扶正固本胶囊对“劳倦过度，房室不节”肾阳虚模型大鼠的影响

苏 梅，崔 涛，吴德松，徐 芳，赵春梅，杨和金

（云南省药物研究所天然药物筛选研究中心，昆明市 650111）

扶正固本胶囊对“劳倦过度，房室不节”肾阳虚模型大鼠的影响

苏 梅＊，崔 涛，吴德松，徐 芳，赵春梅，杨和金

（云南省药物研究所天然药物筛选研究中心，昆明市 650111）

目的：研究扶正固本胶囊对“劳倦过度，房室不节”肾阳虚模型大鼠的影响。方法：采用“劳倦过度，房室不节”的方法复制大鼠肾阳虚模型，灌胃给药4周后，测定肾阳虚模型大鼠的排尿量、交配能力、性器官和血清中三碘甲腺原氨酸（T3）、四碘甲腺原氨酸（T4）、睾酮（T）、雌二醇（E2）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的变化。结果：扶正固本胶囊在1.84、0.92g·kg-1的剂量下能使肾阳虚模型大鼠血清中的T3、T4、T水平和SOD活性显著升高，E2水平、MDA含量显著降低（P＜0.05或P＜0.01）；能显著缩短肾阳虚模型大鼠的交配潜伏期和增加其交配次数（P＜0.05），其中1.84g·kg-1剂量下大鼠的睾丸指数显著增加（P＜0.05）；在1.84、0.92、0.46g·kg-1的剂量下可显著减少肾阳虚模型大鼠的排尿量。结论：扶正固本胶囊对大鼠的肾阳虚症状有显著的改善作用。

扶正固本胶囊；肾阳虚；培元固本；扶正祛邪

扶正固本胶囊是临床应用多年的中药复方制剂，具有培元固本、扶正祛邪之功效，主治肾阳不足。临床用于治疗肾阳不足引起的腰膝酸软、畏寒肢冷、神疲乏力、性欲减退、夜尿频多等证，疗效十分显著。为了验证该制剂的临床疗效，并将其开发成中药新药，本研究遵循中医疲劳-房劳以致肾虚的传统理论，复制“劳倦过度，房事不节”肾阳虚大鼠模型，来观察本制剂对肾阳虚大鼠的治疗作用，为其成药开发和临床应用提供可靠的药效学依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

JJ2000型精密电子天平（常熟双杰测试仪器厂）；1500型全波长酶标仪（芬兰Labsystems公司）；UV-2501型紫外分光光度计（日本岛津公司）。

1.2 试药

扶正固本胶囊（云南省药物研究所科研管理部提供，批号：20080528，规格：0.5g/粒，相当于原生药2g）；桂附地黄丸（九芝堂股份有限公司，批号：20090133）；苯甲酸雌二醇（E2）注射液（天津金耀氨基酸有限公司，批号：0905141）；黄体酮注射液（浙江仙琚制药股份有限公司，批号：090501）；戊巴比妥钠（上海润成生物科技有限公司，批号：20090428）；羧甲基纤维素钠（CMC-Na，上海山浦化工有限公司，批号：20040521）；丙二醛（MDA）测试盒（批号：20100111）、超氧化物歧化酶（SOD）测试盒（批号：20100111）由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 动物

SD大鼠，♂60只，♀120只，体重200～250g，由昆明医学院动物中心提供（动物生产许可证号：SCXK（滇）20050008）。饲养于本所天然药物筛选研究中心动物实验室。动物实验室温度：20～26℃（日温差≤4℃）；湿度：40%～70%；换气次数：10～20次/h；气流速度：0.1～0.2m·s-1；噪声：≤60dB；工作照度：150～300lx，动物照度：15～20lx；照明：12∶12h明暗交替。

2 方法

2.1 受试药物与麻醉剂的制备

2.1.1 扶正固本胶囊溶液的制备 称取扶正固本胶囊38.60g，置研砵中捣碎，加入0.5%的CMC-Na溶液210mL，制备成浓度为184mg·mL-1的溶液。配好后，再分别从中取出60mL和30mL，分别加0.5%的CMC-Na溶液稀释至120mL，其各自的浓度为92、46mg·mL-1。

2.1.2 桂附地黄丸溶液的制备 称取桂附地黄丸44.40g，置研砵中捣碎，加入0.5%的CMC-Na溶液，制备成浓度为0.37mg·mL-1的溶液。

2.1.3 戊巴比妥钠溶液的制备 称取戊巴比妥钠0.72g，溶于210mL生理盐水中，不间断搅拌至固体全部溶解后静置，制备成最终浓度为4mg·mL-1的溶液。

2.2 模型的复制[1～3]

大鼠自由饮食7d，每只♂鼠与2只动情期♀鼠同笼，用来诱导房事不节。♀鼠合笼交配前15d，戊巴比妥钠40mg·kg-1ip麻醉，无菌条件下手术切除双侧卵巢，缝合创口。交配前48h，sc苯甲酸E2100ng·kg-1；交配前4h，再次sc黄体酮注射液2.50g·kg-1。♂鼠每天上、下午各游泳1次（水温20℃），至无力即将下沉时捞出，以诱导劳倦过度。复制模型4周。

2.3 分组和给药

♂大鼠60只，随机分为正常（0.5%的CMC-Na溶液）、模型（0.5%的CMC-Na溶液）、桂附地黄丸（3.70g·kg-1）和扶正固本胶囊高、中、低剂量（1.84、0.92、0.46g·kg-1）组。ig给药，每天1次，连续30d。

2.4 扶正固本胶囊对“劳倦过度，房事不节”大鼠肾阳虚模型的影响[4，5]

2.4.1 扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠排尿量的影响 ig 28、29、30d后将大鼠放入代谢笼中，自由饮水和进食，收集12h的尿液。

2.4.2 扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠交配能力的影响 ig 30d晚20∶00-22∶00将♂鼠单独放入笼中5min，使其适应环境，然后每笼放入1只动情期♀鼠，观察记录20min内♂鼠的扑捉潜伏期、交配潜伏期、扑捉次数和交配次数。

2.4.3 扶正固本胶囊对大鼠血清中三碘甲腺原氨酸（T3）、四碘甲腺原氨酸（T4）、E2、睾酮（T）、MDA含量和SOD活性的影响

ig 31d 后取血分离血清，测定血清中 T3、T4、E2、T、SOD、MDA水平。血清中SOD、MDA的测定参照试剂盒说明书操作，T3、T4、E2、T送云南省第二人民医院检验科检测。

2.4.4 扶正固本胶囊对大鼠性器官的影响 取血后对大鼠行解剖术，取包皮腺和睾丸、前列腺和精液囊，称湿重，计算脏器指数。

2.5 统计学方法

采用统计软件SPSS17.0进行单因素方差分析，试验结果用±s表示。

3 结果

3.1 扶正固本胶囊对“劳倦过度，房事不节”肾阳虚模型大鼠血清中T3、T4的影响

模型组大鼠血清中的T3、T4水平较正常组显著降低（P＜0.05）；与模型组比较，扶正固本胶囊高剂量组大鼠中血清T3、T4的水平显著升高（P＜0.05）。结果提示，扶正固本胶囊对T3、T4的分泌有调节作用，能使肾阳虚大鼠的T3、T4水平恢复正常，其对甲状腺功能的影响略优于桂附地黄丸。扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中T3、T4水平的影响见表1。

3.2 扶正固本胶囊对“劳倦过度，房事不节”肾阳虚模型大鼠血清中SOD活性、MDA含量的影响

模型组大鼠血清中的SOD活性较正常组显著减弱（P＜0.05），MDA含量显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，扶正固本胶囊高、中剂量组大鼠血清中SOD活性显著增强，MDA的含量显著降低（P＜0.01或P＜0.05）。结果提示，扶正固本胶囊可提高SOD的活力，降低MDA的含量，其抗氧化能力较桂附地黄丸更显著。扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中SOD、MDA水平的影响见表2。

表1 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中T3、T4水平的影响（±s，n＝10）Tab1 Effect of Fuzheng guben capsule on T3and T4in blood serum of rat（s±s，n＝10）

表1 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中T3、T4水平的影响（±s，n＝10）Tab1 Effect of Fuzheng guben capsule on T3and T4in blood serum of rat（s±s，n＝10）

与正常组比较：＊P＜0.05；与模型组比较：#P＜0.05vs.normal group：＊P＜0.05；vs.model group：#P＜0.05

剂量/g·kg-1组别正常组模型组桂附地黄丸组扶正固本胶囊高剂量组扶正固本胶囊中剂量组扶正固本胶囊低剂量组- -T4/ng·dL-1 0.68±0.080.60±0.08＊0.68±0.04#0.70±0.08#0.64±0.040.62±0.083.701.840.920.46T3/pg·mL-1 1.86±0.221.50±0.23＊1.72±0.671.83±0.32#1.74±0.25#1.61±0.34

表2 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中SOD、MDA水平的影响（±s，n＝10）Tab2 Effect of Fuzheng guben capsule on SOD and MDA in blood serum of rats（±s，n＝10）

表2 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中SOD、MDA水平的影响（±s，n＝10）Tab2 Effect of Fuzheng guben capsule on SOD and MDA in blood serum of rats（±s，n＝10）

与正常组比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；与模型组比较：#P＜0.05，##P＜0.01vs.normal group：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；vs.model group：#P＜0.05，##P＜0.01

剂量/g·kg-1组别正常组模型组桂附地黄丸组扶正固本胶囊高剂量组扶正固本胶囊中剂量组扶正固本胶囊低剂量组- -MDA/nmol·mg-1 2.02±0.322.99±0.70＊＊3.00±0.392.13±0.67#2.33±0.57#2.57±0.463.701.840.920.46SOD/U·mg-1 170.00±9.19157.55±8.88＊164.85±4.16168.09±3.55##165.20±4.40#162.40±4.96

3.3 扶正固本胶囊对“劳倦过度，房事不节”肾阳虚模型大鼠血清中E2、T水平的影响

模型组大鼠血清中的E2水平较正常组显著升高（P＜0.05），T水平显著降低（P＜0.05）。与模型组比较，扶正固本胶囊高剂量组大鼠血清中E2显著降低（P＜0.01），T水平显著升高（P＜0.05）。结果提示，扶正固本胶囊能纠正肾阳虚大鼠的性激素分泌紊乱，其作用大于桂附地黄丸。扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中T、E2水平的影响见表3。

表3 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中E2、T水平的影响（±s，n＝10）Tab3 Effect of Fuzheng guben capsule on E2and T in blood serum of rat（s±s，n＝10）

表3 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠血清中E2、T水平的影响（±s，n＝10）Tab3 Effect of Fuzheng guben capsule on E2and T in blood serum of rat（s±s，n＝10）

与正常组比较：＊P＜0.05；与模型组比较：#P＜0.05，##P＜0.01vs.normal group：＊P＜0.05；vs.model group：#P＜0.05，##P＜0.01

剂量/g·kg-1组别正常组模型组桂附地黄丸组扶正固本胶囊高剂量组扶正固本胶囊中剂量组扶正固本胶囊低剂量组- -T/ng·dL-1 10.05±2.366.73±2.50＊8.36±2.569.84±3.56#7.89±2.627.73±2.223.701.840.920.46E2/pg·mL-1 55.60±11.12102.90±44.32＊98.90±43.7052.70±20.44##68.10±21.27#92.20±31.62

3.4 扶正固本胶囊对“劳倦过度，房事不节”肾阳虚模型大鼠性器官的影响

模型组大鼠包皮腺指数、睾丸指数和前列腺指数与正常组比较均无显著变化（P＞0.05）。与模型组比较，扶正固本胶囊高剂量组大鼠睾丸指数显著增加（P＜0.05）。结果提示扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠的性功能有一定的增强作用。扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠性器官的影响见表4。

表4 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠性器官的影响（±s，n＝10）Tab4 Effect of Fuzheng guben capsule on sexual organ of rat（s±s，n＝10）

表4 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠性器官的影响（±s，n＝10）Tab4 Effect of Fuzheng guben capsule on sexual organ of rat（s±s，n＝10）

与模型组比较：＊P＜0.05vs.model group：＊P＜0.05

前列腺指数7.02±0.837.69±0.917.43±1.097.56±0.987.68±1.117.44±1.12剂量/g·kg-1组别正常组模型组桂附地黄丸组扶正固本胶囊高剂量组扶正固本胶囊中剂量组扶正固本胶囊低剂量组- -3.701.840.920.46包皮腺指数0.32±0.080.40±0.100.38±0.110.40±0.060.41±0.100.39±0.07睾丸指数7.01±0.997.13±0.537.24±1.207.96±0.77＊7.42±1.737.29±1.00

3.5 扶正固本胶囊对“劳倦过度，房事不节”肾阳虚大鼠体重和排尿量的影响

模型组大鼠ig 28、29、30d的排尿量较正常组显著升高（P＜0.01），而扶正固本胶囊组大鼠排尿量明显减少。结果提示，扶正固本胶囊能使肾阳虚动物尿量频多的现象得以改善，其作用与桂附地黄丸相当。扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠排尿量的影响见图1。

图1 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠排尿量的影响（±s，n＝10）Fig1 Effect of Fuzheng guben capsule on urinary output of rat（s±s，n＝10）

3.6 扶正固本胶囊对“劳倦过度，房事不节”肾阳虚模型大鼠交配能力的影响

与正常组比较，模型组大鼠的扑捉潜伏期延长，扑捉次数显著减少，交配潜伏期显著延长，交配次数显著减少（P＜0.01或P＜0.05）。与模型组比较，扶正固本胶囊高、中剂量组大鼠交配潜伏期显著缩短（P＜0.05），交配次数显著增加（P＜0.05）。结果提示，扶正固本胶囊可提高肾阳虚大鼠的交配能力，其作用明显优于桂附地黄丸。扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠交配能力的影响见表5。

4 讨论

中医肾阳虚是指肾阳亏虚所表现出的证候，本证以腰膝酸软、性欲减退、夜尿频多与虚寒症状共见为中医辨证的主要依据[6]。现代医学研究表明，下丘脑-垂体-靶腺（肾上腺、甲状腺、性腺）轴的功能性紊乱是肾阳虚证的主要病理学基础，这三个轴中的一个或几个系统出现功能障碍时都可能引起肾阳虚证[7]。正常人血液中T3、T4、T、E2等的含量在“下丘脑-垂体-甲状腺轴、性腺轴系统”的调节下既不会增加，也不会减少，始终保持在一个相对恒定的水平上[8]，但当“下丘脑-垂体-甲状腺轴、性腺轴”出现功能障碍时，T3、T4、T、E2的分泌量就会发生紊乱。扶正固本胶囊是在临床上应用多年的中药复方制剂（是本单位预申报的六类新药，组方药物暂属保密阶段），具有培元固本、扶正祛邪之功效，临床用于治疗肾阳不足引起的腰膝酸软、畏寒肢冷、神疲乏力、性欲减退、夜尿频多等证疗效显著。

表5 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠交配能力的影响（±s，n＝10）Tab5 Effect of Fuzheng guben capsule on copulation capability of rat（s±s，n＝10）

表5 扶正固本胶囊对肾阳虚模型大鼠交配能力的影响（±s，n＝10）Tab5 Effect of Fuzheng guben capsule on copulation capability of rat（s±s，n＝10）

与正常组比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；与模型组比较：#P＜0.05，##P＜0.01vs.normal group：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；vs.model group：#P＜0.05，##P＜0.01

剂量/g·kg-1组别正常组模型组桂附地黄丸组扶正固本胶囊高剂量组扶正固本胶囊中剂量组扶正固本胶囊低剂量组--交配次数8.42±1.971.36±3.04＊＊3.09±1.415.20±1.96#4.16±1.51#2.73±1.943.701.840.920.46扑捉潜伏期/s 1.95±1.229.85±4.24＊＊8.57±3.463.87±1.88#5.60±2.98##7.79±3.99扑捉次数8.33±3.633.10±5.10＊3.18±1.076.80±2.865.54±2.753.09±2.86交配潜伏期/s 11.59±2.2317.85±5.30＊＊16.20±3.1812.04±3.99#13.18±3.48#15.35±4.13

本研究遵循中医肾阳虚理论，建立“劳倦过度，房室不节”肾阳虚大鼠模型，来观察扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠的治疗作用。结果显示，扶正固本胶囊能使肾阳虚大鼠血清中的T3、T4、SOD、T水平显著升高，E2、MDA水平显著降低；其中ig 1.84g·kg-1剂量的大鼠睾丸指数显著增加；对肾阳虚大鼠的性功能低下和多尿现象也有明显的改善作用。以上结果提示，扶正固本胶囊可能是通过修复和改善大鼠受损的下丘脑-垂体-甲状腺轴（性腺轴）系统和提高机体清除自由基能力2种方式来发挥对肾阳虚治疗作用的。

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Effect of Fuzheng Guben Capsule on Rats with Kidney Yang Deficiency Symptom Caused by Overstrain and Intemperate Sexual Intercourse

SU Mei，CUI Tao，WU De-song，XU Fang，ZHAO Chun-mei，YANG He-jin
（Nature Medicine Screening Research Center，Yunnan Institute of Materia Medica，Kunming 650111，China）

OBJECTIVE：To study the effect of Fuzheng guben capsule（FGC）on rats with kidney yang deficiency symptom caused by overstrain and intemperate sexual intercourse.METHODS：Kidney yang deficiency model was simulated by mean of overstrain and intemperate sexual intercourse.After 4weeks of intragastric administration，the urinary output，capability of copulation，sexual organ and triiodothyronine（T3），thyroxine（T4），testosterone（T），estradiol（E2），superoxide dismutase（SOD）and malondialdehyde（MDA）in blood serum were determined.RESULTS：T3，T4，SOD and T in serum were significantly increased while E2and MDA were significantly decreased in dose of 1.84g·kg-1and 0.92g·kg-1（P＜0.05orP＜0.01）.The incubation period of copulation was significantly shortened while the number of copulation was significantly increased（P＜0.05）.Testis index was significantly higher in dose of 1.84g·kg-1（P＜0.05）.Urinary output was significantly reduced in dose of 1.84g·kg-1，0.92g·kg-1and 0.46g·kg-1.CONCLUSION：Fuzheng guben capsule could improve significantly kidney yang deficiency symptom of rats.

Fuzheng guben capsule；Kidney yang deficiency symptom；Support healthy energy；Supporting healthy energy to eliminate evils

R285；R97

A

1001-0408（2011）19-1754-03

＊高级工程师，硕士。研究方向：中药药理学。电话：0871-6220009-8301。E-mail：smkms@126.com

2010-09-12

2011-01-17）

·中药工艺与制剂·