倪青松,王 斌,李旭廷,龚 雪,谢良华
(1.四川省畜牧科学研究院兽药研究所,四川 成都 610066;2.四川鼎尖动物药业有限责任公司,四川 成都 610100)
川牛膝是苋科植物川牛膝的干燥根,为川产道地药材,主产四川天全、金河口等地。其味苦、酸,性平,入肝、肾经,自古就有特殊的临床应用价值:补肝肾、强筋骨、治腰膝酸麻和肝肠眩晕、散瘀血、消痈肿等。大量药理、临床研究表明,川牛膝多糖(ABP)是一种免疫调节剂,能够促进细胞免疫和体液免疫。本研究拟通过研究川牛膝多糖对鸡血清抗体和血液生化指标的影响,来探讨其对体液免疫的影响,为川牛膝作为中草药免疫增强剂及饲料添加剂的临床应用提供理论依据。
1.1 川牛膝多糖 本实验室自制。用四川天全产的道地药材——川牛膝干燥粉碎,再回流提取,并用经典的“水提醇沉”法处理后得到精制的川牛膝总多糖。
1.2 试验动物及分组 健康三黄鸡60只,随机分为3组,每组20只,分笼饲养,基础日粮相同(基础日粮配方见表1)。Ⅰ组作为对照组,Ⅱ组和Ⅲ组从7日龄开始分别在基础日粮中按400mg/kg的比例加入川牛膝多糖添加剂,自由采食。环境温度控制在23~25℃左右。
表1 基础日粮配方
1.3 方法 试验期间记录临床症状和剖解变化,分别在饲喂后第7、14、21d和28d颈静脉采血,分离血清,检测以下指标:
1.3.1 血清抗体IgG、IgA、IgM的含量 用免疫球蛋白IgG、IgA、IgM免疫透射比浊法检验试剂盒测定(购于四川省迈克科技有限责任公司)。
1.3.2 血清白蛋白含量 用白蛋白BCG法检测试剂盒测定(购于四川省迈克科技有限责任公司)。
1.3.3 血清钙含量 用OCPC法试剂盒测定 [购于柏定生物工程(北京)有限责任公司]。
1.3.4 血清谷丙转氨酶和血清谷草转氨酶活性 用转移酶IFCC法检测试剂盒测定(购于四川省迈克科技有限责任公司)。
1.3.5 血清碱性磷酸酶活性 用速率法试剂盒测定(购于北京中生生物制品有限公司)。
1.4 统计处理 所有数据均以“x±s”表示,采用SPSS12.0统计软件进行方差分析。
2.1 血清抗体检测结果 结果见表2。由表2可知,川牛膝多糖组与对照组相比,其IgG含量差异不显著(P>0.05),但均有明显的升高趋势;IgA在21日龄和28日龄均差异显著(0.01<P≤0.05),表现为明显升高;而IgM在14日龄时表现为差异显著(0.01<P≤0.05)。
2.2 血液生化指标检测结果 结果见表3。由表3可知,川牛膝多糖组与对照组相比,其各项血液生化指标(白蛋白、钙、谷丙转氨酶、谷草转氨酶以及碱性磷酸酶)均表现为差异不显著(P>0.05)。
表2 川牛膝多糖对鸡血清抗体的影响
表3 川牛膝多糖对鸡血液生化指标的影响
3.1 分析与讨论 血清免疫球蛋白含量的变化反映了机体体液免疫系统的功能状态。血清IgM在初次应答的分泌抗体中占优势,即在早期阶段对机体的免疫调节具有重要作用。在20日龄后,因机体降解速度超过发育不成熟的免疫系统合成IgM的速率而出现IgM下降。IgM在大多数畜禽血清中的含量仅次于IgG,仅存于血液中,对组织液或外分泌液中的保护作用不及IgG。本试验结果表明,川牛膝多糖组与对照组相比,在14日龄时可显著升高血清中IgM的含量,而在21日龄后出现差异不显著,其结果与上述理论相符,说明川牛膝多糖可在早期阶段通过升高血清中IgM的含量来起到免疫调节的作用。
IgG是唯一见于雏禽血清中的母源抗体,在最初两周逐渐分解,后随着雏鸡本身合成的结果,IgG水平迅速回升。本试验结果表明,川牛膝多糖组的血清IgG含量虽然与对照组相比差异不显著,但与同日龄相比均有所提高,说明川牛膝多糖可提高血清中IgG的含量。IgA与IgG结构相似,是外分泌液的主要免疫球蛋白,在保护肠道、呼吸道、泌尿生殖道、乳腺和眼睛抵抗微生物入侵方面起十分关键的作用。本试验结果表明,川牛膝多糖可显著提高血清IgA的含量,是否预示在饲料中添加川牛膝多糖后可增强动物机体对肠道疾病、呼吸道疾病和泌尿生殖道疾病的抵抗力,还需进一步研究。
血清白蛋白主要维持机体渗透压平衡,它能很好地反映机体蛋白的吸收和代谢状况,同时与鸡的生长速度成正相关。本试验结果表明,川牛膝多糖可通过增加机体蛋白的吸收来提高鸡的生长速度,且对机体蛋白质的代谢无不良影响。血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶是机体内重要的转氨酶,在氨基酸的分解与生成代谢过程中起着十分重要的作用,同时又是反映肝脏健康状况的重要指标。本试验结果提示在临床上使用川牛膝多糖时,对鸡的肝脏无损伤或无不良影响。碱性磷酸酶是机体中催化磷酸脂水解的一组重要的酶,血清中碱性磷酸酶主要来自骨骼和肝脏,可反映动物机体骨骼与肝脏的生理机能状况。本试验结果表明,川牛膝多糖能够通过升高碱性磷酸酶来促使体内钙动用增强,从而促进骨骼生长,满足鸡快速生长的需要。
3.2 结论 川牛膝多糖能够显著提高雏鸡血清抗体IgG、IgA、IgM的含量,对体液免疫具有积极作用,且对各项血液生化指标无不良影响,可将其作为一种新型免疫增强剂应用于畜禽养殖业。
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