韩广卿 曾超 (新疆巴音郭楞职业技术学院生物工程系 库尔勒 841000)
母鸡感染多杀性巴氏杆菌病的诊治
韩广卿 曾超 (新疆巴音郭楞职业技术学院生物工程系 库尔勒 841000)
多杀性巴氏杆菌病是鸡常见疾病之一,属条件性致病菌,平时应做好鸡的饲养管理,特别是防疫工作,以减少本病的发生。一但发病,应及时诊治,阻止疫情发展。
多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是巴氏杆菌科巴氏杆菌属的一个菌种。它可以引起多种畜禽发病,主要是动物发生出血性败血病或传染性肺炎。感染鸡的多杀性巴氏杆菌的血清型主要有5:A和8:A,鸡感染后叫禽霍乱。多杀性巴氏杆菌是两端钝圆,中央微凸的短杆菌,革兰氏染色阴性,主要存在于病畜全身各组织、体液、分泌物及排泄物里。健康动物的上呼吸道、上消化道也可带菌。本菌抵抗力不强,在干燥的空气中2~3d死亡,60℃20min或75℃5~10min可被杀死,普通消毒药常用浓度对它也有很好的消毒作用,如10%石灰乳、2%来苏儿、3%福尔马林、1%氢氧化钠等,数分钟可使本菌失去活力。本菌易自溶,在无菌蒸馏水和生理盐水中迅速死亡。
2009年1月,当地长城村一个体养鸡户的鸡发病死亡。笔者对病鸡进行诊断,并采取有效的防治措施。
2009年1月,长城村某养鸡户饲养的500只产蛋鸡,先是个别鸡发病,并出现死亡,随后病情扩大。笔者到鸡场观察并带回2只死鸡进行诊断,结合临床症状、病理变化和实验室检查,诊断为多杀性巴氏杆菌病。
本菌引起鸡发病一般认为是鸡在发病前已经带菌,当饲养环境卫生条件差、遇上气候剧变、寒冷、拥挤闷热、营养缺乏、长途运输等情况时,机体抵抗力降低,病菌可乘机侵入体内,发生内源性传染。而后,病鸡不断排出有毒力的病菌,污染环境,经消化道及呼吸道传染给健康鸡。鸡发病一般没明显季节性。鸡发病常表现出三种类型:最急性型,病鸡常无前驱症状,有时见病鸡精神沉郁,倒地挣扎。剖解一般无特殊病变,病鸡常常几分钟至数小时死亡。急性型,病鸡体温升高到43~44℃,全身症状明显。食欲减退或废绝,饮欲增加。鸡冠和肉髯青紫色,敏感。呼吸困难,口、鼻流出分沁物。常排出黄色稀粪。剖解可见腹膜、皮下组织及腹部脂肪常见出血点。肺有充血和出血点,肌胃出血,肠内容物混有血液。心包变厚,心包内有不透明淡黄色液体,心外膜,心冠脂肪出血更明显。肝稍肿,质变脆,呈棕色或黄棕色,肝表面上有小的灰白色坏死点。多数病鸡一般在0.5~3d内死亡,极小数可康复。慢性型,以慢性肺炎,慢性呼吸道炎和慢性胃肠炎较常见。有的病鸡局部关节肿大变形,有炎性渗出物和干酪样坏死,疼痛,脚趾麻痹,跛行。有些发病公鸡一侧或两侧肉髯显著肿大,内有干酪样的渗出物。有些发病母鸡的卵巢明显出血,有时在卵巢周围有一种坚实、黄色的干酪样物质,附着在内脏器官的表面上。慢性型病程可持续数月甚至更长。
病死鸡全身皮下及浆膜下有出血点。心冠脂肪、心内外膜上有出血点,心包内有不透明淡黄色液体。肺有充血和出血点。肝肿大,肝表面上有灰白色粟粒样坏死点。肌胃出血,十二指肠及空肠表面有弥漫性出血,盲肠及扁桃体出血严重。
4.1 形态观察 取病鸡血液涂片,待自然干燥后,作瑞特氏染色。滴加瑞氏染色液固定标本,3min后,再滴加与染色液等量的中性蒸馏水于玻片上,轻轻摇晃使与染色液混合均匀,5min后水洗,干后镜检可见许多短杆菌,两端钝圆,两极明显着色。采取组织病料(肺脏和心脏)切碎,加生理盐水制成悬浮液,作细菌分离培养,在血清血液培养基上37℃培养48h。挑取菌落置于载玻片上,加生理盐水铺开,自然干燥后,作革兰氏染色。先用草酸胺结晶紫染色液染色2min,水洗,再用革兰氏碘液染色2min,水洗,用95%已醇脱色30s,水洗,用沙黄溶液染色30s后水洗,用滤纸吸干镜检。可见短杆状,两端钝圆的G-菌。
4.2 培养 在血清琼脂上培养24h,可见淡灰白色边缘整齐、表面光滑并闪光的露珠样菌落。在血琼脂上培养24h,可见湿润的水滴样无溶血小菌落。在血清肉汤中培养,开始出现浑浊,4d后渐变清朗,在管底生成沉淀物,表面形成菌环。
4.3 生化反应 经增菌培养后生成的菌落,将此菌接种在三糖铁培养基上,底部变黄。挑取部分菌落分别置于葡萄糖、单奶糖、蔗糖、果糖、甘露糖培养基上,结果葡萄糖、单奶糖、蔗糖、果糖、甘露糖均为(+)。取菌接种于2支含0.5%葡萄糖蛋白胨水培养基中,置37℃经4d后,一支加入甲基红试剂(甲基红0.1g溶于95%酒精300ml中)6滴,溶液呈黄色。另一支先加维—培甲液(6%α—甲萘酚酒精溶液)3ml,再加入维—培乙液(40%氢氧化钾水溶液)1ml,混合后静置4h,溶液仍末变色。将菌接种于蛋白胨水培养基中,37℃培养3d后加入二甲苯3ml,摇匀,静置片刻,沿试管壁加入靛基质试剂2ml,呈红色。
4.4 动物试验 将分离培养后的菌对小鼠进行皮下注射,结果36h后被接种的小鼠死亡。死后剖解,浆膜下和皮下出血,胸腔和腹腔器官充血出血。涂片后瑞特氏染色,可见两端钝圆,呈两极明显着色的短杆状菌,最终确定为多杀性巴氏杆菌。
5.1 紧急预防 同场其他健康或亚健康鸡采用禽霍乱高免血清进行紧急预防注射,同时添加喹乙醇0.01~0.02g/kg饲料,连喂7d。
5.2 病鸡治疗 发现可疑病例及时隔离诊治。对确诊病鸡采用下列药物治疗:(1)禽霍乱高免血清2ml ,肌肉注射。1次/d,连用2~3d。(2)土霉素50mg/kg体重,口服,2次/d,连用7d。(3)灭败灵2ml/kg体重,肌肉注射,1次/d,连用2d。
5.3 治疗结果 87%的病鸡痊愈,3d后控制了疫情的发展,10d后鸡场无一例病鸡,鸡群基本恢复正常。
5.4 疫苗免疫 最后一例病鸡痊愈后1周,注射新城疫—禽霍乱二联疫苗。
(1)平时要按免疫程序做好鸡的免疫工作。(2)加强饲养管理,避免拥挤和受寒,建立严格的消毒制度,鸡舍定期消毒,严格饲料配方,提高营养标准,减少应激,增强鸡的抵抗力。(3)禽霍乱与鸡新城疫在临床症状和病理变化上有很多相似之处,应注意区分,以免误诊。(4)对病死鸡进行深埋,粪便进行无害化处理,以减少疾病扩散。(5)实行鸡场封闭式管理,采用全进全出的科学饲养方法。严禁参观和饲养人员外出,杜绝疾病传播。(6)在某些疫病的多发期和敏感阶段,鸡场可以进行一段时间预防性投药。投药要讲究时效性、准确性、合理性和安全性。
(2011–03–01)
S858.31
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1007-1733(2011)04-0037-02