药物新靶点脂肪细胞因子Apelin的研究概况

蓝晓红，周永刚，缪朝玉（.解放军第8医院药剂科，南京市 000；.第二军医大学药理学教研室，上海市 00433）

1993年，O’Dowd等[1]在人类基因组中首次识别出孤儿G蛋白偶联受体APJ（血管紧张素受体样受体或称血管紧张素1型受体AT1相关的受体蛋白）。Apelin是日本科学家Tatemoto[2]于1998年用反向药理学方法首次从牛胃分泌物中提取到的新的血管活性肽。直到发现Apelin为孤儿G蛋白偶联受体APJ的内源性配体，人们才从中确定APJ与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）受体（AT1R）具有高度的同源性。但AngⅡ在中国仓鼠卵巢细胞（CHO）和成纤维细胞中并不与APJ受体结合。Apelin通过内分泌、旁/自分泌的方式发挥内皮依赖性的舒血管、降血压、增强心肌收缩力、调节水盐代谢、促进摄水、调节垂体激素释放、调节生物节律和抑制人类获得性免疫缺陷病毒（HIV）入侵等多种生物学作用。2005年，法国学者Boucher等[3]在人和大鼠模型上证实了Apelin是由脂肪细胞分泌的新的脂肪激素，高胰岛素引起其表达上调，从而导致与肥胖相关的功能的紊乱。作为一种脂肪细胞因子，鉴于脂肪组织在体内分布的重要性、广泛的生理作用及其与肥胖、高血压、糖尿病关系的密切性，使Apelin可能作为药物设计的新靶点，引起了国内、外科学家的密切关注。目前，就Apelin及其受体特征的文献（1998年起）仅PubMed收录的就超过90篇。现笔者就Apelin的研究进展综述如下。

1 Apelin及其受体APJ的分子生物学特征和分布

1.1 Apelin及其受体APJ的分子生物学特征

人类Apelin基因定位于X染色体的q25～26.1段，由3个外显子和2个内含子组成，信使核糖核酸（mRNA）长度为2673 bp。人、牛、大鼠和小鼠的Apelin前体肽（Preproapelin）均由77个氨基酸组成。大鼠Preproapelin与人、牛的同源性分别为82%、87%。Apelin前体肽的N末端含有1个信号肽序列；C末端，尤其从Trp-55到Phe-77的23个氨基酸在各种属间完全保守，提示其具有重要功能。如Apelin C末端17肽K17F为Apelin活性所必需，是最有效的诱导Apelin受体的内化片段，具有降压作用。用丙氨酸替换N末端含有的精氨酸和赖氨酸残基（如 Lys-32、61、72 和 Arg-40、46、49、59、60、63、64、66、68），是Apelin前体肽潜在的酶切位点，可分解产生多个Apelin活性多肽片段Apelin-36、Apelin-17、Apelin-13和Apelin-12等。

人类APJ基因定位于X染色体的q12.1段，为380个氨基酸编码的含有7个α螺旋的跨膜区段蛋白。目前与人APJ相关的基因已在大鼠、小鼠、猴、鱼和青蛙等种属中得到鉴别。APJ与AngⅡ具有31%的同源性。在成纤维细胞中AngⅡ不能与APJ结合，说明AngⅡ不是APJ的内源性配体。且用RNA的吸印转移法、原位杂交法分析发现，Apelin成熟肽、前体Preproapelin与AngⅡ成熟肽、前体Angiotensinogen在心血管、大脑、肾脏组织分布很相似。此外，Apelin与AngⅡ均为近来新发现的血管紧张素转换酶2（Angiotensin-converting enzyme 2，ACE2）的底物。ACE2与血管紧张素转换酶（Angiotensin-converting enzyme，ACE）具有48%的同源性，并可作用于AngⅡ，生成Ang1～7。Ang1～7具有舒张血管的作用，可拮抗AngⅡ的收缩血管作用[4]。由于Apelin与AngⅡ在基因序列、受体、酶等方面相似，推测Apelin可能具有与AngⅡ相似的生理功能，如降血压、调节水盐代谢等。

1.2 Apelin及其受体APJ的分布

Apelin及其受体APJ广泛分布于人和鼠类。在大鼠的中枢系统主要分布于小脑、下丘脑、中脑、海马垂体后叶、前脑后叶、端脑基底部；在大鼠外周组织心脏、脾、软骨、卵巢和睾丸中呈中度表达，在肺和哺乳期的乳腺中高度表达；免疫系统如大鼠的肝脏、肝脏的枯否细胞和脾脏中有不同程度的Apelin及其受体APJ分布。人类Apelin主要在脑、心脏、肾、肺以及血管内皮细胞中高度表达；而在肌肉、棕色脂肪、肝脏中低表达[3]；B淋巴细胞和T淋巴细胞均有APJ的mRNA表达；人的松果体、腺垂体、肾上腺、胃、乳腺、肺、心脏、骨骼肌、肾脏、卵巢、脑、脂肪细胞均有Apelin及其受体APJ分布；心血管系统的冠状动脉、大动脉、隐静脉及各种器官的小动脉的血管内皮细胞和右心房的心内膜内皮细胞中均有Apelin及其受体APJ的分布，但在血管平滑肌细胞、心肌细胞、浦肯野细胞、窦房结细胞、心脏神经纤维和结缔组织表达量极少，低于检测水平。

Chen等[5]报道Apelin主要存在于冠状动脉的内皮细胞，左心室心功能不全的患者血浆Apelin含量显著增加。Saint-Geniez等[6]报道在视网膜内皮细胞，Apelin及其受体APJ受体也有表达。因此，Apelin作为血管内皮中一种局限性心血管调节因子，在心血管系统中发挥重要作用。

Apelin在人体脂肪组织广泛分布。法国学者研究[7]发现，在离体白色脂肪组织的脂肪细胞Apelin mRNA水平与其他细胞相似，在棕色脂肪组织也有少量分布。而且在脂肪细胞分化过程中Apelin表达增加。脂肪细胞特异性基因如瘦素（Leptin）、脂联素（Adponectin）在脂肪表达明显比血管间质部分（Stroma vascular fraction，SVF）多。Apelin mRNA主要存在于人体的脂肪细胞和SVF，且在男性皮下脂肪、腹膜脂肪和SVF中的Apelin mRNA水平与女性相比没有差别。

Apelin的分子结构因分布的组织不同而存在差异:肺、睾丸和子宫中以长链分子（Apelin-36）为主；在乳腺中长、短链结构形式（Apelin-36、Apelin-13）均可见到[8]。Apelin及其受体APJ在体内组织中广泛分布，表明其可作为内分泌、旁分泌、自分泌的活性物质发挥广泛的生物学效应。

2 Apelin的生物学功能及其可能的作用机制

2.1 心血管系统

心血管因子、应激因子、代谢因子和炎症因子的功能紊乱和相互作用导致心血管系统内源性的调节，当超出下丘脑-垂体调控的临界点就会导致病理改变。而Apelin就是其中重要的代谢因子之一，其与APJ配对后对心血管系统起调节作用。Katugampola等[9]通过放射性配体显影术发现Apelin受体在人和大鼠的心脏和大的阻力血管及大鼠的外周组织中表达。进一步提示Apelin/APJ为心血管系统重要的调节因子。

2.1.1 内皮依赖性的舒血管、降压作用。2000年，Lee等[10]首次报道了Apelin在心血管系统的降压作用，发现将麻醉的雄性Wistar大鼠静脉输注Apelin-13后可明显降低收缩压和舒张压。随后科学家们发现，Apelin通过一氧化氮（NO）依赖机制降低血压。2004年，Ishida等[11]研究发现，APJ受体缺陷的小鼠扩血管、降血压效应丧失，而AngⅡ的缩血管作用显著增强，表明Apelin可能具有拮抗血管紧张素的作用。Apelin可作用于血管内皮细胞生成NO，抑制AngⅡ产生，并抵消其与血管平滑肌受体结合产生的缩血管作用，最终降低血压。近年来发现，Apelin与AngⅡ组织分布相似，都是ACE2的作用底物，且Apelin在NO-AngⅡ调节血管过程中，具有拮抗AngⅡ、抑制血压升高的作用。各Apelin亚型之间，降血压效应由强到弱依次为Apelin-12＞Apelin-13＞Apelin-36。

Apelin降压信号转导机制可能与NO的参与有关。NO具有较强的扩血管、抑制血管平滑肌细胞增殖、抗氧自由基及调节肾脏功能等重要生理功能。NO降压作用主要通过环磷酸鸟苷（cGMP）途径，也可通过直接下调缩血管物质AngⅡ受体AT1R或者通过激活过氧化物增殖物激活受体（PPAR）途径实现。PPAR属于一种孤儿受体，主要涉及胰岛素敏感性、血糖及血压调控。Apelin通过上调NO激活PPAR，从而降低血压，改善胰岛素抵抗。此外Apelin通过APJ受体作用于抑制型G蛋白（Gi）影响腺苷酸环化酶（AC）以及磷脂酶C（PLC）的活性。Apelin可直接通过AC降低环磷酸腺苷（cAMP）的水平，也可间接通过PLC-三磷酸肌醇（IP3）途径最终使cAMP/cGMP失衡，导致血压下降。NO-AngⅡ平衡是维持血压稳定的关键因素，二者一旦失衡就将导致高血压的发生、发展。

2.1.2 增强心肌收缩力。Szokodi等[12]发现在离体大鼠心脏注射Apelin可产生剂量依赖性的正性肌力作用。研究发现，大鼠持续输注Apelin可明显增强心室最大压力、每搏输出量，而对左室舒张末容积及心率无影响。Apelin通过激活心肌细胞G蛋白偶联的蛋白激酶C（PKC）、PLC以及Na+-H+转换酶、Na+-Ca2+转换酶等通路产生增强心肌收缩力的作用；Apelin可以影响心肌收缩装置的下游元件如肌钙蛋白C的钙离子亲和力或肌动蛋白横桥的再生率，最终产生正性心肌变力效应；Apelin还可通过诱导激活肾素-血管紧张素系统（RAS）蛋白-细胞外信号调节激酶（ERK）信号途径以及NO-cGMP途径来增强心肌收缩效应。可见，Apelin可诱导NO生成增多，而后使心肌线粒体数目增加以及功能增强，使心肌利用能量增多，从而使收缩力增强。

2.1.3 调节水盐代谢及摄食量。Apelin在调节机体水盐代谢及摄食量方面起着重要的作用。Apelin具有类似AngⅡ的刺激口渴效应，大鼠腹腔注射Apelin后其饮水量增加。大鼠室上核及室旁核的神经元存在Apelin的mRNA表达，同时其合成加压素的神经元（Vasopression，VP）也有Apelin受体mRNA表达，且注射Apelin后该区VP释放明显减少。给脱水、血压正常的大鼠注射Apelin后，大鼠的饮水量明显减少但不影响其血压。Taheri等[13]给大鼠脑室注入Apelin-13，发现其对饮食量无影响，但给药后1 h内大鼠呈剂量依赖性地增加饮水次数和饮水量。可能机制是Apelin刺激下丘脑分泌精氨酸加压素（AVP），但对神经肽Y的释放无影响。O’Shea等[14]研究发现，Apelin-12对大鼠夜间摄食有抑制作用。可能机制为Apelin与APJ受体结合，通过激活PLC-PKC途径以及参与细胞间Na+-H+交换，使Apelin特异性促进其胞外酸化作用。

2.2 中枢神经系统

2.2.1 对呼吸和血压中枢调节的影响。在孤束核（NTS）和延髓头端腹外侧区（RVLM）Apelin-13对血压和呼吸有调节作用。微量注射Apelin-13到NTS可引起呼吸暂停或减少膈神经放电；在RVLM可不同程度增加膈神经放电的程度；在2区均引起动脉压升高。

2.2.2 与AVP相互作用。在中枢，Apelin和AVP共同存在于大鼠室上核大细胞神经元内，二者生物学效应相反，在维持体液稳态方面发挥着重要的调节作用。Apelin作为一种利尿神经肽通过受体APJ直接抑制AVP神经元活性和AVP的释放来拮抗AVP的作用。脱水可诱导AVP从下丘脑的大细胞神经元中释放增多，降低血浆Apelin的浓度。

2.3 免疫系统

2.3.1 免疫调节因子的生成。Apelin可通过脾细胞、T细胞受体及CD3受体途径抑制多种细胞因子如干扰素-γ（INF-γ）、白细胞介素-2（IL-2）和IL-4等。从而调节机体的免疫反应。

2.3.2 抵抗HIV感染。早在1984年人们就确定了CD4是人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）进入人体靶细胞的受体。然而，转导了人CD4基因的鼠类表面虽然也有CD4表达，但却不被HIV感染，这一现象提示了除了CD4，HIV还需要与其他分子或辅受体结合以协同HIV-1融合、进入过程[15]。APJ为HIV的辅受体，属于七次跨膜G蛋白偶联的趋化因子受体超家族成员，APJ可促进原代细胞对病毒感染的敏感性，有些病毒包被蛋白可介导APJ-阳性、CD4-阴性细胞融合。一些HIV和猪流感病毒（SIV）株利用APJ作为复合体感染脑源性的NP-2/CD4细胞。Apelin作为APJ受体的内源性配体，可有效阻断APJ复合受体活性，抑制HIV侵入NP-2/CD4细胞。而在抑制HIV侵入的能力上Apelin-36能通过抑制HIV病毒同源性受体APJ，更有效抑制HIV病毒的入侵，其抑制能力强弱表现为Apelin-36＞Apelin-17＞Apelin-13＞Apelin-12。

2.3.3 免疫反应时抑制胆碱能活性。APJ mRNA在人的B、T淋巴细胞均有表达。在植物血凝素（PHA）刺激的MOLT-3人白血病T细胞，Apelin-13可下调乙酰胆碱转移酶基因表达，显著减少乙酰胆碱转移酶活性和细胞乙酰胆碱的含量和释放。

2.4 内分泌系统

Apelin可抑制胰岛素释放与调节血液内环境稳定。2005年研究人员通过人和成熟小鼠脂肪细胞分泌Apelin实验，首次证明了Apelin为一种新的脂肪激素。Lee等[16]研究表明，Apelin广泛分泌于全身的脂肪细胞；肥胖伴有高胰岛素血症导致Apelin过度表达。胰岛素缺陷小鼠与正常小鼠采用链脲霉素治疗，结果胰岛素缺陷小鼠Apelin mRNA明显减少；随后，他们通过给小鼠禁食、恢复饮食造成胰岛素的生理性变化，结果禁食小鼠Apelin mRNA水平明显减少；而恢复饮食，小鼠Apelin mRNA表达增加。胰岛素在脂肪细胞调节Apelin表达的直接作用同样在C57BL6/J小鼠体内肌肉注射及体外培养脂肪细胞都得到了证实。肥胖使脂肪细胞大小和数目急剧增加，诱发Apelin分泌增加。由于Apelin对心血管功能和血液内环境稳定的重要性，Apelin过度表达是与肥胖相关的功能紊乱的保护措施。

2.5 消化系统

Apelin可以刺激胃黏膜细胞增殖，同时是具有生理调节作用的胃肠肽。在大鼠的胃大量表达而在小肠表达较少，胰腺组织中则未见Apelin基因的表达。胚胎与新生大鼠Apelin基因表达高于成年大鼠，但Apelin蛋白表达较低，且随着年龄增加而增加。

2.6 呼吸系统

Apelin及其受体APJ在肺组织中高度表达，表明Apelin可能参与呼吸系统的一些生物学功能。

3 Apelin与疾病的关系

3.1 Apelin在心血管疾病中的作用

3.1.1 Apelin与高血压。Szokodi等[12]发现在左心室明显肥大的RAS转基因大鼠和自发性高血压大鼠模型中，Apelin基因分别减少33%和62%，而APJ mRNA水平没有改变。Lee等[17]研究发现，Apelin-13、Apelin-12对正常大鼠具有相同的降压效果，而对自发性高血压大鼠（SHR）注射同等剂量Apelin-13、Apelin-12，其平均动脉压（MABP）分别下降60%和15%；而Apelin-10、Apelin-9对动脉压无影响。这表明不同长度的肽段降血压效果不同，Apelin-13能够更有效地降低SHR大鼠的MABP。Kleinz等[18]首次证实Apelin-13被苯丙氨酸取代后有降血压的作用。Messari等[19]研究证实Apelin-17是目前最有效的诱导APJ内部调节降血压药。

3.1.2 Apelin与冠心病、心力衰竭。有研究发现在冠心病（CHD）及特发性扩张型心肌病（DCM）的患者中Apelin及其受体APJ mRNA表达分别增加5倍和3倍。Chen等[5]发现心力衰竭患者在发病早期与健康人相比血浆中Apelin明显增加，而在严重心力衰竭时Apelin则减少。这提示在人的心脏功能受损时，Apelin/APJ受体系统能够代偿并诱发正性肌力作用。这与在大鼠模型上发现的结果是一致的。而心脏后负荷增加超出心脏的代偿能力时Apelin/APJ系统就被翻转下调。研究者将11位心力衰竭患者的心脏内装入左心辅助装置（LVAD），采用微点阵方法来分析基因表达水平，结果发现APJ基因明显增加。经分子杂交和实时定量PCR发现Apelin及其受体APJ mRNA水平分别增加3、4倍，并伴有Apelin肽的表达增加。这说明Apelin/APJ系统可以代偿心肌收缩力和心脏后负荷，是通过心室来恢复此功能的。2010年，Japp等[20]首次在临床试验中证明了Apelin激动药治疗慢心力衰竭的心血管效应。对18名Ⅱ～Ⅲ度慢性心力衰竭患者（其中6名接受冠脉造影）进行随机、双盲、对照试验（26名健康志愿者为对照组），给予Apelin-13、乙酰胆碱、硝普钠治疗，发现Apelin-13明显引起前壁血管舒张，增加心脏指数、降低平均动脉压、降低外周阻力。Apelin-36冠脉注射后，明显增加冠脉血流，使左室压力上升。表明在局部与全身血流动力学方面，Apelin是稳定慢性心力衰竭患者维持治疗的最佳靶点，Apelin激动药有可能成为有效的治疗药物。

3.2 Apelin在中枢神经系统疾病中的作用

Apelin及其受体APJ在中枢神经系统中高水平表达，提示Apelin-APJ异常可能涉及某些神经系统疾病的发病过程。

3.3 Apelin在免疫系统疾病中的作用

Apelin与免疫缺陷疾病和获得性免疫缺陷综合征相关。Esposito等[21]通过免疫组化测得获得性免疫缺陷综合征（AIDS）导致的恶病质，特别是在胰腺、肾脏、肾上腺、淋巴器官组织中Apelin表达明显减少。

3.4 Apelin在内分泌系统疾病中的作用

过去的10年，人们发现了许多新的脂肪激素，如瘦素、脂联素、脂抑素等，其调节参与人体脂肪细胞形成、能量储存与代谢、饮食的控制并通过旁分泌与内分泌的形式控制血液的内环境稳定，与肥胖和糖尿病有着密切的联系。Apelin作为一种脂肪激素也不例外。Heinonen等[22]报道肥胖患者行胃囊带术后，Apelin水平明显增加。提出了血浆Apelin与反映体重指数（BMI）的瘦素呈正相关性。研究[23]发现，在瘦与超重肥胖的受试者中，脂肪组织中Apelin的表达与TNF-α表达呈正相关性。Hotamisligil等[24]提出肥胖与胰岛素抵抗跟信号分子胰岛素（Insulin）、TNF-α水平增加相关。尽管有研究证明TNF-α有抑制Insulin的作用，但其研究提示Insulin向TNF-α转移来调节Apelin。这种转移可能用来维持肥胖受试者的Apelin水平。

4 展望

Apelin有望成为心血管、免疫、中枢神经、内分泌等系统潜在的药物治疗靶点。

前面的研究已经证明了在大鼠体内Apelin有舒血管、增强心肌收缩力的生物学功能。2010年Apelin的生物学功能在人体中得到初步证实，但有研究提示Apelin/APJ受体系统下调可导致心力衰竭[25]。鉴于Apelin在心血管系统的生物学功能，其可能在将来成为治疗急、慢性心力衰竭和高血压重要的药物治疗靶点。Apelin在大鼠模型上能够明显降低MABP，提示其能够有效治疗高血压，降低心脏后负荷，改善心脏心搏出量、心输出量、左室舒张末压等。此外，Apelin在中枢神经系统的抗利尿作用有利于治疗高血压和心力衰竭。

Apelin作为一种肽，主要作用于下丘脑神经元，必须要穿过血脑屏障，而这一天然屏障阻止肽类进入中枢神经系统。这就需要我们设计一种小分子的模仿Apelin作用的非肽类物质来穿透血脑屏障。由于Apelin作为肽类经口服给药生物利用度受到限制，阻止了其作为药物的广泛应用。

研究表明Apelin可能通过肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）来发挥舒血管的作用，从而调节血压、心功能、血液内环境的稳定，故Apelin可能成为RAS系统舒血管作用的靶点。ACE2可以水解具有舒血管作用的Apelin C末端的苯丙氨酸。ACE2作为ACE的同工酶，同时也能将缩血管的AngⅡ（8肽）水解为舒血管的活性肽——Ang1～7。我们可以采用ACE2拮抗药来阻断的Apelin下调，保持其舒血管活性，但同时阻止了Ang1～7的生成。这还需要我们在今后研究Apelin与Ang1～7二者在扩血管中的作用，究竟何者更能发挥主导作用来决定ACE2抑制剂应用与否。

Apelin能够阻止体外CD4/APJ阳性细胞感染HIV病毒，而APJ受体激动药可用来阻止HIV病毒感染。目前为止，还没发现CD4和APJ在人体组织中共表达，APJ在体内作为HIV的复合受体发挥作用。APJ融入CD4阴性细胞，受体在体外呈阳性。这提示我们可以用小分子配体绑定HIV辅受体CXCR4和APJ抑制HIV病毒感染，这可能成为潜在的治疗靶点。

总之，Apelin作为一种新的脂肪因子在心血管系统、中枢神经系统、免疫系统、内分泌系统都发挥着重要的调节功能。日后还需要在以下几个方面深入研究探索:第二信使系统调节Apelin诱导的受体激活的机制；通过确定Apelin主要药理作用来推进受体拮抗药、激动药的发展；寻找Apelin/APJ在调节心血管系统、中枢神经系统、免疫系统、内分泌系统更多确切的生物学作用，从而为更好地了解其生理性的调节通路提供帮助。总之，Apelin及其受体APJ在生理、病理方面的作用应进行更多深入的研究，从而帮助我们评价这一受体系统在将来能否作为药物治疗的靶点。

[1]O’Dowd BF，Heiber M，Chan A，et al.A human gene that shows identity with the gene encoding the angiotensin receptor is isolated on chromosome 11[J].Gene，1993，136（1-2）:355.

[2]Tatemoto K.Search for an endogenous ligand of orphan G protein coupled receptor-discovery of apelin，a novel biologically active peptide[J].Nippon Rinsho，2000，58（3）:737.

[3]Boucher J，Masri B，Daviaud D，et al.Apelin，a newly identified adpokine up-regulated by insulin and obesity[J].Endocrinology，2005，146（4）:1764.

[4]Burrell LM，Johnston CI，Tikellis C，et al.ACE2，a new regulator of the renin-angiotensin system[J].Trends Endocrinol Metab，2004，15（4）:166.

[5]Chen MM，Ashley EA，Deng DX，et al.Novel role for the potent endogenous inotrope apelin in human cardiac dysfunction[J].Circulation，2003，108（12）:1432.

[6]Saint-Geniez M，Argence CB，Knibiehler B，et al.The msr/apj gene encoding the apelin receptor is an early and specific marker of venous phenotype in the retinal vasculature[J].Gene Expr Patterns，2003，3（4）:467.

[7]Castan-Laurell I，Boucher J，Dray C，et al.Apelin，a novel adipokine over-produced in obesity:friend or foe？[J].Mol Cell Endocrinol，2005，245（1-2）:7.

[8]潘春水，齐永芬，唐朝枢.Apelin及其生物学效应[J].生理学进展，2005，36（3）:223.

[9]Katugampola S，Davenport A.Emerging roles for orphan G-protein-coupled receptors in the cardiovascular system[J].Trends Pharmacol Sci，2003 ，24（1）:30.

[10]Lee DK，Cheng R，NguyenT，et al.Characterization of apelin，the ligand for the APJ receptor[J].Journal of Neurochemistry，2000，74（1）:34.

[11]Ishida J，Hashimoto T，Hashimoto Y，et al.Regulatory roles for APJ，a seven-transmembrane receptor related to angiotensin-type 1 receptor in blood pressure in vivo[J].J Biol Chem，2004，279（25）:26274.

[12]Szokodi I，Tavi P，Földes G，et al.Apelin，the novel endogenous ligand of the orphan receptor APJ，regulates cardiac contractility[J].Circ Res，2002，91（5）:434.

[13]Taheri S，Murphy K，Cohen M，et al.The effects of centrally administered apelin-13 on food intake，water in take and pituitary hormone release in rats[J].Biochem Biophys Res Commun，2002，291（5）:1208.

[14]O’Shea M，Hansen MJ，Tatemoto K，et al.Inhibitory effect of apelin-12 on noeturnal food intake in the rat[J].Nutr Neurosci，2003，6（3）:163.

[15]Soms RW.Chemokine receptors and HIV entry[J].AIDS，2001，15（Suppl 1）:S34.

[16]Lee DK，George SR，O’dowd BF.Unravelling the roles of the apelin system:prospective therapeutic applications in heart failure and obesity[J].Trends Pharmacol Sci，2006，27（4）:190.

[17]Lee DK，Lanca AJ，Cheng R，et al.Agonist-independent nuclear localization of the Apelin，angiotensin AT1，and bradykinin B2 receptors[J].J Biol Chem，2004，279（9）:7901.

[18]Kleinz MJ，Davenport A.Emerging roles of apelin in biology and medicine[J].Pharmacol Ther，2005，107（2）:198.

[19]Messari SE，Ituriozz X，Fassot C，et al.Functional dissociation of apelin on receptor signaling and endocytosis:implications for the effects of apelin on arterial blood pressure[J].Neurochem，2004，90（6）:1290.

[20]Japp AG，Cruden NL，Barnes G，et al.Acute cardiovascular effects of apelin in humans:potential role in patients with chronic heart failure[J].Circulation，2010，121（16）:1818.

[21]Esposito V，De Falco M，De Luca L，et al.Immunohistochemical study of apelin，the natural ligand of receptor APJ，in a case ofAIDS-related cachexia[J].In Vivo，2002，16（5）:337.

[22]Heinonen MV，Purhonen AK，Miettinen P，et al.Apelin，orexin-A and leptin plasma levels in morbid obesity and effect of gastric banding[J].Regul Pept，2005，130（1-2）:7.

[23]Castan-Laurell I，Vitkova M，Daviaud D，et al.Effect of hypocaloric diet-induced weight loss in obese women on plasma apelin and adipose tissue expression of apelin and APJ[J].Eur J Endocrinol，2008，158（6）:905.

[24]Hotamisligil GS，Murray DL，Choy LN，et al.Tumor necosis factor alpha inhibits signaling from the insulin receptor[J].Proc Natl Acad Sci USA，1994，91（11）:4854.

[25]Barnes G，Japp AG，Newby DE.Translational promise of the apelin-APJ system[J].Heart，2010 ，96（13）:1011.