中医药治疗慢性盆腔炎实验研究概述

贾 磊，王希浩

(1.河南中医学院，河南 郑州450008;2.河南省中医药研究院，河南 郑州450004)

盆腔炎(pelvic inflammatory disease，PID)是指女性上生殖道及其周围组织的炎症，主要包括子宫内膜炎、输卵管炎、输卵管卵巢脓肿、盆腔腹膜炎［1］，炎症可局限于一个部位，也可同时累及几个部位，临床分为急性期和慢性期，尤以慢性盆腔炎(chronic pelvic inflammatory disease，CPID)多见，为妇科常见病、多发病。本病具有缠绵难愈、易于复发的特点，严重影响妇女身心健康。本病属中医学“瘕瘕”、“腹痛”、“带下病”、“痛经”、“不孕”范畴。近年来，慢性盆腔炎的实验研究取得了很大进展，主要从以下几个方面进行研究。

1 动物模型的研究

1.1 实验动物的选择

目前，文献报道中绝大部分采用大鼠作为实验动物，构建大鼠子宫内膜炎模型［2］。选用大鼠子宫作为研究对象的原因是:子宫内膜炎是盆腔炎的一种，可因其上行感染引起盆腔其他脏器的炎症，大鼠具有双侧子宫，并且子宫在盆腔生殖器官中占有相当大的比重，可以进行单侧感染，便于对照。闻莉等［3］通过研究发现，单侧感染时，另外一侧未受病变累及，未见IgG 沉积，说明本模型无自身免疫因素存在，可进行自身对照，故认为大鼠子宫内膜炎基本反映盆腔的炎症状态。

1.2 造模方法

1.2.1 化学性烧伤

蔡雪 芬 等［4］采 用0. 4% 戊 巴 比 妥 钠(50 μg/g 或30 μg/g)腹腔注射麻醉大鼠，无菌条件下取大鼠下腹正中切口约0.8～1 cm，开腹后暴露并固定子宫，用4 号针头选取左侧子宫在其分叉处向卵巢方向缓慢注入20% 苯酚胶浆0.1 mL，然后分层缝合关腹，消毒术区，关于苯酚胶浆的浓度与剂量，可根据实验所需的炎症严重程度而定。王静等［5］采用4 号针头于子宫分叉处进针入子宫腔内，朝卵巢方向缓慢推注25%苯酚胶浆0.05 mL 的方法制备模型，病理结果也显示为慢性炎症;在此次实验研究中还通过组织形态学观察和免疫学指标检测，更客观的反应出该模型有炎症反应，与人类盆腔炎有相似之处。

1.2.2 细菌感染

早在20 世纪80 年代就有细菌性盆腔炎症模型研制成功的报道［6］，采用的方法为:使用B 型溶血性链球菌菌液对新西兰雌兔双侧输卵管进行接种，每侧输卵管接种0.04 mL浓度为1.5 ×108/mL 的菌液，造成兔输卵管炎性阻塞模型。观察模型病理切片，结果显示为慢性中度炎症。此模型制作方法简单，重复性好。冯光荣等［7－8］采用大肠埃希菌液作为致炎剂，注入大鼠子宫，血液流变学测定以及子宫病理形态学观察结果均表明该方法可以造成大鼠慢性盆腔炎。也有学者将慢性盆腔炎的常用致病菌进行混合，配制成混合菌液作为致炎剂。如陈莹等［9］以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、链球菌按2∶1∶1 比例采用无菌生理盐水稀释，配制成浓度约为3 ×109/mL 的混合菌，将菌液注入大鼠输卵管内，模型动物的输卵管增粗，呈轻度或中度肿大，并与周围组织粘连;病理切片显示为上皮细胞坏死;大量炎性细胞浸润伴充血水肿，提示大鼠慢性盆腔炎造模成功。

1.2.3 机械损伤加细菌感染

方法:一侧子宫用注射器划伤子宫内膜，然后注入菌液，另一侧作为自身对照，不划伤也不注射菌液;宫腔组织的损伤是细菌在组织内停滞并形成病变的关键环节，但应注意损伤的程度。该造模方法能成功的制造更贴近人类慢性盆腔炎的动物病理模型，如刘国生等［10］采用大肠埃希菌菌液为致炎剂，按上述方法造模，造模子宫红肿、充血、重量增加;病理切片发现子宫有明显的粘连、炎症浸润、黏膜层水肿、腺体破坏或减少等变化，与人类慢性盆腔炎疾病表现相似。

2 抗炎研究

2.1 减少炎性渗出与增生

杨东霞等［11］证实，炎克宁IV 号方能明显减轻组织充血、水肿、炎性渗出及粘连，促进组织修复;明显降低促炎症基因表达关键性的转录调控因子NF-KB 的表达水平，进而降低由细胞因子引起的炎症病理损害;明显降低ICAM-1 的表达水平，减轻组织损伤及局部组织慢性纤维化;明显降低TNF-a 和IL-10 水平，促进促炎因子和抑炎因子恢复平衡;明显降低NO 和NOS 的水平，减轻组织细胞的损伤;能够促进Bax 表达，从而促进炎症细胞的凋亡;能够通过增加血清超氧化物歧化酶(SOD)含量，加快清除氧自由基;抑制NF-KB及炎症介质、促进炎细胞的凋亡及氧自由基的清除治疗慢盆腔炎。贾丽娜等［12］在妇科千金软胶囊对大肠杆菌致炎的治疗作用的研究中，采用左侧子宫注入大肠杆菌制备慢性盆腔炎模型，以右侧子宫作为对照，造模后第10 天起给药治疗15 d，比较两侧子宫重量差异，计算肿胀率，实验结果显示，妇科千金软胶囊能消除炎性包块。

2.2 诱导炎细胞凋亡

曲凡等［13］证实，炎克宁IV 号方通过增加模型大鼠子宫组织中Caspase-3、Fas/FasLmRNA 和p53mRNA 的表达，诱导炎细胞凋亡，抑制炎细胞生长，从而减轻炎症反应，有利于慢性盆腔炎症的消除。

2.3 炎症介质测定

王莹等［14］在炎克宁冲剂对慢性盆腔炎模型炎性介质含量的影响研究中，采用混合菌制备大鼠慢性盆腔炎模型，采用荧光分度法检测模型局部组织NO 水平，结果表明慢性盆腔炎病灶中存在大量NO，NO 不仅对细菌、真菌和肿瘤细胞产生杀伤作用，而且还可以损伤正常组织，炎克宁冲剂能减少炎性介质的释放，发挥治疗慢性盆腔炎的作用。

3 镇痛研究

目前，疼痛的动物模型主要是躯体疼痛模型，常用的有热板法、扭体法等［15］。王玉坤等［16］在妇炎康软胶囊对大鼠慢性盆腔炎的镇痛作用研究中，分组给药7 d 后，采用小鼠热板舔足反应的方法，观察到妇炎康软胶囊(5. 88，11.76 g/kg)可延长小鼠热板舔足反应潜伏期;通过小鼠腹腔注射0.8%冰醋酸0.01 mL/g，观察15 min 内小鼠扭体次数，结果显示，妇炎康软胶囊(5.88，11.76 g/kg )可抑制冰醋酸引起的扭体次数。

4 免疫功能研究

盆腔炎发病除与病原体感染有关外，还与机体免疫功能低下或紊乱有关。中医学认为，“正气存内，邪不可干”、“邪之所凑，其气必虚”，机体的免疫状态对病原微生物引起的炎症过程有着重大的影响，在抗感染过程中，体液免疫和细胞免疫起着重要作用。

4.1 体液免疫

陈颖异等［17］观察中药舒康汤对大鼠实验性子宫内膜炎免疫功能的影响，用酸度非特异性酯酶染色法测定T 细胞百分率;用PHA 刺激的形态学法测定淋巴细胞转化率;吞噬中性细胞实验测定腹腔巨噬细胞吞噬功能;用攻击YAC-1 细胞法测定脾细胞NK 活性;用免疫浊度法测定免疫球蛋白IgG、lgA、IgM 的含量。结果显示，大鼠在接受慢性盆腔炎动物模型造模后，细胞免疫、体液免疫各项指标均明显下降(P＜0.05)。舒康汤治疗后，血液中免疫球蛋白IgG、lgA、IgM 的含量、T 细胞百分率、淋巴细胞转化率及腹腔巨噬细胞吞噬功能均恢复到正常水平(P＜0.01，或P＜0.05)。

4.2 细胞免疫

曲凡等［14］观察炎克宁IV 号方通过降低慢性盆腔炎模型大鼠血清中白介素－2、白介素－6 含量和子宫组织中INF-r的表达，使其接近正常水平，恢复免疫平衡，从而控制慢性盆腔炎的病理发展。史凯凯等［18］观察发现，败酱复方胶囊给药组大鼠较模型组大鼠脾淋巴细胞转化指数、血清IL-2 降低，IL-6 升高。刘瑞芬等［19］采用混合细菌造模法制模，模型大鼠表现出血清TNF 浓度明显增高、IL-2 的浓度明显下降，经盆腔炎颗粒治疗后大鼠血清TNF、IL-2 值与对照组相比差异有显著性(P＜0.05)。

5 血液流变学及微循环研究

慢性盆腔炎可导致血液黏滞性升高，处于“浓、黏、凝、聚”的状态。李灵芝等［20］研究新制易黄丸的药物作用，选用苯酚胶浆致大鼠子宫内膜炎进行实验，结果血液流变学包括全血比黏度、血细胞比容、血浆比黏度均有显著性改变，血清血栓素B2(TXB2)含量升高(P ﹤0.05)，6－酮前列腺素F1a(6－Keto－PGF1a)含量下降(P＜0.05)。谷风［21］通过利湿化瘀法对慢性盆腔炎大鼠血清SOD、MDA 影响的研究表明，以利湿化瘀法为主治疗慢性盆腔炎可以升高超氧化物歧化酶(SOD)、降低丙二醛(MDA)，改善血液的浓、黏、凝、聚的状态，能抗组织氧化、改善局部血液循环和组织营养、有利于炎性分泌物的消散和吸收，从而达到治疗的作用。沈碧琼等［22］通过对大白鼠肠系膜微循环的影响，了解盆炎清胶囊对免疫及微循环的作用，结果显示，盆炎清胶囊能改善由去甲肾上腺素(NA)所致的大白鼠肠系膜微循环障碍，使血流量增加，在短时间内将微循环状态恢复到实验前水平。

6 病理组织学研究

病理组织学观察是反应模型是否成功以及药物是否有治疗意义的重要手段之一。卢如玲等［23］研究了盆炎康合剂对慢性盆腔炎大鼠病理形态学的影响，结果显示，盆炎康合剂能有效改善慢性盆腔炎大鼠盆腔粘连，能缓解炎症细胞的浸润，改善子宫病理状态，起到治疗盆腔炎的目的。向海燕等［24］研究了金刚藤分散片对大鼠慢性盆腔炎的药效学作用，实验中采用苯酚胶浆致炎，取子宫肉眼观察并进行病理组织学检查。结果显示，金刚藤分散片组大鼠子宫内膜变化均较模型组有显著改善，说明金刚藤分散片能够抑制炎症细胞的增生，促进组织的修复，对大鼠慢性盆腔炎有较理想的治疗作用。

7 讨 论

近年来，中医药治疗慢性盆腔炎取得可喜的进展，但尚存在着一些不容忽视的问题，主要有以下几个方面:①研究出更加符合人类慢性盆腔炎炎性病变的动物模型，最好能建立不同的症候模型使该模型更符合临床发病病因;②加强对药物作用机制研究，从不同层次进行药物作用的机制研究，如整体的、细胞的、分子的等，使药物在治疗该病方面的理论与现代科学紧密结合;③药物成分、药物组方的研究，如在中药方中究竟哪些中药具有明显的治疗急慢性盆腔炎的作用，其有效成分是什么，那些药物可以删减，以求用药的合理性。

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