鹿胎胶囊与软胶囊缓解小鼠炎性疼痛与痛经性疼痛作用的比较研究

魏力，刘聃

（中国医科大学附属第四医院妇产科，沈阳 1100032）

鹿胎胶囊与软胶囊缓解小鼠炎性疼痛与痛经性疼痛作用的比较研究

魏力，刘聃

（中国医科大学附属第四医院妇产科，沈阳 1100032）

目的观察鹿胎胶囊与鹿胎软胶囊缓解小鼠腹腔炎性疼痛及痛经性疼痛的作用，为临床应用不同鹿胎制剂提供实验依据。方法 通过拟临床给药途径与方法，对雌性小鼠分别口服给予高、低剂量的鹿胎软胶囊制剂和鹿胎胶囊制剂，30d后观察两种制剂对醋酸诱导腹腔炎性疼痛及缩宫素诱发的痛经性疼痛、子宫组织病理学改变与差异。结果 与疼痛模型组比较，鹿胎高剂量组及低剂量组均可显著降低醋酸诱导的炎性疼痛小鼠模型及缩宫素诱发的痛经小鼠模型平均扭体次数，同种药物的高低剂量组之间的镇痛效果也存在统计学差异（P<0.05）。结论鹿胎胶囊和鹿胎软胶囊可有效缓解不同类型病理性疼痛反应，且不影响投药小鼠子宫组织的病理学改变。

鹿胎；小鼠；炎性疼痛；痛经性疼痛

鹿胎具有补气养血、调经止痛、通经散寒之功效，可用于治疗妇女气血不足、虚弱羸瘦、月经不调、行经腹痛、寒湿带下等症状［1］。鹿胎软胶囊是在现有组方鹿胎胶囊的基础上开发的软胶囊新型制剂。本研究应用醋酸诱导腹腔炎性疼痛小鼠实验病理模型及缩宫素诱发的痛经小鼠实验病理模型，对比观察鹿胎软胶囊与鹿胎胶囊对实验病理模型小鼠的疼痛缓解作用及子宫组织病理学改变，探讨鹿胎软胶囊和鹿胎胶囊缓解痛经性疼痛的实验动物体内药效学作用及差异，旨在为鹿胎制剂的药效学评价提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 药品

鹿胎软胶囊由诺氏制药（中国）有限公司提供（批号：050301），性状：软胶囊，内容物为棕色至棕褐色的膏状物。规格：每粒装膏状内容物0.65g，相当于生药2.396g。鹿胎胶囊由长春华兴药业有限公司提供（批号：041201），胶囊剂，内容物为棕色粉末，每粒装药粉0.3g，相当于生药0.958g。缩宫素注射液（上海禾丰制药有限公司，批号：041103）、己烯雌酚片（上海信谊康捷制药有限公司，批号：041001）冰醋酸（北京北化精细化学品有限责任公司，批号：20040618）。

1.2 试验动物

10周龄SPF级雌性未孕昆明种小鼠120只，体质量18～22g，由中国医科大学试验动物中心提供，试验动物生产许可证号：SCXK（辽）2003-0009，试验动物使用许可证号：SYXK（辽）2003-0013。饲养条件及实验环境：屏障系统环境下进行饲养及实验操作，试验动物不限食水，每笼10只。实验室温度20～25℃，相对湿度40%～70%，空气洁净度10000级，昼夜明暗交替时间12h/12h［执行标准：中华人民共和国国家标准实验动物 环境及设施（GB14925-2001）］。

1.3 疼痛模型制备

1.3.1 醋酸诱导腹腔炎性疼痛模型小鼠的制备：腹腔注射0.6%醋酸（0.2mL/只）后，10min内小鼠的扭体次数为20次以上，则证明疼痛模型建立成功。1.3.2 己烯雌酚诱导痛经性疼痛模型小鼠的制备：从给药的28d开始，每日小鼠皮下注射己烯雌酚（4.0mg/kg），第30天灌胃给药30min后，腹腔注射缩宫素（2U/只）后，10min内小鼠的扭体次数为20次以上，则证明疼痛模型建立成功。

1.4 试验分组

1.4.1 鹿胎对醋酸诱导腹腔炎性疼痛模型小鼠作用的实验分组：（1）空白对照组；（2）疼痛模型组；（3）鹿胎软胶囊低剂量组（0.059g/mL）；（4）鹿胎软胶囊高剂量组（0.176g/mL）；（5）鹿胎胶囊低剂量组（0.059g/mL）；（6）鹿胎胶囊高剂量组（0.176g/mL），共 6组，每组10只小鼠。腹腔注射0.6%醋酸（0.2mL/只），记录10min内各组动物的扭体次数。

1.4.2 己烯雌酚诱导痛经性疼痛模型小鼠作用的实验分组：（1）空白对照组；（2）痛经模型组；（3）鹿胎软胶囊低剂量组（0.059g/mL）；（4）鹿胎软胶囊高剂量组（0.176g/mL）；（5）鹿胎胶囊低剂量组（0.059g/mL）；（6）鹿胎胶囊高剂量组（0.176g/mL），共 6组，每组10只小鼠。从给药的28d开始，小鼠皮下注射己烯雌酚（4.0mg/kg），第30天灌胃给药30min后，腹腔注射缩宫素（2U/只）后，记录10min内各组小鼠的扭体次数。

1.5 给药途径与给药方法

各组小鼠连续灌胃给药30d，空白对照组和疼痛模型组灌胃给予蒸馏水；鹿胎低剂量组灌胃给予鹿胎制剂混悬液0.059g/mL（相当于生药0.216g/mL）；鹿胎高剂量组灌胃给予0.176g/mL（相当于生药0.648g/mL）；给药容积均为10mL/kg。

1.6 子宫病理学检测

实验结束后，各组分别随机选取3只小鼠，脱椎处死，剪开腹腔，取子宫制备HE染色组织切片，观察各组小鼠子宫组织病理学变化，并比较差异。

1.7 统计学分析

试验数据采用SPSS 13.0统计软件进行处理，组间比较采用单因素方差分析（One-Way ANOVA），两两比较采用student-Newman-Keuls法，P<0.05认为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 鹿胎制剂缓解醋酸诱导小鼠腹腔炎性疼痛作用

空白对照组无扭体现象出现，疼痛模型组，鹿胎软胶囊低、高剂量组，鹿胎胶囊低、高剂量组扭体次数分别为（25.5±10.9）、（14.2±9.0）、（6.3±6.4）、（15.4±5.3）、（8.8±6.0）。与疼痛模型组比较，鹿胎高剂量组及低剂量组均可显著降低受试小鼠平均扭体次数（P<0.05），且同种制剂高低剂量两组间的扭体次数差异也具有统计学意义（P<0.05）；空白对照组无扭体现象出现；提示鹿胎两种制剂均具有剂量依赖性地缓解醋酸诱导的小鼠腹腔炎性疼痛作用（P<0.05）。

鹿胎软胶囊的高、低剂量组缓解醋酸诱导小鼠腹腔炎性疼痛作用强度与鹿胎胶囊的相同剂量组间的比较差异均不具统计学意义（P>0.05），提示等剂量两种鹿胎制剂缓解醋酸诱导的小鼠腹腔炎性疼痛作用强度无明显差异。

2.2 鹿胎制剂缓解缩宫素诱导小鼠痛经作用

空白对照组无扭体现象出现，疼痛模型组、高剂量组，鹿胎胶囊低、高剂量组扭体次数分别为（21.3±8.3）、（11.6±7.2）、（5.6±4.0）、（11.9±7.6）、（5.4±3.9）。鹿胎高剂量组及低剂量组均可显著降低受试小鼠平均扭体次数（P<0.05），同种制剂高低剂量2组间的扭体次数差异也具有统计学意义（P<0.05）；空白对照组无扭体现象出现；提示鹿胎两种制剂均具有剂量依赖性地缓解缩宫素诱导的痛经模型小鼠的疼痛反应作用（P<0.05）。

鹿胎软胶囊高、低剂量组缓解缩宫素诱导的痛经模型小鼠疼痛作用强度与鹿胎胶囊的相同剂量组比较差异均不具统计学意义（P>0.05），提示等剂量两种鹿胎制剂缓解缩宫素诱导的痛经模型小鼠疼痛作用强度无明显差异。

2.3 鹿胎对小鼠子宫病理学的影响

各处理组小鼠子宫内膜完整，内膜上皮细胞呈高柱状，胞质内可见大量分泌颗粒，内膜下组织疏松，螺旋动脉增生明显，肌层细胞排列有序，为正常动情期小鼠子宫镜像，未见异常病理改变（图1）。

3 讨论

鹿胎由红参、当归、益母草、熟地黄、丹参、香附、龟甲、地骨皮、延胡索、白术、肉桂、术香、小茴香、赤芍、甘草、续断、蒲黄、川芎、牛膝、鹿茸（去毛）、茯苓、鹿胎粉、阿胶精制而成［2，3］，用于补气、养血、复脉、调经散寒、理气活血、消炎止痛，用于妇女气血不足，虚弱羸瘦，月经不调，行经腹痛，寒湿带下［4，5］。鹿胎软胶囊为诺氏制药（中国）有限公司在现有组方鹿胎胶囊的基础上开发的软胶囊新型制剂。鹿胎胶囊更改为软胶囊剂型后，用法相应更改为2次/d，每次3粒，相比鹿胎胶囊3次/d、每次5粒的用法，在保证每日服用生理药量不变的情况下，减少了每日服药次数及单次服药量，药品使用更为方便；鹿胎软胶囊通过改进制剂工艺在原组方的基础上，根据各味中药所含的有效成分不同，分别采用水提、醇提、浓缩干燥后得相应的浸膏，并在浸膏中添加等量的菜油与适量（约2%～4%）的蜂蜡作为辅料制成软胶囊内容物，增加了部分有效成分的溶出度，一定程度上改善有效成分的吸收［6，7］。

国内大部分对鹿胎类药品研究很少利用动物模型进行具体剂量、不同剂量的药效对比研究。本次实验通过拟临床给药途径与方法，对雌性小鼠分别口服给予高、低剂量的鹿胎软胶囊制剂和鹿胎胶囊制剂，30d后观察两种制剂对醋酸诱导腹腔炎性疼痛及缩宫素诱发的痛经性疼痛作用及差异，并对子宫组织病理学改变予以判读，结果表明：鹿胎软胶囊和鹿胎胶囊均可剂量依赖性缓解醋酸诱导小鼠腹腔炎性疼痛及缩宫素诱发的实验性痛经病理模型小鼠的疼痛反应，二者剂量相同时作用强度无明显差异；各投药组小鼠子宫组织病理学未见改变。该作用结果可为其临床应用提供良好的实验依据。

［1］杨桂芹，张维睿，邹兴淮.鹿胎制剂对老年雌性大鼠血清雌二醇浓度和生殖腺指数的影响［J］.中国兽医杂志，2008，44（12）：32-33.

［2］朱亚红.鹿胎膏在人工流产术后的应用［J］.现代中西医结合杂志，2009，18（32）：4006.

［3］李毅敏，周连发，王士贤.复方益母草膏治疗痛经药理机制的实验研究［J］.中成药，2004，26（4）：311-314.

［4］唐旭亮，周爱香，李洪梅，等.内异痛经颗粒的实验研究［J］.中国实验方剂学杂志，2004，10（2）：48-51.

［5］凌艳，刘丽华.益母定痛颗粒对动物痛经模型的治疗作用［J］.实用全科医学，2002，30（4）：285-286.

［6］李晨，方坤泉，陈水英，等.抗痛经冲剂药效学实验研究［J］.西北药学杂志，2002，17（1）：17-19.

［7］韩大庆，周丹，刘伟，等.三七口服液对痛经的作用研究［J］.中药药理与临床，2004，20（2）：40-41.

（编辑武玉欣，英文编辑刘宝林）

Comparative Study on Effects of Lutai Capsule and Soft Capsule on Relieving Pains of Abdominal Inflammation and Dysmenorrhea of Mice

WEI Li，LIU Dan
（Department of Obstetrics and Gynecology，The Forth Affiliated Hospital，China Medical University，Shenyang 110032，China）

ObjectiveTo investigate the effects of Lutai capsule and soft capsule on relieving pains and to provide experimental evidence for clinical application of different preparations of deer’s placenta.MethodsBy imitating clinical administration route and method，the mice were taken orally respectively high and low dose of Lutai capsule and Lutai soft capsule.Thirty days later，we observed and compared the effects of two preparations on relieving abdominal inflammatory pain caused by acetic acid and dysmenorrhea induced by oxytocin and on uterus histopathology.ResultsCompared to the pain model group，both the high dosage and low dosage of Lutai can significantly reduce the body torsion speed of inflammatory pain of mice models induced by acetic acid and the dysmenorrhea mice models induced by oxytocin.，and the analgesic effect of the high and low dosage groups is different.ConclusionBoth Lutai capsule and Lutai soft capsule could relieve different types of pathological pain reactions and have no effect on uterus histopathology of mice.

lutai；mice；pains of abdominal inflammation；pains of dysmenorrhea

R711.32

A

0258-4646（2011）05-0387-03

doiCNKI：21-1227/R.20110523.1814.012

http：//www.cnki.net/kcms/detail/21.1227.R.20110523.1814.012.html

国家重大新药创制平台（2009ZX09301-012）

魏力（1962-），女，教授，硕士.E-mail：cmu4h_wl@126.com

2011-01-03

网络出版时间：2011-05-1815：25