靶向治疗后肺癌患者外周血 T淋巴细胞亚群的表达变化及意义

张金标,郑 航,尤长宣,罗荣城

(南方医科大学南方医院,广州 510515)

目前,手术、化疗、放疗等手段对肺癌的治疗效果仍不尽人意。近年来,分子靶向治疗取得了较好的疗效。肺癌的发生、发展与机体的免疫状态密切相关,而T淋巴细胞亚群是构成机体免疫系统的重要因素,但靶向治疗对患者免疫状态的影响及与疗效的关系研究较少。本研究观察腺癌患者靶向治疗前后外周血C、C、C/C以及C的表达变化,并探讨其意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2008年 10月 ～2010年8月南方医院肿瘤科收治并经病理检查证实的肺腺癌患者30例(肺癌组),男 23例,女7例;年龄 52～73岁;临床分期为 Ⅲ ～Ⅳ期;均有上皮生长因子受体(EGFR)19或EGFR 21因子突变;PS评分≤2分。所有病例为初治晚期肺癌患者并一线接受易瑞沙靶向治疗。健康志愿者 20例作对照组,男、女各 10例,年龄23～32岁。

1.2 靶向治疗方法 30例肺腺癌患者接受易瑞沙靶向治疗。采用易瑞沙标准治疗方案,即 250 mg,口服,1次/d。治疗前及治疗后 2个月进行影像学检查,并根据RECIST标准及肺癌治疗的功能性评估(FACT-L)标准来评价疗效。

1.3 外周血T细胞亚群检测 于靶向治疗前1 d清晨及靶向治疗2个月后1 d清晨取患者外周血 3ml,用淋巴细胞分离液常规分离单个核细胞,调整细胞密度为(1.5～2)×106/ml。50μl单核细胞分别加入FITC标记的C、PE标记的C和PE标记的C,避光孵育35m in,PBS洗涤3次,离心沉淀后弃上清,加入PBS 200μl重悬细胞,用流式细胞仪检测。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。用方差分析对各组数据进行方差齐性检验,均数比较用t检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组与肺癌组治疗前外周血T淋巴细胞亚群比较 见表1。

表1 对照组与肺癌组治疗前外周血T淋巴细胞亚群比较(±s)

表1 对照组与肺癌组治疗前外周血T淋巴细胞亚群比较(±s)

注：与对照组相比,＊P＜0.01,△P＜0.05

2.2 肺癌组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群比较见表2。

表2 肺癌组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群比较(±s)

表2 肺癌组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群比较(±s)

注：与治疗前相比,＊P＜0.01,△P＜0.05

2.3 疗效 肺癌组治疗后临床获益 21例,其中18例CD+4上升,17例CD+8下降,19例CD+4/CD+8上升,明显多于CD+4下降、CD+8上升、CD+4/CD+8下降者(P均＜0.05)。

3 讨论

正常人体内环境保持稳态,当肿瘤发生时会引起体内内分泌、免疫系统的变化[1,2]。NK细胞和 T淋巴细胞是机体抗恶性肿瘤的主要功能细胞。C和CD+8在局部抗肿瘤免疫中处于机体免疫系统与肿瘤相互作用的最前沿,其组成和功能等在一定程度上反映了机体抗肿瘤反应的性质、强度和总体水平[3]。

CD+4细胞是人体抗肿瘤免疫的重要组成部分,它所产生的IL-2、IL-4、IL-5、INF-1是NK细胞、巨噬细胞、B淋巴细胞等免疫细胞活化所必需的。另外, CD+4细胞还可以通过INF-γ介导的机制直接杀伤肿瘤细胞[4,5],CD+4细胞数量的变化有可能导致整个机体抗肿瘤免疫的变化。本研究显示,肺癌患者靶向治疗前 CD+4水平低于对照组,而靶向治疗后CD+4水平较前回升。

CD+8为抑制性 T淋巴细胞,可对靶细胞介导细胞毒作用,抑制免疫反应,正常情况下与CD+4保持动态平衡,维持机体正常的免疫功能,而它的大幅度上升多意味着免疫功能受抑制。Andreas等[6]应用实时荧光PCR技术测定31例肺癌患者肿瘤组织中的CD+8,发现其是癌旁组织的2.5倍。CD+4/CD+8主要反应机体细胞免疫调节功能。本研究发现,肺癌患者外周血 CD+4/CD+8在靶向治疗前高于对照组,靶向治疗 2个月后,CD+4、CD+4/CD+8较前明显提高,而 CD+8细胞比例下降。提示靶向治疗后,肺癌患者受抑制的免疫状态得到改善,靶向药物易瑞沙可能加强了机体的免疫调节功能。

易瑞沙是一种选择性EGFR-TKI抑制剂,它可以阻断EGFR酪氨酸激酶的活性,抑制肿瘤生长、转移及血管生长,使癌细胞发生凋亡,目前已成为晚期肺癌的标准二线治疗药物或存在EGFR突变患者的一线治疗药物。肺癌靶向治疗研究证实了易瑞沙能显著延长EGFR突变患者的PFS,而在2010年的欧洲肿瘤内科学会(ESMO)年会上公布的最终的总生存(OS)结果却未显示出优势。

本研究结果表明,经易瑞沙靶向治疗后,大多数临床获益的肺癌患者外周血CD4+上升、CD8+下降、CD4+/CD8+上升,提示患者病情的进展可能与 T淋巴细胞的减少导致的肿瘤细胞的逃逸有关,病情的改善可能与T淋巴细胞增多、免疫应答增强有关。

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[6]Andreas T,Mirjana U,Reinhard D,et al.Immune activation status of CD8+T cells in filtrating non-small cell lung cancer[J].Lung Cancer,2004,44(2)：143-147.