳞状细胞癌只有少数病例表达(1/8),表明TTF-1结合其他蛋白标记指标,可作为其与低分化鳞状细胞癌鉴别诊断的标记。P63和CK5/6是肺鳞状细胞癌的诊断标记物[7]。P63同P53一样属于肿瘤抑制基因家族成员,广泛表达于多种器官来源的具有鳞状上皮分化潜能的基底细胞和储备细胞,很少表达于肺小细胞癌和肺腺癌。CK5/6是上皮细胞标志物,其在近60%的鳞状细胞癌阳性表达,在小细胞癌很少表达。本研究结果显示肺小细胞癌支气管镜活检标本,P63和CK5/6的阳性率很低(2/21及1/21例),而低分化鳞状细胞癌标本大多阳性表达(均7/8例),表明两者可作为小细胞癌与低分化鳞状细胞癌鉴别诊断的标记。

联合检测多种蛋白表达能够准确鉴别肺小细胞癌和低分化鳞状细胞癌,免疫组化方法在两种类型肺癌的病理鉴别诊断中具有重要的应用价值。

[1]戚良晨,高 楠,韩振国,等.肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值[J].中国实验诊断学,2006,10(6):774.

[2]林冬梅.肺小细胞癌的病理研究进展[J].中国医刊,2008,43(2):21.

[3]Salcido CD,Larochelle A,Taylor BJ,et al.Molecular characterisation of side population cells with cancer stem cell-like characteristics in smallcell lung cancer[J].Br J Cancer,2010,102(11):1636.

[4]Bakker MA,Willemsen S,Gr ünberg K,et al.Small cell carcinoma of the lung and large cell neuroendocrine carcinoma interobserver variability.Histopathology[J].2010,56(3):356.

[5]Kontogianni K,Nicholson AG,Butcher D,et al.CD56:a useful tool forthe diagnosis of small cell lung carcinomas on biopsies with extensive crush artefact[J].J Clin Pathol,2005,58(9):978.

[6]Mhawech-Fauceglia P,Saxena R,Zhang S,et al.Pax-5 immunoexpression in various types of benign and malignant tumours:a high-throughput tissue microarray analysis[J].J Clin Pathol,2007,60(6):709.

[7]Kargi A,Gurel D,Tuna B.The diagnostic value of TTF-1,CK 5/6,and p63 immunostaining in classification of lung carcinomas[J].Appl ImmunohistochemMol Morphol,2007,15(4):415.