黄克江,杨立伟
(黑龙江中医药大学附属第二医院,黑龙江 哈尔滨 150001)
生肌膏由黑龙江中医药大学附属第二医院制剂室制备,应用于临床数十年,主要成分为当归、紫草、白芷、轻粉、血竭、松香、甘草、川大黄等,具有清热解毒、生肌敛疮之功效,应用于临床外科疾病的溃疡收口期、创面愈合期,疗效显著。本实验对生肌膏的生肌、抗炎、镇痛作用的实验研究,为使之成为理想的创面用药提供依据,现将研究结果报告如下。
1.1 药物 生肌膏(黑龙江中医药大学附属第二医院制剂室制备并提供);马应龙麝香痔疮膏(武汉马应龙药业集团股份有限公司,批号:060305);白凡士林(哈尔滨青云石化有限公司生产,哈尔滨天鹅药业有限公司分装,原批号:20060704,分装批号:20060340);二甲苯(GP,大庆有机合成化工厂,批号:040518)。
1.2 仪器 电热恒温水浴箱(上海康迪医疗器械厂);梅特勒AL-204电子天平(梅特勒托利多(上海)仪器有限公司);美国斯密尔系统(Semile ASP200脱水机、Semile RM3255切片机、Semile HI1210摊片机、Semile HI1220烤片机、Semile ST5020染色机、Semile CV5030盖片机、Semile DM60000B显微镜,Nussloch Comble公司生产)。
1.3 动物 昆明种小鼠、SD大鼠(黑龙江中医药大学实验动物中心提供,许可证号:SCXH(黑)2006-0006);鼠用全价饲料(黑龙江中医药大学实验动物中心提供,许可证号:SCXH(黑)2006-0008);黑龙江省药物研究所动物使用许可证号:SCXH(黑)2006-0002。
2.1 大鼠塑料环肉芽肿实验[1,2]取SD大鼠30只,随机分为3组:空白对照组(空白组)、马应龙麝香痔疮膏组和生肌膏组(阳性药组)各10只。麻醉、备皮、消毒,将聚乙烯塑料环埋入大鼠背部皮下,缝合。术后第2天分组给药,每天向各组大鼠塑料环涂相应药物1次,10天后断头处死大鼠,取下塑料环,剥离肉芽组织,用电子天平称重。之后将肉芽组织作病理组织学检查,常规HE染色,观察毛细血管数、纤维结缔组织增生情况。
2.2 小鼠镇痛实验(热板法)[3]实验前对雌性小鼠进行筛选,取合格小鼠26只,随机分为3组:空白对照组和马应龙麝香痔疮膏组各8只,生肌膏组10只。各组均在给药前痛阈值测完后左右后肢均涂敷给药2次,间隔20min,末次给药20、40、60min后分别测小鼠痛阈值1次。
2.3 小鼠耳廓急性炎症实验(二甲苯致小鼠耳廓肿胀法)[1]取体重18~23g雄性小鼠30只,随机分为3组:空白对照组、马应龙麝香痔疮膏组和生肌膏组各10只,连续鼠耳两面涂药,给药3天。第3天给药后30min,以二甲苯0.05mL涂于小鼠右耳两面致炎,30min后再次给药,30min后将小鼠脱颈椎处死,沿耳廓基线剪下两耳,再用打孔器打耳片,电子天平称重。以每鼠右耳片重量减去左耳片重量为肿胀程度,计算肿胀抑制率。
3.1 生肌膏的生肌作用 见表1~2。
表1 生肌膏对大鼠塑料环肉芽肿的影响
表2 各组肉芽组织毛细血管和成纤维细胞数的比较(±s)
表2 各组肉芽组织毛细血管和成纤维细胞数的比较(±s)
注:与空白组比较,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.001。
5 3.4±0.55 7.6±1.81阳性组 5 6.6±1.52** 23.2±2.17***生肌膏组 5 7.6±2.88* 25.4±5.81毛细血管 成纤维细胞空白组组别 视野数(n)***
3.2 生肌膏的镇痛作用 见表3。
表3 生肌膏对小鼠痛阈值的影响(±s)
表3 生肌膏对小鼠痛阈值的影响(±s)
注:与自身给药前比较,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.001。
组别 n给药前痛阈值(s)给药后痛阈值20min 40min 60min空白组8 22.6±3.2 17.0±5.1 21.3±5.9 26.1±4.5阳性组 8 23.8±4.5 28.0±9.2* 40.1±12.5** 37.6±13.2*生肌膏组 10 25.4±5.4 24.8±13.6 35.2±8.4***34.7±12.9
3.3 生肌膏的抗炎作用 见表4。
表4 生肌膏对小鼠二甲苯耳廓肿胀的影响(±s,mg)
表4 生肌膏对小鼠二甲苯耳廓肿胀的影响(±s,mg)
组别 动物数(n) 肿胀度 肿胀抑制率(%)空白组10 20.0±1.5-阳性药组 10 15.1±5.3 24.5生肌膏组10 17.4±3.1 13.0
本实验研究证明,生肌膏能显著促进肉芽组织增生,肉芽病理组织学检查也证实该药能显著增加视野内毛细血管和成纤维细胞数;成纤维细胞主要功能是合成胶原,胶原是创口愈合过程中细胞外的最主要基质,并能增加纤维结缔组织增生,从而有利于创伤和溃疡的修复。生肌膏能显著提高小鼠热板法痛阈值,抑制小鼠二甲苯致耳廓肿胀。实验研究表明,生肌膏在生肌、抗炎、镇痛方面具有显著性作用,佐证了生肌膏的临床疗效,且为临床应用提供了必要的实验依据。
[1] 陈奇.中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,1994:377,367.
[2] 张亚西,曾亚男.单氏丁桂散促进创疡愈合的实验研究[J].中国中西医结合外科杂志,2002,8(6):431.
[3] 文莉,舒成仁.宁血消痔栓镇痛作用的研究[J].时珍国医国药,2005,16(1):4.