血红蛋白释放试验与血液流变学检测结果相关性的研究

王翠峰 ，高丽君 ，乌 兰 ，苏 燕 ，徐 军 ，周立社 ，秦文斌

（1.包头医学院第一附属医院检验科，内蒙古包头 014010；2.包头医学院血红蛋白研究室，内蒙古包头 014010）

2007年，本研究组在研究1例轻型β-地中海贫血病例的红细胞电泳过程中偶然发现，在停电一段时间后再次电泳，该患者标本从原点释放出较多的血红蛋白，从而开始创建血红蛋白释放试验（HRT）[1]。利用这种技术筛查一些普通外科住院患者的血液，其中有4例胆结石标本的HRT结果有差异，另1例标本是脑梗死后遗症，其HRT异常最明显[2]。在大量筛查过程中，笔者也注意到脑梗死及其后遗症患者HRT增强者较多。由于血液流变学检测在脑梗死辅助诊断中有一定的参考意义[3-6]，故决定研究HRT与血液流变学结果的关系，探讨前者的可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 血液样品来源

患者全血标本均来自包头医学院第一附属医院检验科2008年12月～2009年2月共48例门诊样本。所用仪器为普利生N6C全自动血液流变学分析仪。本文使用的数据来自血液流变学检测报告单。

1.2 低渗37℃ HRT

每个标本取全血 8 μl，加双蒸水 12 μl，混匀后 37℃水浴保温2 h。使用我科研究室的常规-淀粉琼脂糖混合凝胶电泳[1]，将保温后的标本借助3 mm滤纸加在凝胶的阴极侧。第一次电泳2 h（5 V/cm）。停电30 min后再电泳30 min，共3 h。然后用丽春红、联苯胺染色，拍照留图。

1.3 结果判定

首先观察第2次释放（定点释放）时有无血红蛋白泳出，有定点释放血红蛋白者判为阳性结果，无则为阴性（定为0级）。出现阳性结果者进行数量比较。定点释放的血红蛋白数量可参考碳酸酐酶、血红蛋白A1、A2区带，由少到多定为1、2、3、4 级。

1.4 统计学分析

使用SPSS 11.0软件进行分析。用Spearman相关分析计算出HRT与全血黏度的高切、中切、低切的相关性，P＜0.05表示有显著性差异。

2 结果

2.1 HRT结果

一次电泳检测12个定点释放结果见图1。

2.2 相关分析结果

HRT与各种全血黏度值的相关系数分别为：HRT与低切 r=0.642（P＜0.001）、HRT 与中切 r=0.636（P＜0.001）、HRT 与高切 r=0.641（P＜0.001）。

3 讨论

HRT创建不久，由于它能在诸多临床标本中发现差异、查出问题，引起极大关注。地中海贫血是一种遗传性疾病，本法能查出患者及其家族成员[1]，这在理论和实践上都有重要意义。接着又将HRT深化和细分为室温等渗HRT（上述HRT属于此类）、室温低渗 HRT、等渗 37℃ HRT、低渗 37℃ HRT，灵敏度逐级提升，效果更加明显。笔者利用低渗37℃HRT筛查一些普通外科住院患者的血液，其中有4个胆结石标本，其HRT结果有明显差异，另1例脑梗死后遗症患者，其HRT最明显[2]。由遗传性疾病到普通外科患者，都能进入本项技术的检测范围，它的作用机制如何，这是迫切需要解决的问题。HRT机制研究涉及面很广，本文从它与血液流变学关系角度来探讨HRT的作用机制。

本实验证明，HRT与血液流变学结果有一定的相关性。几种全血黏度值中，低切反应细胞的聚集性、高切反应细胞的变形性，HRT与两者都有关，说明红细胞的变形能力降低，聚集性增强，黏度加大，造成第一次释放后原点残留增多，第二次释放时才离开红细胞，表现为再释放血红蛋白增多。已知与红细胞变形性有关的疾病很多，地中海贫血也是其中之一，血红蛋白H病、重型β地中海贫血等红细胞的变形能力明显降低，而轻型β地中海贫血红细胞的变形能力接近正常[7]。这在总体上与本研究结果相符，但在细节上略有不同，本研究组的研究能够非常清楚地查出轻型β地中海贫血[1]，可见，HRT的反应能力更强，其作用机制可能还包括红细胞变形性和聚集性以外的因素，HRT的机制尚待深入研究。

[1]秦文斌,高丽君,苏燕,等.血红蛋白释放试验与轻型β-地中海贫血[J].包头医学院学报,2007,23(6):561.

[2]韩丽红,闫斌,高雅琼,等.普通外科患者血红蛋白释放试验的比较研究[J].临床和实验医学杂志，2009,8(6):67-68.

[3]秦任甲.临床血液流变学[M].北京:北京大学医学出版社,2006.

[4]董曼莉,逢淑华,翟关中,等.脑梗塞病人血液流变学的变化[J].中国血液流变学杂志,2004,14(2):221.

[5]高中芳,席向红.老年脑梗塞患者血液流变学指标检测分析[J].中国血液流变学杂志,2005,15(1):73.

[6]丁翊,赵红红.脑梗塞患者血液流变学和血脂指标测定[J].微循环杂志,2004,14(3):88,90.

[7]金永娟.红细胞可变形性与溶血性贫血[J].中华血液学杂志,1987,8(2):85.