九味腰痛胶囊长期毒性试验研究

王桂敏，成 源

(1.陕西省西安市未央区中医医院，陕西 西安 710016; 2.北京岐黄制药有限公司，北京 101200)

九味腰痛胶囊是一种新研制的中药，具有祛风除湿、活血通络作用，临床上用于治疗腰椎间盘突出症[1]。因治疗期间患者服药时间较长，为了给临床安全应用提供充分依据，笔者连续对大鼠口服给药90 d，观察其长期毒性。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验动物与药品

Wistar大鼠(西安医科大学实验动物中心提供，合格证号为陕医实动准第03号)，鼠龄6周，体重(230±15)g，雌雄各半，饲养1周后使用。试验全过程在室温16～18℃、相对湿度50% ～70%的层流饲养室中完成。九味腰痛胶囊(含生药15.6 mg/g)由西安市未央区中医医院自制，批号为060601。

1.2 给药方法

取大鼠80只，雌雄各半，分为4组，即低剂量组、中剂量组、大剂量组，用药剂量分别为125，250，500 mg/kg(分别相当于临床常用量的5，10，20倍)，按每只动物应服用的剂量，将药物分别加入饲料中。对照组给予无药物饲料。共给药90 d。

1.3 观察方法[2－4]

每日观察各组动物的外观体征、行为活动、尿与粪便性状，记录体重、进食量以及血液学指标、血液生化、尿沉淀镜检、尿常规分析和肝功能。末次用药后，各组处死15只动物，系统尸解，观察各脏器情况;取心、肝、脾、肺、肾等脏器，称湿重，计算脏器系数;同时进行常规苏木精－伊红染色(HE)法染色，光镜下行病理组织学检查。各组留动物5只，停药21 d，恢复期指标检测均同给药期。

1.4 数据处理

2 结果

2.1 一般情况变化

同对照组动物比较，各剂量给药组试验期间均无异常表现，试验末体重也无明显异常改变(P＞0.05)，停药后各组动物均未出现异常现象。结果见表1。

表1 大鼠口服九味腰痛胶囊给药期和恢复期的体重变化(±s)

表1 大鼠口服九味腰痛胶囊给药期和恢复期的体重变化(±s)

组别 剂量(mg/kg)给药期体重(g) 恢复期体重(g)对照组大剂量组中剂量组低剂量组0 500 250 125 7 d 2.8 ± 0.7 2.8 ± 1.0 2.7 ± 1.2 2.9 ± 0.3 35 d 10.1 ± 3.3 10.9 ± 3.8 10.7 ± 3.5 10.6 ± 4.0 63 d 17.8 ± 7.3 17.7 ± 5.9 18.0 ± 5.6 17.9 ± 6.4 91 d 24.9 ± 10.7 24.5 ± 10.1 24.7 ± 9.9 24.8 ± 11.0 112 d 30.4 ± 12.6 30.8 ± 12.5 29.9 ± 12.9 30.3 ± 12.7

2.2 血液学和血液生化学变化

各组动物在给药后及停药后血液学指标和血液生化学均无异常变化(P＞0.05)，各项检查数值均在正常范围内，说明九味腰痛胶囊对血液学和血液生化学一般项目无影响。结果见表2及表3。

2.3 肝肾功能和尿液变化

测定大鼠的血中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)和血清尿素氮(BUN)含量，并进行大鼠的尿常规检查。结果各剂量组动物ALT值均在正常范围内，给药后及停药后BUN和尿液均无异常变化(P＞0.05)，说明九味腰痛胶囊对动物肝功能和肾功能无影响。结果见表4。

表2 大鼠口服九味腰痛胶囊给药期和恢复期的血常规检查(±s)

表2 大鼠口服九味腰痛胶囊给药期和恢复期的血常规检查(±s)

红细胞计数(×1012/L)组别 血红蛋白(g/L)白细胞计数(×109/L)中性细胞 (%)淋巴细胞(%)血小板计数(×109/L)对照组大剂量组中剂量组低剂量组给药期6.46 ± 0.66 6.41 ± 0.66 6.48 ± 0.53 6.43 ± 0.30恢复期6.47 ± 0.37 6.44 ± 0.64 6.43 ± 0.68 6.50 ± 0.73给药期102.4 ± 8.2 104.4 ± 6.2 103.4 ± 7.3 104.4 ± 7.2恢复期101.6 ± 6.8 107.2 ± 7.5 103.0 ± 10.2 104.2 ± 7.3给药期8.49 ± 4.98 8.47 ± 2.94 8.38 ± 1.88 8.39 ± 3.53恢复期8.13 ± 2.56 8.38 ± 2.51 8.27 ± 2.92 8.18 ± 2.88给药期16.0 ± 2.3 16.0 ± 2.2 16.6 ± 1.3 16.3 ± 1.7恢复期16.5 ± 2.5 16.5 ± 2.6 16.4 ± 2.6 16.5 ± 3.2给药期84.0 ± 2.3 84.0 ± 2.2 83.4 ± 1.3 83.7 ± 1.7恢复期83.5 ± 2.5 83.5 ± 2.6 83.6 ± 2.6 83.5 ± 3.2给药期157±32 158±22 158±27 159±24恢复期160±30 158±30 157±26 158±25

表3 大鼠口服九味腰痛胶囊给药期和恢复期的血液生化检查(±s)

表3 大鼠口服九味腰痛胶囊给药期和恢复期的血液生化检查(±s)

碱性磷酸酶(U) 总胆红素(μmol/L) 总蛋白 (g/L) 白蛋白(g/L) 血清肌酐(μmol/L) 血清总胆固醇 (mmol/L) 血清葡萄糖 (mmol/L)组别对照组大剂量组中剂量组低剂量组给药期163.3 ±39.4 165.1 ±57.3 164.2 ±71.1 170.5 ±45.6恢复期164.4 ± 41.2 160.8 ± 50.4 162.3 ± 48.1 160.5 ± 45.8给药期5.27 ± 2.95 5.19 ± 2.30 5.39 ± 1.20 5.14 ± 5.20恢复期5.23 ±2.55 5.20 ±2.38 5.67 ±2.43 5.51 ±2.31给药期65.73 ±4.49 65.58 ±3.39 65.25 ±3.24 66.48 ±3.01恢复期65.55 ±3.51 65.58 ±3.46 65.35 ±3.33 65.48 ±3.19给药期32.31 ±2.77 33.50 ±1.28 33.15 ±1.71 32.53 ±2.18恢复期32.35 ±2.64 33.40 ±2.28 33.15 ±2.04 33.42 ±2.23给药期44.0 ±6.3 44.3 ±6.7 44.8 ±8.2 45.5 ±8.1恢复期45.0 ±6.8 44.8 ±6.7 44.5 ±7.1 45.5 ±6.2给药期1.48 ±0.27 1.41 ±0.20 1.48 ±0.38 1.46 ±0.22恢复期1.43 ±0.30 1.48 ±0.28 1.48 ±0.34 1.49 ±0.24给药期9.41 ±0.45 9.68 ±0.84 9.46 ±2.68 9.46 ±1.17恢复期9.45 ± 0.54 9.38 ± 0.66 9.36 ± 1.32 9.36 ± 1.16

表4 大鼠口服九味腰痛胶囊给药期和恢复期的肝功能和尿常规检查(±s)

表4 大鼠口服九味腰痛胶囊给药期和恢复期的肝功能和尿常规检查(±s)

组别ALT(U/L) AST(U/L) 尿pH 尿蛋白质 尿葡萄糖 BUN(mmol/L)对照组大剂量组中剂量组低剂量组给药期57.73 ± 11.28 59.38 ± 10.28 58.31 ± 10.04 58.10 ± 11.57恢复期57.88 ±10.60 58.99 ±10.33 57.84 ±10.65 57.90 ±10.32给药期132.1 ± 31.4 110.9 ±15.2 103.4 ±27.3 131.6 ±36.1恢复期108.8 ± 18.4 110.4 ± 16.2 108.6 ± 17.6 110.5 ± 19.7给药期7.35 ± 0.26 7.30 ± 0.26 7.30 ± 0.25 7.35 ± 0.24恢复期7.25 ± 0.26 7.25 ± 0.26 7.30 ± 0.25 7.35 ± 0.25给药期10(－)10(－)10(－)10(－)恢复期10(－)10(－)10(－)10(－)给药期10(－)10(－)10(－)10(－)恢复期10(－)10(－)10(－)10(－)给药期5.88 ± 0.62 5.58 ± 0.70 6.03 ± 0.61 5.95 ± 0.62恢复期5.88 ± 0.60 5.68 ± 0.64 5.64 ± 0.62 5.90 ± 0.62

2.4 解剖和病理组织学检查

光镜下检查，各组动物未见明显病理改变，组间重要脏器系数无明显差异。

3 讨论

长期毒性研究不仅可以观察连续反复给药时，实验动物出现的毒性反应、剂量与毒性效应的关系、主要毒性靶器官、毒性反应的性质和程度、毒性反应是否可逆等，还可观察动物的耐受量、无毒性反应剂量、毒性反应剂量及安全范围，并可了解毒性产生时间、达峰时间、持续时间及可能反复产生毒性反应的时间，有无迟发性毒性反应、有无蓄积毒性或耐受性等，因此在临床前安全性评价中具有重要地位，对于新药研究和临床用药成功与否起着举足轻重的作用[5－6]。

本试验共设3个剂量组，通过大鼠口服九味腰痛胶囊90 d和停药21 d观察，各组动物的一般状况(食量、体重)良好，体重增长正常;各剂量组均未出现毒性反应。从大鼠血液学和血液生化学指标变化，肝功能、肾功能和尿液指标变化观察，给药组与空白对照组之间无显著性差异;解剖和病理组织学检查也未发现病理改变，表明给药期无明显毒性反应，恢复期未见延迟性毒性。因此可认为该药临床上应用具有较高的安全性。

[1]王桂敏，成 源.九味腰痛胶囊治疗腰椎间盘突出症47例[J].陕西中医，2002，23(3):231－232.

[2]袁伯俊，廖明阳，李 波.药物毒理学实验方法与技术[M].北京:化学工业出版社，2007:154.

[3]国家食品药品监督管理局.中药天然药物长期毒性研究技术指导原则[M].北京:中国医药科技出版社，2005:73.

[4]吕秋军.新药药理学研究方法[M].北京:化学工业出版社，2007:382－387.

[5]江 涛，周永德，葛 勤.黄马酒长期毒性试验研究[J].中国药业，2009，18(13):9－10.

[6]王书杰，王丽萍，刘晋华，等.风痛宁丸对大鼠的长期毒性试验[J].中国药师，2010，13(13):63－64.