德灵BNII全自动蛋白分析仪的性能评价①

张纯林 谢松业 刘庆中

(1.江苏无锡市职业病防治医院检验科 江苏无锡 214000; 2.上海交通大学附属第一人民医院检验科 上海 200080)

德灵BNII全自动蛋白分析仪的性能评价①

张纯林1谢松业2刘庆中2

(1.江苏无锡市职业病防治医院检验科 江苏无锡 214000; 2.上海交通大学附属第一人民医院检验科 上海 200080)

目的 对德灵BNII全自动蛋白分析仪的使用性能进行评价。方法 采用质控样品和人血清样本,对BNII全自动蛋白分析仪测定免疫球蛋白G、A、M(IgG、IgA、IgM)3个项目的精密度、准确度、线性、参考区间和携带污染进行评价实验。结果 各项目批内精密度小于CLIA’88的1/4的要求(＜5%),批间精密度＜CLIA’88的1/3的要求(＜7.55%)。IgG、IgA、IgM的准确度分别为91.06%、94.83%和92.31%;线性实验表明,样本的稀释度与测定浓度值线性相关性良好;参考区间在允许范围内;携带污染符合要求。结论 德灵BNII全自动蛋白分析仪的各项主要评价指标均较好,能够准确可靠地进行临床标本分析检测 。

BNII全自动蛋白分析仪 免疫球蛋白 性能评价

德灵BNII是由西门子公司生产的一种高自动化的蛋白定量分析仪,具有高速、高效、灵活和准确的特点,全面实现了实验室蛋白定量的自动化和灵活化[1]。BNII检测蛋白的原理是通过检测蛋白与其特异性抗体形成的免疫复合物的散射光强度,而散射光的强度与标本中的浓度成正比[2]。为了更深入地了解BNII的性能,我们对该仪器检测IgG、IgA和IgM的精密度、准确度、线性范围、参考区间和样本携带污染进行了评价,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与标本

德灵BNII全自动蛋白分析仪;德灵配套IgG、IgA和IgM试剂,批号分别为153053、153155、153266;标准品(批号:83687);高值蛋白质控品(批号:52383);中值蛋白质控品(批号:52381)。血清标本来源于上海市第一人民医院正常体检者和患者。

表1 批内精密度测定结果

表2 批间精密度测定结果

1.2 方法

(1)精密度评价:检测德灵公司配套高值和中值蛋白质控品,一天内重复测定20次,计算均值(x)、标准差(S)和变异系数(CV),评价批内精密度;检测德灵公司配套高值和中值蛋白质控品,每天两次(上、下午各1次),每次重复测定2次,取均数,10个工作日完成,计算均值()、标准差(S)、变异系数(CV),评价批间精密度。(2)准确度评价:选取2010年卫生部临床检验中心室间质控品,与临床检验中心的靶值进行比较,统计其偏倚%。(3)线性评价:线性范围指分析方法能直接测定的待测物浓度或质量的范围。选取高值血清按一定比例稀释后检测,IgG的稀释倍数:1∶1.2,1∶1.5,1∶2,1∶3,1∶6,1∶12;IgA的稀释倍数:1∶1.67,1:2,1∶25,1∶3.3,1∶5,1∶10,1∶20,1∶40;IgM的稀释倍数:1∶3.3,1∶5,1∶10,1∶20,1∶40,1∶60。做回归方程Y=a+bX统计。(4)参考区间范围:选择20份体检合格的健康人标本,验证厂家提供的参考范围是否适合于本实验室。如果仅有5%的数据超出试剂说明书提供的参考范围,表示该参考范围可以用于本实验室。否者实验室应建立合适的参考范围。本实验室引用的参考区间:IgG7.00～16.00g/L、IgA0.70～4.00g/L、IgM0.40～2.30g/L。(5)携带污染分析:准备标本量足够的极高和极低浓度的样本各1份,将高浓度样本均匀分成10份,编号H1、H2、……H10,低浓度样本均匀分成11份,编号L1、L2……L11,按照一定顺序排列。统计H-L顺序结果和L-L顺序结果的均值和标准差;H-L顺序结果均值减去L-L顺序结果均值,即为携带污染量;3倍的L-L顺序结果标准差即为允许误差范围。

表3 准确度测定结果

图1 IgG线性测定结果

图2 IgA线性测定结果

图3 IgM线性测定结果

2 结果

(1)精密度评价:IgG、IgA和IgM的批内精密度都＜CLIA’88的1/4(＜5%)要求,批间精密度都＜CLIA’88(＜7.55%)的1/3的要求(表1、2)。(2)准确度:参照CIA88的允许误差的1/3(10%)作为允许偏倚,如测定偏倚在允许偏倚内,则认为该项目准确度符合要求。测定结果与2010年卫生部临床检验中心室间质控品参考值相比偏倚最小为0%(IgM),最大为-8.94%(IgA（)表3）。(3)线性范围:图中Y 值为理论值,X为实测值,做回归方程Y=a+bX统计,斜率在0.95至1.05之间,且r2≥0.95,说明线性相关性良好,见图(1～3)。(4)参考区间:20份健康人血清标本中无结果超出所验证的参考范围,实际测量健康人参考范围与我们选用的参考范围相符合。本次实验参考区间在IgG9.39～14.59g/L;IgA0.9～2.9g/L;IgA0.59～1.9g/L。实验室引用的参考区间在允许范围内。(5)携带污染分析,按照一定顺序测定极高和极低浓度的样本,IgG、IgA、IgM样本间携带污染量分别为0.198、0.07、0.01。允许误差范围分别为0.56、0.11、0.15。实验结果携带污染量非常低,均小于允许误差范围,携带污染符合要求。

3 讨论

精密度是反应同一组测量值之间彼此的接近程度,是进行其他方法学验证的前提,从精密度实验结果看,IgG、IgA和IgM的批内精密度变异系数在2.17%～4.68%之间,批间精密度变异系数在3.51%～5.54%之间,可以看出该机的重复性很好,可满足临床要求。准确度表示测量结果与真值的符合程度,本文选取2010年卫生部临床检验中心室间质控品靶值相比,因此,可以作为判断准确度的标准。本次实验的准确度介于91.06%～94.83%之间,所检测的结果与卫生部临床检验中心室间质控品靶值偏倚较小,样品的实测浓度和预期浓度非常符合,因此,可为临床提供可靠的检测结果。线性是保证临床试验结果准确性的重要法码。线性评估可以检查方法、仪器和试剂的性能,保证在可报告范围内结果的准确、可靠。本次实验线性范围IgG2.96～35.48g/L、IgA0.23～7.43g/L、IgM0.26～4.20g/L,图（1～3）结果表明,BNII检测免疫球蛋白较为理想,相关系数r(IgG、IgA、IgM)分别为:0.9968、0.998、0.9979。说明线性相关性较好,对于超过线性范围的样品,应用做适当的稀释倍数重新进行分析测定。参考范围涉及临床的诊断和治疗,因此本实验室需对厂家提供的参考范围进行验证,本实验室选取的20例正常人的标本进行分析,没有1例超出试剂说明书提供的参考范围,证实厂家的参考范围符合本实验室。临床常遇到高浓度样本对以后样本产生污染和干绕的问题,因此,评价检测系统的样本间携带污染非常重要。本实验通过对高值和低值样本的测定,其携带污染量均小于允许误差范围,表示高值标本对低值标本交叉污染小。目前的自动化的分析仪通过大量的冲洗程序可以基本解决携带污染问题[3],IgG、IgA和IgM的携带污染验证,说明该仪器具有良好的冲洗功能,交叉污染率低。

BNII支持条形码功能,采用多点定标建立参考曲线,以克服偏差,多点定标能够准确反应抗原抗体与吸光度间的关系[4]。如果使用了不同批号的抗血清,则必须建立新的参考曲线,可以更好的保证结果的准确。BNII检测项目多、速度快,具有样本稀释功能,对每个样本预先稀释再分析,预稀释样本可保留至得到检测结果,以方便自动对已稀释的样本进行复查,提高了工作效率和检验质量。综上所述,BNII能够符合其公司的设计能力,为进一步探讨免疫球蛋白在临床中的应用价值提供可靠的依据。

[1]李文波.日本7180全自动生化分析仪性能评价[J].齐鲁医学检验,2005,16(4):55～57.

[2]王兰兰,吴健民.临床免疫学与检验[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2008:252～254.

[3]邱玲,程歆琦,刘茜,等.自动生化分析仪携带污染率来源检出及处理[J].医学研究杂志,2007,36(6):64.

[4]石凌波,林龙顺,关幼华,等.载脂蛋白A1、B免疫比浊法试剂盒的评价[J].上海医学检验杂志,1999,14(1):27～29.

R19

A

1674-0742(2011)8(c)-0176-02

①通讯作者:谢松业：55岁,男,副主任技师，上海交通大学附属第一人民医院检验科，邮编200080,E-maiL:13671692739@139.com。

2011-07-18