灯银脑通胶囊是中药制剂,临床用于脑动脉硬化症及其所引起的脑供血不足、脑梗塞、脑力衰退、老年性痴呆以及中风后遗症等。曾有文献报道,灯银脑通胶囊治疗脑梗死后遗症疗效满意[1],并对衰老小鼠有促智作用[2]。为进一步了解灯银脑通胶囊对大脑功能的影响,本实验主要研究其对单胺类神经神经递质的影响。
1.1 动物 ICR小鼠,体重20±2g,雌雄各半,由云南省天然药物药理重点实验室提供,动物合格证编号为:滇实动证第00205号。
1.2 试药 灯银脑通胶囊(昆明制药集团有限公司生产,批号:020316);健脑胶囊(江西广丰制药厂,批号:2001062)D-半乳糖(上海试剂二厂,批号:990102);其余化学试剂均为AR级。
附表 灯银脑通胶囊对衰老模型小老鼠脑组织单胺类递质量的影响(X±SD)
2.1 分组与给药、衰老模型建立 小鼠每天眼球后注射D-半乳糖0.12mg·g-1,连续给药一个月,制备衰老模型[3]。正常对照组小鼠注射等量注射用水,同时按分组给予相应药物,对照组和模型组给予等量溶剂。实验时将小鼠随机分为6个组。①空白对照组,灌胃给予NS(0.9%氯化钠)②造模对照组,灌胃NS。③阳性药对照组,动物造模并灌胃给予健脑胶囊溶液(0.5g·kg-1·d-1)。④~⑥组为灯银脑通胶囊低、中、高剂量组,分别灌胃给予0.5g·kg-1·d-1、1 g·kg-1·d-1、2 g·kg-1·d-1的灯银脑通胶囊(用药量分别为临床2、5和10倍的成人剂量)。各组小鼠灌胃容积均为10ml·kg-1,每日一次,连续两周。
2.2 单胺类神经递质含量测定方法 根据文献报道方法测定脑内单胺类神经递质(5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺)(按下顺序操作,并计算):取小鼠全脑,称重后加10倍体积的冷酸性正丁醇,组织匀浆器匀浆,匀浆液离心(2000rpm)500分钟,取上清液2.5ml置于内含0.1NHCL1ml和正庚烷5ml的具塞离心管中,置旋涡混匀器上充分混匀,离心(2500rpm)5分钟,从下层水相中分别取0.5ml和0.4ml,前者用于测定去甲肾上腺素和多巴胺,后者用于测定5-羟色胺,其中每个样品均需要做样品管与内标管(样品+标准品),每批实验需做一个空白管(莹光灭火管)和外标管(只含标准品)。
2.3 实验结果分析方法 采用SPSS10.0软件包处理,采用方差分析法进行分析。
灯银脑通胶囊对衰老小鼠脑组织内单胺类递质含量的影响结果详见附表1。结果显示,灯银脑通胶囊能明显提高衰老模型小鼠脑内单胺类神经递质的含量。
抑郁症的生物学基础是单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)和/或去甲肾上腺素(NE)的缺乏,5-HT参与情感、睡眠、警觉、记忆、食欲和性功能的调节,与人类的行为有密切关系,是导致抑郁症发病的重要神经递质。根据本实验结果,灯银脑通胶囊能显著提高衰老模型小鼠脑内NA、DA、5-HT等单胺类神经递质的含量。这说明灯银脑通胶囊可能具有抗抑郁作用,但其抗抑郁的作用和机制还有待于临床试验进一步的研究。