八角茴香提取物抗细菌性穿孔病菌活性初探

王东明，应俊辉，傅 兵

(丽水职业技术学院 环境工程分院，浙江 丽水 323000)

细菌性穿孔病是由核果单胞杆菌［Xanthomonas pruni(Smith)Down］引起的一个重要病害，该病害在全国各地普遍发生，除危害桃、李、杏、梅、油桃和樱［1］，引起叶片穿孔脱落、新梢枯死、果实发病，从而严重削弱树势，降低果品产量及质量［2］。八角茴香 (Illicium verumHook．f．)属木兰常绿乔木，近年来的研究表明，八角茴香精油可使蛋白质脱水，变性，损害细胞膜而具杀菌能力［3］。但并未见八角茴香抗细菌性穿孔病的相关报道。使用八角茴香提取物抗细菌性穿孔病，不会造成果品污染，有一定应用价值。

1 材料与方法

1.1 材料

八角茴香从丽水市百姓大药房购买，核果单胞杆菌菌种由上海市南汇种植业技术推广中心赵杰老师提供。

1.2 方法

抗菌活性鉴定。

称取八角茴香5 g，碾碎后放入锥形瓶中，加入乙醇 30 mL，浸泡 24 h，过滤后，浓缩至浸膏狀。

吸取200 μL菌悬液于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板上，用三角涂棒涂匀。将无菌滤纸片 (直径1 cm)蘸取茴香提取液浓缩浸膏平铺在含菌平板中，每个平板放置3块滤纸片。

系统预试验鉴别八角茴香活性成分:制备八角茴香的水浸渍液、乙醇提取液及石油醚提取液，硅钨酸、碘化铋钾试剂鉴别生物碱，α-萘酚试验、斐林试剂鉴别糖，三氯化铁鉴别酚类化合物，盐酸镁粉反应、三氯化铝试剂鉴别黄酮类化合物，异羟肟酸铁反应鉴别香豆素类化合物，碱液试验鉴别蒽醌类化合物，溴酚蓝、pH试验测定有机酸［4］。

系统提取法分离抗菌物质:称取八角茴香50 g，碾碎后，采用水蒸汽蒸馏，分离出挥发油;残渣80℃烘干后石油醚100 mL浸渍1 d，取滤液，共计浸渍3次，合并滤液;再依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇各浸渍3次;取出滤液浓缩至浸膏狀，采用贴滤纸片法验证系统提取物抗菌效果。

2 结果与分析

2.1 八角茴香的抗菌活性及成分

八角茴香提取液浓缩浸膏抑菌圈平均直径为1.9 cm，抗核果单胞杆菌效果明显。已证实八角茴香化学成分含有挥发性化合物、倍半萜内酯及其衍生物、黄酮类成分等成分［5］。系统鉴定结果显示八角茴香含有挥发油、糖或糖苷、酚类化合物、有机酸等，八角茴香含有多种活性成分，为产生抗菌性提供了物质基础。

2.2 系统提取物抗菌效果

八角茴香挥发油及正丁醇提取物没有抑菌效果，石油醚、氯仿、乙酸乙酯提取物具有一定抗菌效果抑菌圈直径分别为1.1，1.3和1.5 cm，说明八角茴香抗菌活性为极性小与中等极性成分，以中等极性成分抗菌活性最强。

目前认为八角茴香抗菌成分是挥发油，陈奇等研究发现八角茴香挥发油对根霉、酵母菌、大肠杆菌都具有一定抗性［3］;刘志希等明确了反式茴香醚是八角茴香精油中的主要抗菌成分，对棉花枯萎病菌菌丝生长抑制作用［6］。本试验证实八角茴香抗细菌性穿孔病的成分为挥发油以外的成分，与八角茴香不同活性成分的抗菌谱范围有关。八角茴香中所含的黄酮为槲皮素等，以槲皮素做抗菌试验证实槲皮素没有抗菌效果。杨金从八角茴香正丁醇浸膏中分离得到8个化合物，分别为木樨草素、木樨草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、 (+)-儿茶素、gallocatechin、香草酸、3，4-二甲氧基苯甲酸、4-羟基苯甲酸和β-谷甾醇、胡萝卜苷［7］，则上述成分也没有抗细菌性穿孔病的活性。从以上结果推测八角茴香中的抗细菌性穿孔病成分是挥发油以外的极性较小和中等极性的萜类成分。

3 小结

八角茴香药食兼用，含有多种活性成分，推测抗细菌性穿孔病的成分是挥发油以外的萜类成分，可利用提取挥发油后的八角茴香残渣，粗提后直接加工成可利用的制剂;也可根据八角茴香乙酸乙酯提取物结构，挖掘先导化合物，进而人工合成抗性药物。本研究为开发抗细菌性穿孔药物提供有益参考。

［1］赵杰，黄奕怡．桃细菌性穿孔病的室内药剂筛选 ［J］．上海农业科技，2007(3):133．

［2］吴秀刚，吴康云．桃树3种叶片穿孔病的比较鉴别与防治［J］．农技服务，2007，24(12):41，92．

［3］陈奇，张根生，邢楠楠，等．八角茴香精油的抗菌活性及在肉类保鲜中的应用研究 ［J］．中国调味品，2007(4):49-51．

［4］董小萍．中药品种与化学成分实验 ［M］．上海:上海科学技术出版社，2003．

［5］王琴，蒋林，温其标．八角茴香研究进展 ［J］．粮食与油脂，2005(5):43-44．

［6］刘志希，李锋，张腊梅．八角茴香精油及其主成分对棉花枯萎病菌的拮抗作用 ［J］．安徽农业科学，2010，38(32):18193-18194．

［7］杨金，闵勇，刘卫，等．八角茴香的化学成分研究 ［J］．安徽农业科学，2010，38(23):12453-12454．