HIE患者血清基质金属蛋白酶-9、NO水平测定及临床意义

李亚杰 高卫英

新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy HIE)是儿科临床上常见的一种神经系统疾病。既往人们对其发病机制进行了广泛研究，近年来基MMP-9、NO与HIE的关系逐渐为人们所重视。本研究旨在对40例HIE的新生儿和20例对照新生儿的血清MMP-9、NO水平进行动态观察，以探讨其在HIE病程中的作用及临床意义。

1 材料与方法

1.1 实验对象 HIE组:2007年1月至2008年6月期间在我院儿科住院、围生期有窒息并经临床或头颅CT证实有HIE的患儿40例，其中轻度15例，中度13例，重度12例。符合2005年中华医学会儿科分会新生儿学组制定的依据和临床分度标准［1］，其中男23例，女17例。对照组:同期产科足月新生儿20例，均无窒息史、严重感染史及神经系统疾病，该组患儿胎龄及获取血清时的日龄与HIE组比较，差异无显著性。

1.2 实验试剂与仪器 MMP-9、NO定量ELISA试剂盒:购于南京建成试剂公司进口分装美国PDL公司产品。BIORAD680型酶标仪(美国伯乐实验技术公司)、80-2型离心沉淀机(上海香术器械厂)、冷冻冰箱、恒温水浴箱等，硝酸。

1.3 实验方法 患儿入院后24 h内(急性期)、3 d(高峰期)、7 d(恢复期)各采取股静脉血4 ml，分离血清后置-20℃保存待测。MMP-9的测定采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法;NO的测定采用硝酸还原法。

2 结果

2.1 HIE组与对照组血清MMP-9、NO水平比较 HIE血清MMP-9、NO水平较对照组明显升高，差异有统计学意义。以发病后3 d水平升高尤著，此后呈逐渐下降趋势。与对照组相比，均 P ＜0.05，见表1。

表1 HIE组与对照组血清MMP-9水平(pg/ml)、NO水平比较(±s，ng/L)

表1 HIE组与对照组血清MMP-9水平(pg/ml)、NO水平比较(±s，ng/L)

注:实验组间结果为3 d与1及7 d有差别(P＜0.05)7 d与1 d间无差别(P＞0.05)

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表2 病变程度不同的HIE患者发病后3d血清MMP-9、NO水平(±s)

表2 病变程度不同的HIE患者发病后3d血清MMP-9、NO水平(±s)

注:重度组与轻、中度组比 ＜0.05;中、轻组间 ＞0.05，相关系数s=0.532＜0.05

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2.2 HIE病情轻重程度与患者血清MMP-9的关系 病变程度不同的各组发病后3 d患者血清MMP-9、NO水平，结果显示3组之间差异有统计学意义(P＜0.05)，两两比较结果显示重度HIE组高于中、轻度HIE组(P＜0.05)，见表2。对患儿的病情轻重程度与发病后3 d血清MMP-9、NO水平进行Spesrman等级相关分析，结果显示二者呈显著正相关，相关系数(s=0.532，P=0.007)。

3 讨论

NO是中枢神经系统的生理信使［2］，NO作为脑血管舒缩主要调节因子，在脑缺血一再灌注损伤中具有重要作用。NO过量生成或在病理性刺激时能产生神经毒性。新生儿窒息是HIE的基础，缺氧影响脑组织血管的正常灌注和微循环，而致缺氧缺血性脑损伤［3］。NO增加则通过毒性作用，自由基的损伤而加重脑缺血-再灌注损伤，导致神经死亡。MMPs是锌、钙依赖性蛋白水解酶家族，其功能是降解和重塑EMC，维持EMC的动态平衡。近年来，有人发现脑缺血及再灌注后出现MMPs增加，尤其是MMP-9和MMP-2活性增加与脑血管通透性、BBB通透性、BBB崩溃、炎细胞侵入和脑水肿明显相关［4］。本研究结果显示，与对照组相比，HIE患者血清MMP-9、NO水平于发病后1 d、3 d、7 d均升高，其发病后3 d水平升高尤著，可能与MMP-9导致BBB通透性增强、BBB崩溃及NO合成酶升高有关，进一步证实MMP-9、NO水平与HIE严重程度有关，即缺氧时间越长，脑损伤越重，MMP-9、NO水平越高。故MMP-9、NO水平亦可作为预测HIE预后的一个重要指标。MMP-9、NO为新生儿缺氧缺血性脑病的治疗提供了新靶标，其在临床的意义与应用价值有着广阔的研究前景。

［1］中华医学会儿科学分会新生儿组.新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准.中华儿科杂志2005，43(8):584.

［2］Bolanos JP，Almeida A.Roles of nitric oxide in brain hypoxiaischemia.Biochim Acta，1999，1411(2-3):415-436.

［3］殷宪敏，史宝海，杨晓雯，等.硫酸镁、脑复素、高压氧治疗HIE疗效观察.实用儿科临床杂志，2002，17(6):678-680.

［4］KMGW，GASCHE Y，GRZESCHIK S，et al.Neurodegendration instriatum induce by the mitochondrial toxin 3-nitropropionic acid:role of matrix metalloproteinase-9 in early biood-brain barrier disruption.Neuroscience，2003，23:8733-8742.