养血清脑颗粒后给药对大脑中动脉缺血再灌注引起的大鼠血脑屏障损伤的改善作用

黄 娉 刘育英 胡白和 常 昕 赵新荣 胡 琴 王 芳

卫小红1 徐想顺1 李 泉1 王传社1，3 周长满2 韩晶岩1，3

1北京大学医学部天士力微循环研究中心，北京 100191；2北京大学医学部基础医学院解剖教研室；3北京大学医学部基础医学院中西医结合教研室

养血清脑颗粒后给药对大脑中动脉缺血再灌注引起的大鼠血脑屏障损伤的改善作用

黄 娉1刘育英1胡白和1常 昕1赵新荣1胡 琴2王 芳1

卫小红1徐想顺1李 泉1王传社1，3周长满2韩晶岩1，3

1北京大学医学部天士力微循环研究中心，北京 100191；2北京大学医学部基础医学院解剖教研室；3北京大学医学部基础医学院中西医结合教研室

目的：探讨养血清脑颗粒后给药对大鼠大脑中动脉缺血再灌注引起的血脑屏障损伤的改善作用。方法：SD雄性大鼠（270～300g）随机分成假手术组、缺血再灌注3h组、缺血再灌注6天组、缺血再灌注6天＋0.4g／kg养血清脑颗粒后给药组和缺血再灌注6天＋0.8g／kg养血清脑颗粒后给药组。假手术组不栓塞右侧大脑中动脉，其余各组用线栓法栓塞右侧大脑中动脉1h后进行再灌注。在再灌注3h后，第1次灌胃给药，以后每隔24h给药一次，连续给药6次。第6次给药90min后进行麻醉，在大鼠右侧顶骨上开一颅窗（4mm×6mm），用连接于高速摄影机和荧光摄像机的正立显微镜观察软脑膜细静脉中的红细胞流速、白细胞黏附数和FITC标记的血浆白蛋白漏出情况，用激光多普勒血流仪测定脑表面血流量。另取大鼠，第6次给药90min后用磁共振成像和TTC染色法观察脑梗死面积，用TUNEL染色观察脑皮层TUNEL阳性细胞，用电镜观察脑微血管的超微结构，检测脑内Evan's Blue含量及脑组织干、湿重比值来反应血脑屏障损伤情况，用Western Blotting半定量分析血管内皮紧密连接蛋白Claudin-5、Occludin、JAM、ZO-1及质膜微囊标志性蛋白Caveolin-1的表达情况。结果：与假手术组相比，缺血再灌注3h组脑内Evan's Blue含量及脑组织干、湿重比值增加，软脑膜细静脉中血浆白蛋白渗出增多，脑血流量降低。大脑中动脉灌流区出现梗死，TUNEL阳性细胞增多，血管外周水肿，血管内皮间连接缝隙增大。在未行药物干预的情况下，再灌注第6天，以上情况没有明显改善。0.4g／kg和0.8g／kg养血清脑颗粒后给药可以改善缺血再灌注引起的血脑屏障和脑微循环的损伤，缩小脑梗死面积，降低TUNEL阳性细胞数，抑制血管内皮间紧密连接蛋白Claudin-5和Occludin的降解。结论：养血清脑颗粒后给药对大鼠大脑中动脉缺血再灌注引起的大鼠血脑屏障的损伤有改善作用，该作用与其抑制血管内皮间紧密连接蛋白Claudin-5和Occludin的降解相关。