紫外分光光度法测定肿节风不同部位总黄酮的含量

励 娜，杨荣平，王宾豪，张小梅

(重庆市中药研究院，重庆 400065)

肿节风 Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai又名九节茶、草珊瑚、接骨木等，是金粟兰科草珊瑚属植物，在民间广泛用于接骨祛风、消炎解毒，现代医学研究证明其具有抗菌消炎、抗癌和增强免疫功能等功效，已制成针剂、片剂、膜剂、含漱剂、口服液等多种剂型。主要用于各种常见炎症性疾病的治疗和癌症的辅助性治疗。肿节风中所含黄酮类化合物是其主要有效成分[1]。笔者根据黄酮类化合物特性，以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法对肿节风的叶、茎、根中总黄酮进行了含量测定，现报道如下。

1 仪器与试药

UV-1601型紫外可见分光光度计、AEG-45SM型电子天平(十万分之一，日本岛津);BP121-S型电子天平(万分之一，德国Sartorius公司);HH-2型恒温水浴箱、KQ-250型超声波清洗器(巩义市英峪予华仪器厂)。肿节风(重庆红池药业有限公司提供，本院生药鉴定室秦松云副研究员鉴定);芦丁对照品(中国药品生物制品检定所，批号为100080-200306);所有试剂均为分析纯(重庆川东化工＜集团＞有限公司化学试剂厂)。

2 方法与结果

2.1 溶液制备

精密称取芦丁对照品7.03 mg，置10 mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，置水浴上微热使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀，即得质量浓度为0.703 g/L的对照品溶液。取肿节风药材各部位粉末(40目)约5 g，精密称定，置烧瓶中，加85%乙醇100 mL，冷浸30 min后，在水浴上加热回流提取3次，每次1 h，滤过，合并滤液，浓缩至50 mL，作为供试品溶液。

2.2 测定波长选择[2]

取对照品溶液和供试品溶液0.5 mL，分别置25 mL量瓶中，加5%NaNO21 mL，混匀，放置 6 min，加 10%Al(NO3)31 mL，摇匀，放置 6 min，加 NaOH试液 10 mL，加 85%乙醇至刻度，摇匀放置15 min后，在400～800 nm波长范围内扫描。结果二者在500 nm波长处有最大吸收，故选择500 nm为测定波长。

2.3 方法学考察

标准曲线绘制:精密量取对照品溶液 0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 mL，分别置25 mL量瓶中，加5%NaNO21 mL，混匀，放置6 min，加10%Al(NO3)31 mL，摇匀，放置 6 min，加 NaOH 试液 10 mL，加 85%乙醇至刻度，摇匀，放置15 min后，于500 nm波长处测定吸光度。以芦丁质量浓度为横坐标(X)、吸光度值为纵坐标(Y)进行线性回归，得回归方程 Y=0.496 2 X-0.026，r=0.999 9(n=5)。结果表明，芦丁质量浓度在0.351 5～3.163 5 g/L范围内与吸光度呈良好的线性关系。

精密度试验:精密吸取对照品溶液(0.703 g/L)1 mL，置25 mL量瓶中，依法操作，经放置显色后，于500 nm波长处测定吸光度。结果的 RSD为0.140%(n=6)，表明仪器精密度较好。

稳定性试验:取肿节风药材全草样品5 g，依法制备供试品溶液，经放置显色后，在不同时间测定其吸光度。结果样品总黄酮含量平均值为25.93 mg/g，RSD为1.55%(n=6)，表明供试品溶液在显色后60 min内基本稳定。

重现性试验:取肿节风药材全草样品，依法平行制备供试品溶液6份，经放置显色后，于500nm波长处测定吸光度。结果总黄酮的含量平均值为25.95mg/g，RSD为0.75%(n=6)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:精密称取已知含量的肿节风药材9份，精密称定。按样品中总黄酮含量的80%，100%，120%精密加入对照品，按供试品溶液制备方法制备溶液，依法测定吸光度。结果见表1。

2.4 样品含量测定

取肿节风药材各部位粉末(40目)约5 g，各5份，精密称定，按供试品溶液制备方法依法制备，各取0.5 mL，置25 mL量瓶中，依法操作，经放置显色后，于500 nm波长处测定吸光度，代入回归方程，计算总黄酮的含量(n=5)。结果叶、茎、根的平均含量分别为3.17%，2.38% ，2.11%。

3 讨论

采用紫外分光光度法测定肿节风药材中总黄酮的含量，方法快速、简便、准确、可靠，为今后肿节风中总黄酮含量的检测提供了便捷方法，同时为深入开发利用肿节风中黄酮类成分的研究奠定了基础。经检测的肿节风中，叶中的总黄酮含量高达3.17%。因此，药材肿节风中黄酮类化合物具有非常重要的开发利用价值。

表1 芦丁加样回收试验结果(n=9)

本试验仅考察了不同部位对肿节风中总黄酮含量的影响，产地、采收期等因素对肿节风中总黄酮及其他活性物质的动态变化影响还有待进一步研究。

[1]李石蓉，夏绘晶，康丽洁，等.中药草珊瑚中异嗪皮啶和总黄酮含量的分析研究[J].中南药学，2005，3(6):327-329.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:154.