胡 梅,柴建亭,马权辉
(1.河南农业职业学院动物科学系,河南 郑州 451450;2.河南省灵宝市畜牧局,河南 三门峡 472500)
牛传染性角膜炎俗称红眼病,是由牛摩拉氏菌(moraxella bovis)引起的眼角膜和结膜的急性炎症,其临床特征是羞明、流泪、结膜炎和角膜混浊。近年来,不少牛场时有发生,严重地影响牛场的正常生产,造成了巨大的经济损失。报告1例牛传染性角膜结膜炎的病例如下。
2009年4月底,河南省郑州市中牟县万滩某奶牛养殖场奶牛群中大部分奶牛表现为食欲下降,羞明,流泪,眼角分泌物呈浆液性或黏稠性,触摸眼睛有疼痛感,结膜发红、充血、肿胀,角膜或巩膜为淡红至深红色,眼睑半闭合状,呆立,表现有明显症状的牛有122头,发病率达56%,其产奶量总体下降,严重影响了该牛场的正常生产,造成了严重的经济损失,遂来我院就诊。
2.1 细菌形态观察 取患病牛眼部分泌物涂片、触片镜检发现有少量散在、双链或短链,不运动﹑不形成芽孢的链状革兰阴性菌,显微测微尺测定其大小为1.5μm~2μm ×0.8μm ~1μm 。
2.2 细菌的分离培养 取病牛眼部分泌物在营养琼脂培养基上分离划线,37℃,p H值为7.2~7.5,培养48 h后,观察菌落特征。培养结果:在血巧克力琼脂培养基上,可见圆形、半透明、灰白色、少黏稠性的溶血菌落,菌落粗糙,边缘不整齐,有菌毛;在Muller-hinton培养基上呈灰白色、湿润、表面光滑、边缘整齐的圆形小菌落。
2.3 生化试验 用待检菌纯培养物进行生化试验。试验结果:分离菌株的氧化酶试验与明胶液化试验均为阳性;糖发酵试验、硫化氢试验、靛基质试验、尿素酶试验均为阴性。
2.4 药敏试验 取待检菌纯培养物1 m L,用“L”型涂菌棒均匀涂布于Muller-hinton琼脂培养基表面,用无菌镊子按照一定的顺序贴上药敏纸片,置37℃恒温箱温育10~18 h后,测量抑菌圈直径,并根据试验结果筛选敏感药物。结果表明,分离菌株对土霉素(27 mm)、青霉素(22 mm)、链霉素(20 mm)、庆大霉素(19 mm)极度敏感;对磺胺二甲嘧啶(14 mm)、氯霉素(13 mm)中度敏感;对金霉素(10 mm)的敏感度较低。
2.5 动物试验 取健康小鼠4只,随机分为两组(对照组、试验组)。对照组腹腔接种改良马丁液体培养液0.5 m L,试验组腹腔接种0.5 m L待检菌纯培养物,观察小鼠发病及致死情况。接种次日试验组小鼠表现精神委顿,食欲减退,少动或不动,第3天全部死亡,死亡小鼠外表皮肤无可见变化,剖检可见眼结膜充血,肝脏等实质器官可分离到与接种菌一致的细菌,而对照组的小鼠均表现正常。
根据以上流行病学的调查、病牛的临床症状、细菌分离、生化试验和动物试验结果可综合判断本次牛患的是由牛摩拉氏菌感染引起的牛传染性角膜结膜炎。
3.1 治疗方案 根据该牛场实际情况,将病牛集中隔离饲养,严格消毒牛舍,避免日光、尘埃和昆虫对病牛眼部的刺激。为了不影响牛乳的质量,尽量减少抗生素的使用,采用了以下综合治疗方法。
3.1.1 西药局部处理 采用0.1%硼酸液冲洗患眼,清洗眼分泌物,同时眼结膜下注射青霉素G 30万IU,每日1次,连注3 d,在此治疗期间停采牛乳;氯霉素眼药水点眼,每日3~4次,连用至痊愈;严重病例,患眼滴加5%硝酸银溶液,以防角膜穿孔。
3.1.2 顺气孔插枝疗法 即用约20 cm长(火柴棍粗细)的剥皮柳树条(其他柔韧挺直光滑枝条亦可),酒精消毒,插入病牛顺气孔(即上颌齿板切齿乳头两侧的小孔)至底,将多余部分枝条在距孔缘1~2 cm处折断。枝条插入后,不用取出,病愈后会自行脱出。同时,每头每日喂土霉素片2 g辅以治疗。
3.1.3 外科手术 对角膜溃疡的牛只,采用眼睑暂时完全缝合术。用不吸收合成线4~6针结节水平、褥状全层缝合。
3.2 治疗效果 经过上述治疗,72 h后观察表明,全部病牛停止流泪,结膜肿胀消失。角膜白斑消失者72头,占治疗病牛的60%;其他病牛白斑亦显著减小。连续治疗7 d后,100头痊愈,20头基本痊愈,有2头严重病牛也略见好转,角膜溃疡部由肉芽组织开始填充愈合,角膜浑浊减轻,体温恢复正常,食欲明显增强,产奶量也逐渐回升。治愈率达98.36%。
4.1 关于本病的发病学机理目前尚未完全清楚。据资料报道,致病性摩拉氏菌的菌毛与溶血有关。在流行时,溶血株的分离率高,毒力强,溶血毒对牛嗜中性粒细胞会产生一定的毒性作用。细菌产生的一种皮肤坏死毒素,接种到犊牛角膜内,能产生与红眼病相同的角膜病变。牛摩拉氏菌感染眼睛,其所产生的趋化因子,激发嗜中性粒细胞和其他炎性防御反应,引起嗜中性粒细胞大量浸润,并释放较多的胶原酶,从而助长了角膜基质的破坏。
4.2 从药敏试验结果看,治疗应首选土霉素,青霉素也有较好的疗效,但从实际生产出发,我们采用了综合疗法。顺气孔插枝疗法对机体产生一种良性双相调整作用,对治疗疑难病症有特殊疗效。神经系统是插枝治疗主要作用基础,犁鼻器、鼻腔嗅区黏膜均分布有大量嗅觉神经细胞,嗅神经细胞以其轴突与大脑相连;三叉神经分枝主要分布在鼻中隔,甲骨,硬腭及舌上面,插枝的刺激作用可通过这些神经细胞传递至中枢神经,在中枢神经系统的调节作用下,在体液和经络的参与下,激发机体抗病防卫生理机能,增强机体的自动调节功能。治疗结果表明,本治疗方案实用快捷、疗效显著,治愈率达98.36%,且大大减少了抗生素用量,保证了牛奶的品质。
4.3 本病发生后一般在强烈的紫外线照射下才能产生典型的症状。所以,笔者认为,治疗该病时,除及时发现并隔离治疗病牛外,避免强烈阳光照射也是一项重要的防治措施。